一种氘代犬尿氨酸及其在多肽中氨基酸构型分析中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种氘代犬尿氨酸及其在多肽中氨基酸构型分析中的应用，包括氘代犬尿氨酸的合成过程、基于高分辨质谱和核磁技术的对氘代犬尿氨酸的结构确证、将其作为对照品通过液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种氘代犬尿氨酸及其在多肽中氨基酸构型分析中的应用


[0001]本专利技术涉及药物化学和药物分析化学领域，尤其涉及一种氘代犬尿氨酸及其在多肽中氨基酸构型分析中的应用。

技术介绍

[0002]达托霉素为环脂肽类抗生素，在体内外对耐药革兰氏阳性菌具有强力杀菌作用。达托霉素由10个氨基酸残基组成环肽部分、3个氨基酸组成线性肽部分、末端氨基酸连接癸酰基脂肪链，结构式I如下：
[0003][0004]氨基酸构型的变化对达托霉素的抗菌活性影响很大(彭希希,王赛赛,付琛,胡昌华,廖国建.药学学报,2018,53(6):839
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844)，必须建立合理的方法对达托霉素中的氨基酸及其构型进行监控以保证药品安全。
[0005]目前，对氨基酸构型的分析为多肽在盐酸中加热水解、再采用手性衍生法经液相色谱或液相色谱质谱法进行分析，但这种方法不能排除加热过程是否存在α
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碳构型转化。选择氘代盐酸重水溶液作为水解试剂，如果α
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碳发生构型转化，则α
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碳上的氢可以转化为氘，并且洗脱时间发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种氘代犬尿氨酸，其特征在于，其结构式(1)、(2)为2.一种如权利要求1中的氘代犬尿氨酸的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤S1、加热水解：将L
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犬尿氨酸(3)溶解于氘代盐酸重水溶液中，浓度为0.5mg/mL
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20mg/mL，充氮密封，加热后得到第一混合溶液；步骤S2、所述第一混合溶液经液相色谱进行纯化，收集氘代犬尿氨酸馏分，冻干，得微黄色粉末状氘代犬尿氨酸；所述液相色谱的具体操作条件为：采用十八烷基键合硅胶反相色谱柱，流动相A为0.01
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1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈或甲醇，流动相A：流动相B＝40:60
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10:90(v/v)，流速设定为0.5
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2mL/min，柱温为25
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40℃，进样量为10
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100μL，吸收波长为190
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280nm。3.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于，所述氘代盐酸重水溶液的摩尔浓度为4
‑
10mol/L。4.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于，所述加热的温度为85℃
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130℃，所述加热的时间为5h
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24h。5.一种达托霉素中犬尿氨酸构型的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤A1、手性Marfey
’
s试剂衍生：取达托霉素供试品溶液和对照品溶液，分别置于液相进样瓶中，采用手性Marfey
’
s试剂溶液对所述达托霉素供试品溶液和对照品溶液进行衍生化反应，得到衍生化后的对照品溶液和供试品溶液；步骤A2：将所述衍生化后的对照品溶液和供试品溶液，经高效液相色谱
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质谱分析；所述供试品溶液包括L
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犬尿氨酸溶液、D
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犬尿氨酸溶液和氘代犬尿氨酸溶液，所述氘代犬尿氨酸溶液包括如权利要求1
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4任一项所述的氘代犬尿氨酸。6.根据权利要求5中所述的检测方法，其特征在于，所述达托霉素的结构式(4)如下，其13位氨基酸为L
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犬尿氨酸。
7.根据权利要求5中所述的检测方法，其特征在于，步骤A1中，还包括以下步骤：步骤A11、所述达托霉素供试品溶液的制备方法：将达托霉素溶解于氘代盐酸的重水溶液中，达托霉素的浓度为0.5
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5mg/mL，充氮密封，加热水解，得到水解溶液，所述水解溶液放冷至室温，加4
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8mol/L氢氧化钠溶液适量，中和至中性，得到达托霉素供试品溶液；步骤A12、所述对照品溶液的制备方法：将D
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犬尿氨酸、L
‑
犬尿氨酸和所述氘代犬尿氨酸，分别溶解于氘代盐酸的重水溶液中，得到对照品溶液；所述对照品溶液的浓度为0.3
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5mg/mL；步骤A13、所述手性Marfey
’
s试剂溶液的制备方法：将所述Marfey
’
s试剂溶于溶剂，得到所述手性Marfey
’
s试剂溶液，浓度为0.5
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4mg/mL。8.根据权利要求7中所述的检测方法，其特征在于，步骤A11中，所述温度100
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘浩，张含智，孙宁，郑蒙蒙，罗文燕，裘亚，
申请(专利权)人：上海市食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：