一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用制造技术

一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用，（1）100μmol/l Hcy干预内皮细胞建立凋亡模型，并且细胞活力染色及流式细胞术检测该浓度Hcy可以致内皮细胞凋亡，为后续实验奠定基础；（2）步骤（1）后，RT‑qPCR检测miR‑491‑5p表达水平；确定miR‑491‑5p在Hcy致内皮细胞凋亡中发挥作用；（3）转染miR‑491‑5p mimics及miR‑491‑5p inhibitor后，RT‑qPCR检测miR‑491‑5p表达水平；确定转染miR‑491‑5p mimics、miR‑491‑5p inhibitor成功后，为反向验证miR‑491‑5p对Hcy致内皮细胞凋亡的作用奠定基础；（4）分别转染miR‑491‑5p mimics及miR‑491‑5p inhibitor，流式细胞术再次检测细胞凋亡情况，明确miR‑491‑5p在Hcy致内皮细胞凋亡中作用。本发明专利技术涉及miR‑491‑5p在Hcy致内皮细胞损伤中具有重要作用，为以后在分子水平检测并诊断动脉粥样硬化提供理论依据，具有潜在的实用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用
本专利技术属于医学
，特别涉及一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用。
技术介绍
心血管疾病(cardiovasculardisease，CVD)是全球发病率和死亡率最高的疾病。目前我国心血管疾病患病人数为2.9亿，死亡率位居所有疾病首位，占居民疾病死亡构成的40％以上。CVD的发病机制尚不完全清楚，它的危险因素主要包括高血压、糖尿病、缺氧、高龄等，寻找心血管病发生和发展的分子机制成为了国内外研究和关注的热点。而大多数心血管疾病与动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)的发展有关，近年来，随着人们生活水平的提高、饮食习惯的改变、工作压力的增加以及社会环境的变迁等因素影响，AS发病率呈明显上升的趋势，且发病年龄日趋年青化，因而早期发现、预防和控制动脉粥样硬化的发生和发展是目前临床科学的重要目标之一。但AS的早期分子诊断、机制及方法尚未完全阐明。目前，对于动脉粥样硬化的治疗大多还是药物治疗，常见药物有阿司匹林、氯吡格雷等，但药物副作用较大，造成过敏反应、肝损害、肾损害、胃肠道反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用，其具体技术方案为：/n（1）100 μmol/l Hcy干预内皮细胞建立内皮细胞凋亡模型，并且细胞活力染色及流式细胞术检测该浓度Hcy可以致内皮细胞凋亡，为后续实验奠定基础；/n（2）100 μmol/l Hcy干预内皮细胞后，RT-qPCR检测miR-491-5p表达水平；确定miR-491-5p在Hcy致内皮细胞凋亡中发挥作用；/n（3）转染miR-491-5p mimics及miR-491-5p inhibitor后，RT-qPCR检测miR-491-5p表达水平；确定转染miR-491-5p mimics、miR-491-5p inhi...

【技术特征摘要】
1.一种心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用，其具体技术方案为：
（1）100μmol/lHcy干预内皮细胞建立内皮细胞凋亡模型，并且细胞活力染色及流式细胞术检测该浓度Hcy可以致内皮细胞凋亡，为后续实验奠定基础；
（2）100μmol/lHcy干预内皮细胞后，RT-qPCR检测miR-491-5p表达水平；确定miR-491-5p在Hcy致内皮细胞凋亡中发挥作用；
（3）转染miR-491-5pmimics及miR-491-5pinhibitor后，RT-qPCR检测miR-491-5p表达水平；确定转染miR-491-5pmimics、miR-491-5pinhibitor成功后，为反向验证miR-491-5p对Hcy致内皮细胞凋亡的作用奠定基础；
（4）分别转染miR-491-5pmimics及miR-491-5pinhibitor，流式细胞术再次检测细胞凋亡情况，明确miR-491-5p在Hcy致内皮细胞凋亡中的作用。


2.根据权利要求1所述的心血管疾病诊断用miRNA标志物及其应用，其特征在于，所述检测miR-491-5p在Hcy致内皮细胞凋亡中的作用的步骤包括：①首先建立Hcy致内皮细胞凋亡的细胞模型；②RT-qPCR检测miR-491-5p在Hcy致内皮细胞凋亡中的表达；③转染miR-491-5pmimics与miR-491-5pinhibitor后，验证转染成功；④在转染miR-491-5pmimics与miR-491-5p...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜怡邓，张慧萍，刘圆，张辉，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：宁夏;64