一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，属于中药活性成分含量测定技术领域。该方法包括：对照品溶液的制备，供试品溶液的制备和定量分析，采用HPLC法，以等度洗脱的方式，同时测定了菊苣中的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量，波峰分离良好，峰面积大小适宜，进样一针，20min左右出峰完毕；方法简便、快捷、准确、成本低、实用范围广，易于普及掌握。易于普及掌握。易于普及掌握。

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法


[0001]本专利技术涉及中药活性成分含量测定
，尤其涉及一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法。

技术介绍

[0002]菊苣(Cichorium intybus L.)为菊科多年生草本植物。《中国药典》(2020版)中，菊苣作为维吾尔族习用药材，主要利用其干燥地上部分或根，具有清肝利胆，健胃消食，利尿消肿的功效，用于湿热黄疸，胃痛食少，水肿尿少。栽培菊苣有多种用途，叶子可以用作蔬菜和饲料，根可以用来生产菊粉和咖啡替代品。菊苣含有多种酚酸类化合物，如绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸等，具有清除自由基、抗脂质过氧化、保肝利胆、抗菌、抗病毒、增强免疫功能和抗炎作用。目前对菊苣还没有建立其质量控制方法。开发同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，为菊苣药用价值的评价和质量控制提供参考依据。
[0003]文献《毛菊苣不同部位中菊苣酸、绿原酸、单咖啡酰酒石酸的含量测定》中，对毛菊苣不同部位(根、茎、种子)中菊苣酸、绿原酸和单咖啡酰酒石酸3种成分进行了含量测定报道。文献《高效液相色谱法同时测定苣荬菜叶中绿原酸、木犀草苷和菊苣酸的含量》中，建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定苣荬菜叶中绿原酸、木犀草苷和菊苣酸的含量的分析方法。文献《HPLC法同时测定蒲公英中单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸的含量》中，建立HPLC法同时测定蒲公英中4种有机酸类成分含量。文献《HPLC法测定蒲公英中菊苣酸、咖啡酸与绿原酸》中，建立同时测定蒲公英中菊苣酸、咖啡酸和绿原酸的HPLC方法。文献《HPLC同时测定苦碟子注射液中单咖啡酰基酒石酸、咖啡酸、绿原酸、阿魏酸、菊苣酸的含量》中，建立同时测定苦碟子注射液中5种有机酸类成分含量的HPLC分析方法。以上测定方法均为多种成分同时测定，检测时间较长(分别为50、50、34、55和40min)，洗脱方式为梯度洗脱，要求测定仪器必须带梯度洗脱装置，仪器成本提高，测定范围受到设备的限制。为提高检测效率，降低检测成本，本着检测指标增加，效率不减、成本不增加的原则，拟将菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸采用等度洗脱方式，同时测定。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是通过提供一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，以实现同时对菊苣有效成分
‑
绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸进行定量分析的目的，同时将测定分析时间缩减至20min左右，实现了定量指标翻倍，节省检测费用的有益效果。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，该方法采用等度洗脱的方法，包括以下步骤：
[0006]步骤一：对照品溶液的制备
[0007]分别取绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品，加入溶剂，制成绿原酸、咖啡酸、
阿魏酸和菊苣酸对照品溶液，作为储备液，其他不同质量浓度的对照品溶液由储备液稀释得到；
[0008]步骤二：供试品溶液的制备
[0009]取菊苣粉末，加入溶剂，真空超声处理后过滤，取续滤液，过微孔滤膜，即得供试品溶液；
[0010]步骤三：定量分析
[0011]取对照品溶液和供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪，进行测定分析。
[0012]优选的，步骤一中所述的溶剂为甲醇
‑
0.5％磷酸溶液，其中甲醇与0.5％磷酸体积比为4:1
‑
3:1；所制成绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品溶液浓度为0.125
‑
0.25mg/mL。
[0013]优选的，步骤二中所述的菊苣粉末提前过40
‑
60目筛后取5
‑
10g。
[0014]优选的，步骤二中所述超声处理前加入溶剂为甲醇
‑
0.5％磷酸溶液，其中甲醇与0.5％磷酸体积比为4:1
‑
3:1；加入用量为250
‑
500mL。
[0015]优选的，步骤二中所述真空超声处理在真空超声波反应釜内进行，真空度为50
‑
100Pa，超声功率为200
‑
400W，反应釜温度15℃
‑
20℃，超声频率10
‑
20KHz，处理时间为60
‑
75min。
[0016]优选的，超声处理后所述微孔滤膜孔径为0.22μm。
[0017]优选的，步骤三中所述的对照品溶液和供试品溶液用量均为10
‑
20μL。
[0018]优选的，步骤三中所述的高效液相色谱仪测定条件包括：色谱柱为AmethystC18
‑
H型色谱柱，其规格为250mm
×
4.6mm，5μm，柱温为25
‑
30℃，紫外检测波长为327
±
1nm。
[0019]优选的，步骤三中所述的高效液相色谱仪测定条件还包括：流动相为体积比20:80的乙腈和0.1％磷酸的混合溶液，流速为1.0mL/min。
[0020]优选的，步骤三中所述的高效液相色谱仪测定分析时间为20
±
1min；理论塔板数按绿原酸峰计算不低于3000。
[0021]本专利技术的有益效果：
[0022](1)本专利技术公开了一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，采用HPLC法，以常用的流动相体系，体积比为20:80的乙腈和0.1％磷酸的混合溶液为流动相，以等度洗脱的方式，在326
‑
328nm区间段，可以同时测定了菊苣中的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量，波峰分离良好，峰面积大小适宜，进样一针，20min左右出峰完毕；方法简便、快捷、准确、成本低、实用范围广，易于普及掌握。
[0023](2)本专利技术与已报道的梯度洗脱方法相比，不要求测定仪器配有梯度洗脱装置，仪器成本降低、实施普及范围扩大。运行时间依次比
技术介绍
中的报道文献分别约缩短了30、30、14、35和20min，四种成分同时测定，仅需20min，是目前运行时间较短的方法。
[0024](3)本专利技术克服现有技术中植物酚酸物质在制备过程中极易被氧化，或存在因物料细胞壁破碎不充分而不能充分释放酚酸物质，导致提取率差从而不能真实反应物料酚酸含量的问题。为避免上述问题，本专利技术采用低温真空超声提取，使菊苣中酚酸物质充分溶出，并防止酚酸被氧化。
附图说明
[0025]图1为本专利技术所提供的实施例3中的绿原酸对照品HPLC色谱图；
[0026]图2为本专利技术所提供的实施例3中的咖啡酸对照品HPLC色谱图；
[0027]图3为本专利技术所提供的实施例3中的阿魏酸对照品HPLC色谱图；
[0028]图4为本专利技术所提供的实施例3中的菊苣酸对照品HPLC色谱图；
[0029]图5为本专利技术所提供的实施例3中的菊苣HP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，该方法采用等度洗脱的方法，包括以下步骤：步骤一：对照品溶液的制备分别取绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品，加入溶剂，制成绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品溶液，作为储备液，其他不同质量浓度的对照品溶液由储备液稀释得到；步骤二：供试品溶液的制备取菊苣粉末，加入溶剂，真空超声处理后过滤，取续滤液，过微孔滤膜，即得供试品溶液；步骤三：定量分析取对照品溶液和供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪，进行测定分析。2.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤一中所述的溶剂为甲醇
‑
0.5％磷酸溶液，其中甲醇与0.5％磷酸体积比为4:1
‑
3:1；所制成绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸对照品溶液浓度为0.125
‑
0.25mg/mL。3.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤二中所述的菊苣粉末提前过40
‑
60目筛后取5
‑
10g。4.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤二中所述的真空超声处理前加入溶剂为甲醇
‑
0.5％磷酸溶液，其中甲醇与0.5％磷酸体积比为4:1
‑
3:1；加入用量为250
‑
500mL。5.根据权利要求1中所述的一种同时测定菊苣中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸和菊苣酸含量的方法，其特征在于，步骤二中所述的真...

【专利技术属性】
技术研发人员：尚红梅，田雨，张南翼，刘梦雪，李欣雨，鲍晨光，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：