用于产生具有热稳定纤维素分解活性的植物细胞壁降解酶的转基因微藻制造技术

技术编号:28990501 阅读:19 留言:0更新日期:2021-06-23 09:44
本发明专利技术涉及用于生产具有热稳定纤维素分解活性的细胞壁降解酶(HCWDE)的转基因微藻及其在工业领域中纤维素或木质纤维素源的生物降解中的相关用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于产生具有热稳定纤维素分解活性的植物细胞壁降解酶的转基因微藻本专利技术涉及用于产生具有热稳定纤维素分解活性的植物细胞壁降解酶(HCWDE)的转基因微藻及其在工业领域中纤维素或木质纤维素源的生物降解中的相关用途。木质纤维素是地球上最丰富的有机碳源,并且是碳水化合物的储藏库,具有很大的潜力用于生产生物燃料。不幸的是,其极度难以转化成单糖的性质极大地限制了其在该领域的开发(SandersonK.,2011;SainiJ.K.等人,2015)。包括物理、物理化学、化学和生物处理的方法通常用于减少对水解的抵抗并促进糖化作用(HarmsenPFH等人,2010;BadieiM.等人,2014;KumarAK和SharmaS.,2017)。然而,化学处理对环境有害,并且与使用木质纤维素产生某种形式的可持续能源的想法相背;此外,这种处理产生的反应衍生物会抑制微生物的代谢,使单糖向生物能产物(如乙醇,脂质和甲烷)的转化无效(.J.和MartínC.,2016)。相反,物理方法尽管相对无污染,但其大规模应用却较昂贵(KumarA.K.和SharmaS.,2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.转基因微藻的组合,其中每种转基因微藻表达细菌来源的亚磷酸脱氢酶D和选自下组的热稳定植物细胞壁降解酶:/n新阿波罗栖热袍菌(Thermotoga neapolitana)的内切葡聚糖酶B(SEQ ID NR:1)、解糖热解纤维素菌(Caldicellulosiruptor saccharolyticus)的纤维体CelB的具有纤维二糖水解酶活性的部分(SEQ ID NR:3)、和强烈炽热球菌(Pyrococcus furiosus)的β-葡糖苷酶(SEQ ID NR:5),其中所述新阿波罗栖热袍菌的内切葡聚糖酶B由具有密码子使用优化以用于叶绿体表达的核苷酸序列SEQ ID NR:2编码,所述...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181029 IT 1020180000098671.转基因微藻的组合,其中每种转基因微藻表达细菌来源的亚磷酸脱氢酶D和选自下组的热稳定植物细胞壁降解酶:
新阿波罗栖热袍菌(Thermotoganeapolitana)的内切葡聚糖酶B(SEQIDNR:1)、解糖热解纤维素菌(Caldicellulosiruptorsaccharolyticus)的纤维体CelB的具有纤维二糖水解酶活性的部分(SEQIDNR:3)、和强烈炽热球菌(Pyrococcusfuriosus)的β-葡糖苷酶(SEQIDNR:5),其中所述新阿波罗栖热袍菌的内切葡聚糖酶B由具有密码子使用优化以用于叶绿体表达的核苷酸序列SEQIDNR:2编码,所述解糖热解纤维素菌的纤维体CelB的部分由具有密码子使用优化以用于叶绿体表达的核苷酸序列SEQIDNR:4编码,以及所述强烈炽热球菌的β-葡糖苷酶由具有密码子使用优化以用于叶绿体表达的核苷酸序列SEQIDNR:6编码。


2.根据权利要求1所述的转基因微藻的组合,其进一步包含表达下列酶的转基因微藻:细菌来源的亚磷酸脱氢酶D、和新阿波罗栖热袍菌(Thermotoganeapolitana)的木聚糖酶XynA(SEQIDNR:7)。


3.根据权利要求2所述的转基因微藻的组合,其中所述新阿波罗栖热袍菌的木聚糖酶XynA由具有密码子使用优化以用于叶绿体表达的核苷酸序列SEQIDNR:8编码。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的转基因微藻的组合,其进一步包含表达下列酶的转基因微藻:
细菌来源的亚磷酸脱氢酶D、和
木质素酶,其选自嗜热栖热菌(Thermusthermophilus)的漆酶(SEQIDNR:14)和嗜热栖热菌的多酚氧化酶(SEQIDNR:16)。


5.根据前述权利要求中任一项所述的转基因微藻的组合,其属于莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)种。


6.根据前述权利要求中任一项所述的转基因微藻的组合,其中所述亚磷酸脱氢酶D来自施氏假单胞菌(Pseudomonasstutzeri)(SEQIDNR:11),并由核苷酸序列SEQIDNR:12编码。


7.根据权利要求1-6中任一项所述的转基因微藻的组合的用途,其用于在包含磷酸根离子作为唯一磷源的培养基中生产热稳定植物细胞壁降解酶的混合物。


8.一种生...

【专利技术属性】
技术研发人员:罗伯托·巴西卢卡·达尔奥斯托曼努埃尔·贝内代蒂
申请(专利权)人:罗伯托·巴西卢卡·达尔奥斯托曼努埃尔·贝内代蒂
类型:发明
国别省市:意大利;IT

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