一种具有高阶重复性及重现性的电化学快扫伏安方法及其分析应用技术

本发明专利技术公开了一种具有高阶重复性及重现性的电化学快扫伏安方法及其分析应用，该方法呈现的数据形式具有明显的高阶重现性及重复性特点，在几百个周期的数据结果高度一致。通过改变TdT(0.1～190U/mL)或PP(0～9mM)在混合反应液中的终浓度，采用FSCV对传感器进行测试，设置初始电位为0V，终止电位为1V，扫速设置为400V/s，基于此将该快扫方法应用于TdT及其小分子抑制剂的分析检测，具有灵敏度高、特异性强、分析时间短响应速度快、制备简单并且能够输出高阶重复性及重现性的电化学信号，可以很好地实现较低浓度的TdT活性分析，检测限分别为

【技术实现步骤摘要】
一种具有高阶重复性及重现性的电化学快扫伏安方法及其分析应用


[0001]本专利技术涉及两个领域：电化学分析技术及生物传感，尤其是涉及一种具有高阶重复性的电化学快扫伏安方法，并应用于末端脱氧核苷酸转移酶及其小分子抑制剂的生物传感分析。

技术介绍

[0002]末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)不同于其他DNA聚合酶，具有以独立于模板的方式将核苷酸掺入单链DNA的3`
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OH端的特殊能力。TdT基因的表达通常在大多数人体细胞中被抑制，但在急性淋巴细胞性白血病细胞和一些其他白血病相关的细胞中则异常高。值得注意的是，急性淋巴细胞白血病在儿童期最常见的癌症中占比约25％，这样来看，TdT的检测对于癌症相关药物的开发和基础生化研究至关重要。尽管TdT生物功能强大，但传统的TdT活性检测方法是将凝胶电泳与放射性标记结合、生化测定和免疫分析，这些方法非常经典，但同时经常会遭到固有缺点的限制，包括有害辐射、灵敏度低或者是操作复杂，非常浪费时间。近年来，对于TdT的及其小分子抑制剂的分析开发了几种新方法，包括荧光法、比色法和电化学发光法。然而，这些方法本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有高阶重复性及重现性的电化学快扫伏安方法及其分析应用，将该方法成功应用于TdT分析，其特征在于包括以下步骤：首先巯基DNA引入金电极表面，利用TdT独特的聚合延长作用将dTTP不断延伸到巯基DNA的3`
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OH端，使其延伸为poly
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T DNA长链。其次，引入固定浓度的Hg
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溶液，基于T碱基与Hg
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之间的强亲和力，形成T
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Hg
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T特异性结构，于是在电极表面富集了一定量的Hg
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，成功制备传感器。通过我们搭建的快速扫描装置进行电化学信号输出，利用Hg
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本身作为信号分子，通过加入不同终浓度的TdT溶液实现对其活性的检测；固定TdT的浓度，加入不同浓度的PP，实现对TdT抑制剂的分析。基于此，本发明构建的具有高阶重复性及重现性的电化学快扫伏安方法应用于TdT及其小分子抑制剂的分析检测，具有灵敏度高、特异性强、分析时间短响应速度快、制备简单并且能够输出高阶重复性及重现性的电化学信号等优点，可以很好地实现较低浓度的TdT活性分析，具有良好的应用前景。2.根据权利要求1所述一...

【专利技术属性】
技术研发人员：王琦，郭智勇，胡宇芳，郝婷婷，王邃，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：