层状近明球囊霉菌株HTJ2-60及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别涉及层状近明球囊霉菌株HTJ2‑60及其应用。本发明专利技术公开了保藏编号为CGMCC NO.19622的菌株Claroideoglomus lamellosum HTJ2‑60，该菌株在柑橘砧木资阳香橙根系的侵染率可达到96.67％，接种该菌株后，对柑橘有明显的促生长的功效，柑橘砧木资阳香橙的茎粗比对照组提高了10.06％；株高比对照组提高了49.24％；叶片数增加了32.35％；可见该菌株对柑橘的促生效果显著，同时，该菌株还具有良好的对柑橘黄龙病的抑制作用，其60d相对防效可达到35％；具有良好的开发价值。

【技术实现步骤摘要】
层状近明球囊霉菌株HTJ2-60及其应用
本专利技术涉及生物
，特别涉及层状近明球囊霉菌株HTJ2-60及其应用。
技术介绍
丛枝菌根(ArbuscularMycorrhizal，AM)是由球囊菌门(Glomeromycota)真菌与植物根系形成的互惠共生体，自然界中80％以上的陆生植物能与其建立共生关系。研究发现，AM真菌能促进植株对营养和水分的吸收，进而促进植物的生长，提高植物的抗逆性。AM真菌可调节次生代谢物的合成，改善植物根际微环境，对土传病害有一定的抑制效应。但是在申请人的研究中发现，并非所有的AM真菌都能实现对植物的促生长，同样的也不一定具有抑制病虫害的功效，这与菌株对不同植物根部的不同侵染作用和菌株本身的特性有关。虽然同是对植物具有侵染效果的AM真菌，但由于菌株不同，有的菌株能促进植物生长，而有的菌株却抑制植物生长，且同一菌株对不同植物的生长促进或抑制作用是不一样的，为此，有必要加强对此类微生物的利用，坚持不懈的在此领域不断开展菌株鉴定和筛选工作，筛选出更多具有促生效果的菌株，有助于提高植物抗逆性，改善土壤生态，提高土壤肥料的利用率。目前，申请人团队研发、筛选了多株AM真菌，并验证了其效果，例如申请号为202010719127.4专利技术名称为《一株黄雷德克囊霉FS-1-106及其应用》的丛枝菌根真菌，该菌株由申请人从广西崇左市扶绥县的柑橘根际土壤分离而得，属于Redeckera属fulvum种，具有促进柑橘砧木生长的作用；但是该菌株与本申请不同种属，是两株完全不同的菌株，虽然丛枝菌根真菌在菌根种苗和生物肥中具有广阔的开发利用前景，但是目前其应用的难点还是在于AM真菌涉及的微生物种类繁多分类鉴定比较困难，筛选工作繁琐和缓慢，而且不同植物有不同的优势菌株，为此，只有不断筛选、研发完善资源库，才能使得AM真菌最终能推广应用。
技术实现思路
鉴于上述内容，筛选出更多对植物具有良好促生作用的AM真菌菌株，也是目前能利用AM真菌来减少化学肥料用量的最佳手段，本专利技术目的在于提供一种AM真菌菌株，该菌株为ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60，其具有促进柑橘砧木生长的应用。为达到上述目的，本专利技术筛选出一株丛枝菌根真菌菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60，其保藏编号为CGMCCNO.19622。属于真菌界，Claroideoglomus属，lamellosum种。所述丛枝菌根真菌菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNO.19622，保藏日期为2020年4月13日。本专利技术还包括所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60在促进柑橘砧木生长上的应用。进一步的，所述柑橘砧木为资阳香橙。本专利技术还包括所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60的菌剂。进一步的，所述菌剂以玉米或三叶草为宿主制备而得。本专利技术还包括一种应用所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60促进柑橘生长的方法，所述方法为：将柑橘砧木种子直接播种到带有HTJ2-60菌剂的种苗繁育基质中。本专利技术还包括一种应用如权利要求1所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60促进柑橘生长的方法，所述方法为：将柑橘种苗直接移栽至带有HTJ2-60菌剂的栽培基质中。本专利技术还包括所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60在抑制柑橘黄龙病上的应用。本专利技术还包括一种应用所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60抑制柑橘黄龙病的方法，所述方法为在植物的根部接种HTJ2-60菌剂。本专利技术具有以下有益效果：本申请的新菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60能够有效促进柑橘砧木资阳香橙的生长，柑橘植株在接种了该菌株后，茎粗比对照组提高了10.06％；株高比对照组提高了49.24％；叶片数增加了32.35％；可见该菌株对柑橘的促生效果显著；是一株对柑橘具有有良好促生效果的AM真菌菌株；同时，该菌株还具有良好的对柑橘黄龙病的抑制作用，柑橘砧木资阳香橙嫁接甜橙病芽后，其60d相对防效可达到35％；在同等条件下，接种HTJ2-60菌剂的植株较对照组仍然保持有较好的生长能力，将其应用在农业生物菌肥具有很好的应用前景。【附图说明】图1为本专利技术HTJ2-60的孢子形态图；其中，a为在浮载剂无菌水中孢子及产孢子囊形态图(暗视野)；b为浮载剂PVLG中孢子及脱落痕形态结构图；c为浮载剂Melzer's+PVLG试剂中孢壁结构及染色反应图；d为乳酸酚棉蓝试剂中孢子及脱落痕形态结构图；图2为本专利技术菌株HTJ2-60的系统发育树图；图3为本专利技术菌株HTJ2-60对柑橘砧木资阳香橙的根系侵染情况图，图中，a为实验组菌株HTJ2-60侵染柑橘砧木资阳香橙根系的丛枝结构放大图；b为对照组CK的柑橘砧木资阳香橙根系放大图；c为柑橘砧木资阳香橙根系内HTJ2-60菌丝的生长情况放大图；d为柑橘砧木资阳香橙根系内HTJ2-60菌株的囊泡生长情况放大图；图4为接种本专利技术菌株HTJ2-60对柑橘砧木资阳香橙生长的影响图，图中AM为接种HTJ2-60的植株，CK为对照植株。【具体实施方式】下面结合附图和实施例和试验对本专利技术作进一步说明。实施例1：本专利技术筛选出一株层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60。属于真菌界，Claroideoglomus属，lamellosum种。所述菌株HTJ2-60保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNO.19622，保藏日期为2020年4月13日。菌株HTJ2-60采用湿筛倾注蔗糖离心法从广西南宁市武鸣区香蕉根际土壤及生姜根际土壤的原始土壤和富集培养的基质中采用单孢分离、纯化和繁殖获得的单一菌株。对菌株HTJ2-60进行研究后，认为其属于层状近明球囊霉菌株，其分类标准如下：1、菌株的形态学分类孢子：土壤中单生，球形或近球形，黄至黄棕色，73.08-112.90×74.31-114.27(87.67×91.89)μm。反射光下沿孢壁有一圈深色。孢子壁：三层，4.02-8.32(5.47)μm。L1：淡黄色至淡棕黄色层状壁，厚2-5μm，在Melzer’s试剂中不反应，棉兰试剂反应中成浅蓝色。这一层容易降解形成片状。L2由薄而紧密的淡黄色至淡棕黄色的亚层组成，在Melzer’s试剂和乳酸酚棉蓝试剂中均不反应。L3是与L2同色的薄层，厚度小于1μm，其内本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.层状近明球囊霉菌株Claroideoglomus lamellosum HTJ2-60，其保藏编号为CGMCCNO.19622。/n

【技术特征摘要】
1.层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60，其保藏编号为CGMCCNO.19622。


2.如权利要求1所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60在促进柑橘砧木生长上的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述柑橘砧木为资阳香橙。


4.包含如权利要求1所述层状近明球囊霉菌株ClaroideoglomuslamellosumHTJ2-60的菌剂。


5.如权利要求4所述菌剂的制备方法，其特征在于，所述菌剂以玉米或三叶草为宿主制备而得。


6.一种应用如权利要求1所述层状近明球囊霉菌株Claroideoglomuslamel...

【专利技术属性】
技术研发人员：张金莲，陈廷速，刘金华，康贻豪，李冬萍，汪茜，宋娟，钟泽橙，温云英，高日芳，尚鹏祥，张锡唐，张师音，程通，胡柳，罗文新，葛胜祥，夏宁邵，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院，厦门大学，浙江养生堂天然药物研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45