一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法，包括APTT检测试剂和钙离子溶液，向pH为6.0‑8.5的缓冲体系中加入激活剂和螯合剂，并向得到的初始溶液中加入磷脂研磨至乳浊液，加入抗氧化剂、稳定剂和防腐剂搅拌均匀，定容后在37℃环境孵育1小时，过滤后得到APTT检测试剂；分别量取氯化钙和防腐剂，并加入缓冲液中搅拌至完全溶解，过滤得到氯化钙溶液，提供一种有效可靠、稳定性高的液体即用型活化部分凝血活酶时间的检测试剂。

【技术实现步骤摘要】
一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法
本专利技术涉及体外诊断试剂
，尤其涉及一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法。
技术介绍
机体的凝血与止血由血小板、凝血系统、纤溶系统、血管内皮系统之间的互相作用共同完成，其中凝血系统功能的状态直接影响人体生理健康。凝血过程复杂，涉及凝血因子、凝血酶、纤维蛋白原以及纤溶系统之间的调节与互作。根据凝血起始途径的不同，可将其分为内源性凝血系统与外源性凝血系统，相关的检查有凝血酶原时间(Prothrombintime，PT)、活化部分凝血活酶时间(Activatedpartialthromboplatintime，APTT)、凝血酶时间(thrombintime，TT)和纤维蛋白原(Fibrinogen，FIB)含量。APTT检测试剂有冻干粉型和液体型两大类，冻干粉型试剂存在生产过程繁琐复杂、使用前需复溶、批间差大等问题。液体即用型APTT检测试剂虽然解决了以上问题，但却存在稳定性较差、易沉淀、不同激活剂制得试剂差异较大等不足。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法，提供一种有效可靠、稳定性高的液体即用型活化部分凝血活酶时间的检测试剂。为实现上述目的，第一方面，本专利技术提供了一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，所述活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒包括APTT检测试剂和钙离子溶液，所述APTT检测试剂包括激活剂0.01-1g/L、磷脂0.2-4g/L、10-100mMpH为6.0-8.5的缓冲体系、螯合剂10-500μM、抗氧化剂0.1-8％、稳定剂0.01-2％和防腐剂0.01-1％。其中，所述激活剂为鞣花酸、硅藻土、高岭土、硅酸铝镁、纳米二氧化硅中的一种或多种。其中，所述缓冲体系为4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、3-(N-吗啡啉)丙磺酸缓冲液中的一种或多种。其中，所述磷脂为磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、胆固醇、标本提取物中的一种或多种。其中，所述螯合剂为氯化镁、氯化锌、氯化铁、氯化铜、氯化镍、氯化锰中的一种或多种。其中，所述抗氧化剂为苯酚、抗坏血酸、茶多酚、甘氨酸、丁羟基茴香醚中的一种或多种。第二方面，本专利技术提供了一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒的制备方法，应用于如第一方面所述的一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，包括以下步骤：向pH为6.0-8.5的缓冲体系中加入激活剂和螯合剂，并向得到的初始溶液中加入磷脂研磨至乳浊液，加入抗氧化剂、稳定剂和防腐剂搅拌均匀，定容后在37℃环境孵育1小时，过滤后得到APTT检测试剂；分别量取氯化钙和防腐剂，并加入缓冲液中搅拌至完全溶解，过滤得到氯化钙溶液。本专利技术的一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法，包括APTT检测试剂和钙离子溶液，向pH为6.0-8.5的缓冲体系中加入激活剂和螯合剂，并向得到的初始溶液中加入磷脂研磨至乳浊液，加入抗氧化剂、稳定剂和防腐剂搅拌均匀，定容后在37℃环境孵育1小时，过滤后得到APTT检测试剂；分别量取氯化钙和防腐剂，并加入缓冲液中搅拌至完全溶解，过滤得到氯化钙溶液，提供一种有效可靠、稳定性高的液体即用型活化部分凝血活酶时间的检测试剂。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术提供的一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒的制备方法的流程示意图。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。在本专利技术的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。本专利技术提供一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，所述活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒包括APTT检测试剂和钙离子溶液，所述APTT检测试剂包括激活剂0.01-1g/L、磷脂0.2-4g/L、10-100mMpH为6.0-8.5的缓冲体系、螯合剂10-500μM、抗氧化剂0.1-8％、稳定剂0.01-2％和防腐剂0.01-1％。在本实施方式中，所述的APTT检测试剂由激活剂、磷脂、缓冲体系、螯合剂、抗氧化剂、稳定剂、防腐剂等配制而成；所述的钙离子溶液由氯化钙、缓冲体系、防腐剂组成；所述激活剂为鞣花酸、硅藻土、高岭土、硅酸铝镁、纳米二氧化硅中的一种或多种；所述的激活剂含量为0.01-1g/L；所述的缓冲体系的pH为6.0-8.5，所述的缓冲体系选自4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)缓冲液、三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲液、3-(N-吗啡啉)丙磺酸(MOPS)缓冲液,其浓度为10-100mM；所述的磷脂选自磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、胆固醇、兔脑提取物、牛脑磷脂中的一种或多种，其中，兔脑提取物和牛脑为标本提取物，其添加量为0.2-4g/L；所述的螯合剂选自氯化镁、氯化锌、氯化铁、氯化铜、氯化镍、氯化锰中的一种或多种，其添加量为10-500μM；所述的抗氧化剂由苯酚、抗坏血酸、茶多酚、甘氨酸、丁羟基茴香醚中的一种或多种组成，其添加量为0.1-8％；所述的稳定剂由BSA、PEG-6000、甘露醇、海藻糖、明胶、PVP-K30、TW-20中的一种或多种组成，其添加量为0.01-2％。本专利技术所述的APTT检测试剂还包括防腐剂，由ProClin-300、叠氮化钠、5-溴-5-硝基-1，3-二恶烷丙二醇、双咪唑烷基脲中的一种或多种组成，其添加量为0.01-1％。优化了试剂配方，使试剂具备稳定性好、灵敏度高等优点。通过添加合适的抗氧化剂和稳定剂，增加了试剂稳定性；添加金属盐离子螯合鞣花酸，提高了试剂的灵敏度；同时添加新型防腐剂，延长了试剂的有效期，间接降低了试剂的使用成本；此外，通过兔脑提取物含量的调节，大大降低了试剂的生产成本。实施例1活化部分凝血活酶时间检测试剂盒的组成配方：APTT检测试剂：50mg/L鞣花酸，0.5g/L兔脑提取物，100μM氯化镁，0.5％苯酚，4％甘露醇，1％PEG-6000，0.1％ProClin-300，20mMHEPES缓冲液(pH＝7.5)。氯化钙试剂：25mM氯化钙，0.1％ProClin-300，20mMHEPES缓冲液(pH＝7.5)。实施例2活化部分凝血活酶时间检测试剂盒的组成配方：APTT检测试剂：50mg/L鞣花酸，1g/L兔脑提取物，100μM氯化镁，0.2％苯酚，2％甘露醇，1％PEG-6000，0.1％ProClin-300，20mMHEPES缓冲液(pH＝7.5)。...

【技术保护点】
1.一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，其特征在于，/n所述活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒包括APTT检测试剂和钙离子溶液，所述APTT检测试剂包括激活剂0.01-1g/L、磷脂0.2-4g/L、10-100mM pH为6.0-8.5的缓冲体系、螯合剂10-500μM、抗氧化剂0.1-8％、稳定剂0.01-2％和防腐剂0.01-1％。/n

【技术特征摘要】
1.一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，其特征在于，
所述活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒包括APTT检测试剂和钙离子溶液，所述APTT检测试剂包括激活剂0.01-1g/L、磷脂0.2-4g/L、10-100mMpH为6.0-8.5的缓冲体系、螯合剂10-500μM、抗氧化剂0.1-8％、稳定剂0.01-2％和防腐剂0.01-1％。


2.如权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，其特征在于，
所述激活剂为鞣花酸、硅藻土、高岭土、硅酸铝镁、纳米二氧化硅中的一种或多种。


3.如权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，其特征在于，
所述缓冲体系为4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、3-(N-吗啡啉)丙磺酸缓冲液中的一种或多种。


4.如权利要求1所述的活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，其特征在于，
所述磷脂为磷脂酰丝氨酸、磷脂酰...

【专利技术属性】
技术研发人员：步鸿昌，张娟，熊玲，
申请(专利权)人：桂林优利特医疗电子有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45