金露梅提取物在抑制眼细胞凋亡中的用途制造技术

本发明专利技术公开了金露梅提取物在制备用于预防、治疗或抑制眼细胞凋亡的药物中的用途。所述眼细胞凋亡由霉酚酸吗啉乙酯诱导，眼细胞凋亡的眼组织病理学表现为眼细胞固缩、染色质边集。在斑马鱼眼细胞凋亡模型中，金露梅提取物能明显抑制眼部细胞凋亡，具有显著的眼保护作用。本发明专利技术提出了一种抗眼细胞凋亡的新方法，为临床应用提供相应思路和数据。

【技术实现步骤摘要】
金露梅提取物在抑制眼细胞凋亡中的用途
本专利技术属于医药领域，具体涉及金露梅提取物在抑制眼细胞凋亡中的用途。
技术介绍
眼细胞凋亡成因复杂，由多因素引起，可导致多种临床疾病。近视是一种复杂的多因素疾病，其治疗比较复杂，又要权衡疗效与安全的关系，还要重视远期效应，目前尚无一种比较妥善的治疗方法。徐格致等在高度近视眼的视网膜中检测到凋亡的感光细胞，提示高度近视与眼细胞凋亡有关，为高度近视眼的治疗提供了一条新思路——抗凋亡治疗；有研究表明干眼的发病与炎症反应、细胞凋亡、性激素水平变化等密切相关，且眼表的炎症环境可以激活凋亡途径，引起角结膜上皮的凋亡，通过抑制眼细胞的凋亡可缓解由眼细胞凋亡引起的临床症状。金露梅(PotentillafruticosaL.)，又名金老梅、药王茶、金腊梅等，为蔷薇科(Rosaceae)委陵菜属(Potentilla)落叶灌木。分布于青海、甘肃、新疆、西藏等地。据《中国植物志》、《中国高等植物志》、《宁夏中药志》等10余种地方植物志记载：金露梅嫩叶可代茶叶饮用，有健脾，化湿、清暑、治暑热眩晕，两目不清，亦可用于预防心脑血管疾病。金露梅的根、茎、叶、花和枝都具有非常强的药理活性，其中，根茎提取物具有很强的免疫调节特性和抗氧化性；枝的提取物在降糖、降脂及抗炎免疫等代谢性疾病相关的研究中显示出良好的效果，目前金露梅提取物抑制眼细胞凋亡的研究鲜少，最新研究发现其对眼细胞凋亡有较好的改善作用。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供了一种金露梅提取物在制备用于预防、治疗或抑制眼细胞凋亡的药物中的用途。根据本专利技术，金露梅提取物为金露梅水提物，优选的，金露梅水提物包括以下组分：(+)-儿茶素-7-O-葡萄糖苷、(+)-儿茶素、槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸、槲皮素、柚皮素、3-阿拉伯糖葡糖基槲皮素(quercetin3-vicianoside)、2R-圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷和2S-圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷，各物质的结构如下式：优选的，金露梅水提物各成分含量包括：(+)-儿茶素-7-O-葡萄糖苷150～180μg/g、(+)-儿茶素80～105μg/g、槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸205～230μg/g、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸50～80μg/g、槲皮素30～50μg/g、柚皮素5～15μg/g、3-阿拉伯糖葡糖基槲皮素(quercetin3-vicianoside)10～30μg/g、2R-圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷和2S-圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷25～50μg/g。根据本专利技术，眼细胞凋亡由霉酚酸吗啉乙酯诱导。根据本专利技术，眼细胞凋亡中的眼细胞为脊椎动物眼细胞。根据本专利技术，眼细胞凋亡的眼组织病理学表现为眼细胞固缩、染色质边集。金露梅提取物能够抑制眼细胞固缩、染色质边集；视网膜各层结构边界清楚，细胞形态正常。根据本专利技术，金露梅提取物在制备用于预防、治疗或抑制眼细胞凋亡的药物为液体制剂。优选的，金露梅提取物液体剂的浓度为13.9～125μg/mL。示例性为41.7μg/mL。优选的，称取15～30g金露梅样品，加入250～500ml蒸馏水，加热煮沸10～20min，重复加水煮沸过程，提取2～4次后，提取液由黄褐色变为无色，将所述提取液经40～60℃加热，经冷凝旋蒸，得金露梅提取物备用，所述金露梅提取物为棕色水提物粉末；使用时用标准稀释水按需配制成母液，例如母液为2.5mg/mL。优选的，金露梅样品选自金露梅红茶、金露梅绿茶、金露梅花茶和金露梅叶中的至少一种。优选的，金露梅提取物液体剂对斑马鱼眼凋亡细胞相对于施加GSH615μg/mL的阳性对照为100％的情况下，抑制功效为81％～137％，示例性为108％。本专利技术的有益效果：现有技术中，环孢素(CsA)因分子量大，疏水性强，生物利用度较低，难以通过眼部的屏障系统到达眼内的病灶部位，且环孢素眼用制剂的处方组成中使用的助溶剂和表面活性剂存在着一定的安全性和刺激性问题。由于目前的眼药制剂治疗眼部疾病产生较多的副作用，因此，从天然药物资源中寻找疗效好、复发少、安全性高的抑制眼细胞凋亡的药物具有重要的价值。金露梅为青藏高原天然药用植物资源，具有抗氧化、抗炎症作用，在斑马鱼眼细胞凋亡模型中，金露梅提取物能明显抑制眼部细胞凋亡，具有显著的眼保护作用，对眼凋亡斑马鱼的眼组织病理结构有明显的改善功效，疗效佳，副作用小。且金露梅野生资源量丰富，容易获得，具有有良好的开发应用前景。本研究通过进行动物实验，探究金露梅提取物的抑制眼细胞凋亡作用，提出了一种抗眼细胞凋亡的新方法，为临床应用提供相应思路和数据。附图说明图1为金露梅提取物处理后斑马鱼眼凋亡细胞荧光强度表型图。其中，虚线标注部分为斑马鱼眼睛，E＝眼睛。图2为金露梅提取物处理后斑马鱼眼凋亡细胞荧光强度。其中，与模型对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。图3为金露梅提取物对眼凋亡细胞的抑制功效。图4为金露梅提取物处理后斑马鱼眼凋亡细胞病理切片H&E染色。其中，虚线标注部分为斑马鱼眼睛，E＝眼睛；放大倍数为400倍。图5为不同浓度金露梅绿茶提取物对DPPH·的清除效果。图6为不同浓度金露梅绿茶提取物对ABTS·的清除效果。图7为ABTS法测定不同浓度金露梅绿茶提取物的总抗氧化性。图8为FRAP法测定不同浓度金露梅绿茶提取物的总抗氧化性。图9为金露梅提取物对大鼠MDA水平的影响。具体实施方式下文将结合具体实施例对本专利技术的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本专利技术，而不应被解释为对本专利技术保护范围的限制。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均涵盖在本专利技术旨在保护的范围内。除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。实施例1一、实验过程1、实验动物野生型AB品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行，共600尾，每实验组为30尾，年龄为受精后1天(1dpf)，用于金露梅提取物对眼凋亡细胞抑制功效的最大检测浓度(MTC)测定，评价金露梅提取物对眼凋亡细胞的抑制功效及对眼组织病理学的影响。斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导率为450～550μS/cm；pH为6.5～8.5；硬度为50～100mg/LCaCO3)，实验动物使用许可证号为：SYXK(浙)2012-0171。饲养管理符合国际AAALAC认证的要求。2、实验药物称取23.9g金露梅绿茶，用KDM-2000型可调式电热套，每次加300ml蒸馏水，加热煮沸，保持底沸状态，防止水蒸发过快，每次15min，提取4次，即提取液由黄褐色变为无色，经50℃加热本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.金露梅提取物在制备用于预防、治疗或抑制眼细胞凋亡的药物中的用途。/n

【技术特征摘要】
1.金露梅提取物在制备用于预防、治疗或抑制眼细胞凋亡的药物中的用途。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述眼细胞凋亡由霉酚酸吗啉乙酯诱导。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述眼细胞凋亡中的眼细胞为脊椎动物眼细胞。


4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述眼细胞凋亡的眼组织病理学表现为眼细胞固缩、染色质边集。


5.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其特征在于，所述金露梅提取物在制备用于预防、治疗或抑制眼细胞凋亡的药物为液体制剂。


6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述金露梅提取物在液体剂中的浓度为13.9～125μg/mL。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：李锦萍，曾阳，李彩明，刘力宽，左文明，薛鹤，曲宣诏，张瑞峰，张俊焱，刘玮，王圭垚，王郑雷，
申请(专利权)人：青海师范大学，
类型：发明
国别省市：青海;63