一种检测人绒毛滋养细胞外泌体HLA-E水平评估母胎免疫耐受的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测人绒毛滋养细胞外泌体HLA

【技术实现步骤摘要】
一种检测人绒毛滋养细胞外泌体HLA
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E水平评估母胎免疫耐受的方法


[0001]本专利技术具体涉及一种检测人绒毛滋养细胞外泌体HLA
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E水平评估母胎免疫耐受的方法。

技术介绍

[0002]正常妊娠期间，母体免疫系统在母胎界面会做出一系列免疫调节机制，从而使母体对半同种移植物的胎儿产生免疫耐受，若是母胎界面免疫调节功能失衡，则会发生自然流产。与同一配偶连续发生2次或2次以上的自然流产者称为复发性流产(RSA)，RSA会严重影响育龄女性的身心健康。近年来，自发流产的发生率在人群中呈现上升趋势。RSA的病因则是多种多样的，包括：生殖道解剖异常、配偶的染色体异常、母体血栓形成障碍、母体免疫功能异常以及各种内分泌紊乱等。然而，仍有40％
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50％的RSA患者找不到明显的原因，称为不明原因的复发性流产(URSA)。
[0003]HLA
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E是非经典的HLA(Human histocompatibility leukocyte antigen)I类分子，在早期胎盘滋养细胞中均有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测人绒毛滋养细胞外泌体HLA
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E水平评估母胎免疫耐受的方法，其特征是，包括以下步骤：1)提取不明原因复发性流产患者绒毛滋养细胞的外泌体；2)将步骤1)所获得的外泌体与乳胶颗粒结合；3)标记HLA
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E流式抗体，在流式细胞分析仪上分析外泌体中HLA
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E的水平。2.根据权利要求1所述的一种检测人绒毛滋养细胞外泌体HLA
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E水平评估母胎免疫耐受的方法，其特征是，步骤1)具体为：1.1)在不明原因复发性流产患者清宫当天，收集患者绒毛，用pH＝7.4的无菌磷酸盐缓冲液漂洗；1.2)将步骤1.1)得到的绒毛组织剪碎成1立方毫米的小碎片，用PBS重悬为组织混合液，再用1mg/ml的胶原酶IV和0.01mg/ml的DNA酶对组织混合液在37℃摇床上消化1小时；1.3)用70μm的无菌滤器对步骤1.2)得到的组织混合液进行过滤，然后将过滤后的细胞悬液用离心机离心，转速为1,000
×
g，离心5分钟，离心完成后取出上清液；1.4)将步骤1.3)得到的上清液用0.22μm的无菌滤器过滤，过滤完后的液体装入超速离心管中，在超速离心机中4℃，100,000
×
g，离心1小时，弃去上清液，沉淀为外泌体，1.5)再用PB...

【专利技术属性】
技术研发人员：江玲玲，张松英，费海怡，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：