用于检测猪圆环病毒的三重PCR引物及试剂盒制造技术

技术编号:29060312 阅读:27 留言:0更新日期:2021-06-30 09:02
本发明专利技术提供了用于检测猪圆环病毒1型、2型和3型的三重PCR引物试剂盒。利用本发明专利技术提供的三重PCR检测试剂盒可在2小时内对三种病原同时进行检测,所使用的材料价格便宜,所使用的仪器在大多数畜牧场均有配备,并且该方法特异性强,敏感性高,非常适用于临床对猪圆环三种病原的诊断、流行病学调查以及实验室对该三种病原的初步筛查。病原的初步筛查。

【技术实现步骤摘要】
用于检测猪圆环病毒的三重PCR引物及试剂盒


[0001]本专利技术属于生物
,具体涉及一种用于检测猪圆环病毒的三重PCR引物、检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]对全球养猪业具有重大影响的猪病-猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的病原体就是猪圆环病毒(PCV)。目前报道了三种基因型,分别为猪圆环病毒1型(PCV1),猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)。
[0003]猪圆环病毒(PCV)的全基因组大小一般为2000bp左右,属圆环病毒科圆环病毒属,病毒粒子形态为对称的二十面体,不具备囊膜结构。PCV1是首个被发现的PCV病毒,当时被认为是猪肾细胞系传代过程中出现的污染物,但通过观察发现其可以在PK-15细胞系中持续传代但是并不引起细胞病变,1982年通过进一步研究,证明其为一种环状单链DNA病毒,并将其命名为猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)。20世纪90年代早期,在加拿大多个猪场发现爆发断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),通过检测发现PCV2是该病的主要病原。在随后的几年,世界各个本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测猪圆环病毒的三重PCR引物,其特征在于,其中,猪圆环病毒1型的检测引物,由SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的正向引物和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列的反向引物组成;猪圆环病毒2型的检测引物,由SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列的正向引物和SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列的反向引物组成;猪圆环病毒3型的检测引物,由SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列的正向引物和SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列的反向引物组成。2.权利要求1所述的用于检测猪圆环病毒的三重PCR引物在制备检测猪圆环病毒的制品中的应用。3.一种用于检测猪圆环病毒的三重PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的用于检测猪圆环病毒的三重PCR引物。4.如权利要求3所述试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括10
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Taq Buffer、dNTP、MgCl2、Taq酶、阳性质控品、阴性质控品。5.如权利要求3所述试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中阳性质控品为:猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型重组质粒以及猪圆环病毒3型全基因组质粒。6.如权利要求5所述试剂盒,其特征在于,所述阳性质控品中猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型重组质粒的构建方法为:设计猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型的特异性引物,通过克隆后连接pMD-18T载体,即得猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型重组质粒;其中,猪圆环病毒1型特异性...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘爵郭雨欣姜海军侯磊王菁韦莉朱珊珊全荣王丹李子璇袁枫宋慧琦于慧奚衍洋吕莫然
申请(专利权)人:北京市农林科学院
类型:发明
国别省市:

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