一种使用CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖的联合给药系统、方法和用途技术方案

本发明专利技术公开了一种使用CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖的联合给药系统，属于癌症的免疫治疗领域，本发明专利技术抑瘤效果显著，较单独用药或以复合物的联合给药更能发挥CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖的联合抑瘤效果，尤其是提前注射β-1，3-葡聚糖比CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖一起给药抑瘤效果好。葡聚糖一起给药抑瘤效果好。

【技术实现步骤摘要】
一种使用CpG寡脱氧核苷酸和
β-1，3-葡聚糖的联合给药系统、方法和用途


[0001]本专利技术涉及癌症的免疫治疗领域，具体涉及一种使用CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖的联合给药系统、方法和用途。

技术介绍

[0002]CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)是包含免疫刺激CpG基序的短的(约20个碱基对)、单链的合成DNA片段，可以通过激活Toll样受体9来刺激机体的先天免疫和获得性免疫系统，主要包括可以直接激活B细胞、树突状细胞、巨噬细胞、抗原递呈细胞等；间接激活T细胞、NK细胞；诱导以TH1型为主的免疫应答，最终使得机体内的CD8+T细胞、Type I IFN增加，因此该CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)在肿瘤免疫治疗中有着强大的潜在应用价值。
[0003]目前存在四种类型的CpG寡脱氧核苷酸，其每一种具有不同的骨架、序列和免疫刺激特性。A型CpG寡脱氧核苷酸通常包含具有磷酸二酯(PO)骨架和硫代磷酸酯(PS)多G尾的一个回文CpG基序，通过G残基形成分子间四分体和高分子量聚集体，增强稳定性，增加内体摄取和配体浓度，从而使其活化类浆细胞DC(pDC)以产生大量的IFN-α，但无法诱导pDC成熟和B细胞活化。其他三类(B，C，P型)CpG寡脱氧核苷酸由硫代磷酸酯(PS)骨架组成，B型CpG寡脱氧核苷酸是不含回文的多CpG基序，最有效的激活人类细胞的ODN通常有三个CpG基序，额外的CpG基序不能进一步增强活性，并且在18到26个核苷酸之间，能强烈活化B细胞以产生IL-6，但几乎不产生IFN-α；C型CpG寡脱氧核苷酸由一个位于5
′
端或近5
′
端的刺激性六聚CpG基序组成，并由一个T间隔基连接到一个富含GC的回文序列，具有类似于B型CpG寡脱氧核苷酸的一些序列要求，并结合了A型和B型的特性，刺激B细胞和活化类浆细胞DC(pDC)。P型CpG寡脱氧核苷酸分别含有两个回文CpG基序，也可以如B型活化B细胞和如A型活化类浆细胞DC(pDC)。
[0004]β-1,3-葡聚糖是一类主链由β-1,3-糖苷键连接而成的多聚糖,通常因来源不同而含有不同比例和大小的β-1,2/β-1,4/β-1,6-连接的支链，如香菇多糖和裂褶菌多糖(SPG)等。β-1,3-葡聚糖可以通过调节各种细胞因子的合成释放，清除自由基的方式来解除由环磷酰胺所引起的免疫抑制作用，除此之外还展现出了更为广泛的免疫学活性，包括：激活巨噬细胞、树突状细胞和和单核细胞，诱导NO的合成，调控与免疫反应相关的细胞信号传递，降低电离辐射对机体免疫力的损伤，促进免疫球蛋白的合成等。香菇多糖是一种以β-D(1
→
3)葡聚糖残基为主链，侧链为(1
→
6)葡聚糖残基的葡聚糖，具有免疫增强作用，可通过增强机体的免疫功能而发挥抗肿瘤活性。裂褶菌多糖(SPG)，一种来源于裂褶菌的可溶性β-1，3-葡聚糖，是在日本被批准作为宫颈癌患者的放疗增强剂的药物，持续使用近三十年。
[0005]基于CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)及β-1,3-葡聚糖在肿瘤免疫治疗的作用机理及应用价值，目前已有两者联用的研究，如专利CN105683372A中公开了一种具有免疫增强活性的包含寡核苷酸的复合体及其用途，将B型CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖组合成一个复合体，进行一起给药。但是其治疗肿瘤的效果不佳，不能发挥两者联合最大的抑瘤效果。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于解决CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖联合治疗癌症效果不佳的问题，提供一种CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖的联合给药系统，抑瘤效果显著，较单独用药或以复合物的联合给药更能发挥CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖的联合抑瘤效果，尤其是提前注射β-1，3-葡聚糖比CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖一起给药抑瘤效果好。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]一种肿瘤免疫治疗联合给药系统，包含CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖。
[0009]进一步的技术方案，该给药系统的使用方法为先用β-1，3-葡聚糖，再用CpG寡脱氧核苷酸或者β-1，3-葡聚糖、CpG寡脱氧核苷酸同时用药。
[0010]进一步的技术方案，所述的使用方法中，β-1，3-葡聚糖提前0-3周给药。
[0011]进一步的技术方案，所述的β-1，3-葡聚糖使用的给药方式为口服、肌注或全身静脉给药，优选全身静脉给药。
[0012]进一步的技术方案，所述的CpG寡脱氧核苷酸使用的给药方式为瘤内或瘤旁给药。
[0013]进一步的技术方案，所述的β-1，3-葡聚糖为以β-(1
→
3)葡聚糖为主链、β-(1
→
6)葡聚糖为侧链的葡聚糖。
[0014]进一步的技术方案，所述的β-1，3-葡聚糖指的是香菇多糖或裂褶菌多糖，优选β-(1
→
3)葡聚糖为主链，β-(1
→
6)葡聚糖为侧链的香菇多糖，香菇多糖分子量40万-80万。
[0015]进一步的技术方案，所述的CpG寡脱氧核苷酸及β-1，3-葡聚糖为冻干制剂或注射液。
[0016]进一步的技术方案，所述的β-1，3-葡聚糖中包括辅料，辅料为甘露醇或氯化钠。
[0017]进一步的技术方案，所述的CpG寡脱氧核苷酸中包括辅料，辅料为甘露醇、蔗糖、氯化钠、HPES或磷酸缓冲盐。
[0018]进一步的技术方案，所述的CpG寡脱氧核苷酸与β-1，3-葡聚糖给药剂量比例为1：0.1-1：5，两者的给药频次均为一周2-4次。
[0019]进一步的技术方案，所述的CpG寡脱氧核苷酸是不小于10个核苷酸长度的、含有未甲基化CpG基序的人源化的寡脱氧核苷酸；其中所述寡脱氧核苷酸中的磷酸二酯键部分或整体被硫代磷酸酯键取代。
[0020]进一步的技术方案，所述的CpG寡脱氧核苷酸含有18-60个碱基长度；包含四种类型的CpG寡脱氧核苷酸，分别为A，B，C，P型CpG寡脱氧核苷酸；不仅包含其分子形式也包含其盐形式。
[0021]所述的CpG寡脱氧核苷酸不仅包含其分子形式也包含其盐形式，盐形式包括任何药学上可接受的盐、酯、和此类脂的盐。
[0022]所述的CpG寡脱氧核苷酸的药学上可接受的盐的优选实例包括金属盐诸如碱金属盐(例如钠盐、钾盐和锂盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)、铝盐、铁盐、锌盐、铜盐、镍盐、钴盐等；胺盐诸如无机盐(例如铵盐)和有机盐(例如，叔辛基胺盐、二苄胺盐、吗啉盐、葡糖胺盐、苯基甘氨酸烷基酯盐、乙二胺盐、N-甲基葡糖胺盐、胍盐、二乙胺盐、三乙胺盐、二环己胺盐、N，N
’-
二苄基乙二胺盐、氯普鲁卡因盐、普鲁卡因盐、二乙醇胺盐、N-苄基-苯乙胺盐、哌嗪盐、四甲基铵盐、三(羟甲基)氨基甲烷盐)等；无机酸盐诸如卤代氢酸盐(例如，氢氟化
物、氢氯化物、氢溴化物、氢碘化物)、硝酸盐、高氯酸盐、硫本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肿瘤免疫治疗联合给药系统，其特征在于，包含CpG寡脱氧核苷酸和β-1，3-葡聚糖。2.根据权利要求1所述的一种肿瘤免疫治疗联合给药系统，其特征在于，该给药系统的使用方法为先用β-1，3-葡聚糖，再用CpG寡脱氧核苷酸，或者β-1，3-葡聚糖与CpG寡脱氧核苷酸同时用药。3.根据权利要求2所述的一种肿瘤免疫治疗联合给药系统，其特征在于，所述的使用方法中，β-1，3-葡聚糖提前0-3周给药。4.根据权利要求1所述的一种肿瘤免疫治疗联合药系统，其特征在于，所述的β-1，3-葡聚糖使用的给药方式为口服、肌注或全身静脉给药。5.根据权利要求4所述的一种肿瘤免疫治疗联合给药系统，其特征在于，所述的β-1，3-葡聚糖使用的给药方式为全身静脉给药。6.根据权利要求1所述的一种肿瘤免疫治疗联合给药系统，其特征在于，所述的CpG寡脱氧核苷酸使用的给药方式为瘤内或瘤旁给药。7.根据权利要求1所述的一种肿瘤免疫治疗联...

【专利技术属性】
技术研发人员：程光，张国喜，孙慧萍，徐凯，田烽椿，陈文忠，张国敏，
申请(专利权)人：南京绿叶制药有限公司，
类型：发明
国别省市：