重组酵母细胞制造技术

本发明专利技术涉及用于高产率蛋白质表达的重组酵母细胞。本发明专利技术进一步涉及关于所述重组酵母细胞的细胞培养、关于培养所述重组酵母细胞的蛋白质制备方法以及所述重组酵母细胞的用途。蛋白质制备方法以及所述重组酵母细胞的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】重组酵母细胞
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2018年11月19日提交的美国申请第62/769,169号的优先权权益，所述美国申请的内容通过引用整体并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含根据“按照专利合作条约(PCT)在国际专利申请中呈现核苷酸和氨基酸序列表的标准(Standard for the Presentation of Nucleotide and Amino Acid Sequence Listings in International Patent Applications Under the Patent Cooperation Treaty(PCT))”ST.25以ASC II文本(.txt)文件呈计算机可读形式(CRF)的核苷酸和氨基酸序列表。序列表在以下鉴别出，并且以全文引用的方式并且出于所有目的并入本申请的本说明书中。
[0005]文件名创建日期大小(字节)180262US01_SequenceListing.txt11/16/201829.4KB(30,172个字节)
技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包括至少第一表达盒的重组酵母细胞，所述第一表达盒包括(a)启动子，所述启动子包括根据SEQ ID No:1到8中任一个所述的核酸序列或其功能片段或与根据SEQ ID No:1到8中任一个所述的核酸序列具有至少80％同一性的核酸序列，其可操作地连接至(b)编码前导肽的核酸序列，所述前导肽包括根据SEQ ID No:9到15中任一个所述的氨基酸序列或与根据SEQ ID No:9到15中任一个所述的序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；以及(c)编码重组蛋白的核酸序列。2.根据权利要求1所述的重组酵母细胞，其进一步包括第二表达盒，所述第二表达盒包括(a)启动子，所述启动子包括根据SEQ ID No:1到8中任一个所述的核酸序列或其功能片段或与根据SEQ ID No:1到8中任一个所述的序列具有至少80％同一性的核酸序列，其可操作地连接至(b)编码前导肽的核酸序列，所述前导肽包括根据SEQ ID No:9到15中任一个所述的氨基酸序列或与根据SEQ ID No:9到15中任一个所述的序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；以及(c)编码所述重组蛋白的核酸序列。3.根据权利要求1或2所述的重组酵母细胞，其中所述重组酵母细胞缺乏至少一个标志物基因，并且可以包括编码所述标志物的重组核酸序列。4.根据权利要求3所述的重组酵母细胞，其中所述标志物基因是营养缺陷型标志物基因。5.根据权利要求4所述的重组酵母细胞，其中所述营养缺陷型标志物基因选自由以下组成的组：ura3、his4、ade2、arg4、ade1、ura5、met2、lys2、pro3和tyr1。6.根据权利要求3所述的重组酵母细胞，其中所述标志物基因是抗生素抗性标志物基因。7.根据权利要求6所述的重组酵母细胞，其中所述抗生素抗性标志物基因选自由以下组成的组：博莱霉素抗性基因、卡那霉素抗性基因、新霉素抗性基因、G418抗性基因和潮霉素抗性基因。8.根据权利要求1到3中任一项所述的重组酵母细胞，其中所述重组酵母细胞缺乏第一标志物基因和第二标志物基因，并且包括编码所述第一标志物的重组核酸序列和编码所述第二标志物的重组核酸序列。9.根据权利要求1到8中任一项所述的重组酵母细胞，其中所述第一表达盒和任选的所述第二表达盒被稳定整合到所述酵母细胞的基因组中。10.根据权利要求8或9所述的重组酵母细胞，其中所述第一标志物基因和所述第二标志物基因独立地选自营养缺陷型标志物基因。11.根据权利要求10所述的重组酵母细胞，其中所述第一标志物基因和所述第二标志物基因独立地选自由以下组成的组：ura3、his4、ade2、arg4、ade1、ura5、met2、lys2、pro3和tyr1。12.根据权利要求8或9所述的重组酵母细胞，其中所述第一标志物基因和所述第二标
志物基因独立地选自抗生素抗性标志物基因。13.根据权利要求12所述的重组酵母细胞，其中所述第一抗生素抗性标志物基因和所述第二抗生素抗性标志物基因独立地选自由以下组成的组：博莱霉素抗性基因、卡那霉素抗性...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭旭秋，钟静萍，M，
申请(专利权)人：巴斯夫欧洲公司，
类型：发明
国别省市：