一种基于锁核酸修饰的RMA法检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒制造技术

本申请属于生物检测技术领域，具体为一种基于锁核酸修饰的RMA法检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒；所述引物和探针组分为两组，A组为检测CYP2C9*2和*3的引物对、野生型探针和突变型探针；B组为检测VKORC1

【技术实现步骤摘要】
一种基于锁核酸修饰的RMA法检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒


[0001][0002]本申请属于生物检测
，具体为一种基于锁核酸修饰的RMA法检测CYP2C9和 VKORC1基因多态性的试剂盒。

技术介绍

[0003]华法林是临床常用的抗凝药物，它通过抑制肝细胞中凝血因子的合成，对抗有凝血功能的维生素K的作用，降低凝血酶诱导的血小板聚集反应，从而起到抗凝作用，主要用于防治血栓栓塞性疾病。但华法林临床使用治疗窗窄，个体剂量差异大，容易导致出血不良反应。药物基因组学研究表明，VKORC1和CYP2C9基因多态性是华法林个体化治疗中最重要的因素，美国FDA建议在使用华法林前检测CYP2C9和VKORC1的基因型，以保证准确的用药量。因此，病人在首次服用华法林之前检测CYP2C9和VKORC1基因多态性，对患者的疗效获益及避免出血等不良事件的发生有重要的指导意义。
[0004]华法林在肝脏中的代谢依赖于细胞色素P450，故CYP2C9基因多态性会对华法林的剂量产生影响。CYP2C9最常见的突变是CYP2C9*2(rs179本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于锁核酸修饰的RMA法检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物探针组，其特征在于，所述引物探针组分为两组，A组为检测CYP2C9*2和*3的引物对、野生型探针和突变型探针；B组为检测VKORC1
‑
1639G>A的引物对、野生型探针和突变型探针，其中，A组的CYP2C9*2引物和探针序列为：上游引物：5
’‑
GATATGAAGCAGTGAAGGAAGCCCTGATTGAT
‑3’
；下游引物：5
’‑
AGTAGTCCAGTAAGGTCAGTGATATGGAGTAGG
‑3’
；野生型探针：5
’‑
TTGGGATGGGGAAGAGGAGCAT(FAM
‑
dT)GAGGACCG(THF)G(BHQ
‑
dT)TCAAGAGGAAGC(C3spacer)
‑3’
；突变型探针：5
’‑
TTGGGATGGGGAAGAGGAGCAT(ROX
‑
dT)GAGGACTG(THF)G(BHQ
‑
dT)TCAAGAGGAAGC(C3spacer)
‑3’
；A组的CYP2C9*3引物和探针序列为：上游引物：5
’‑
CAGGAAGAGATTGAACGTGTGATTGGCAGAA
‑3’
；下游引物：5
’‑
GCAGTGTAGGAGAAACAAACTTACCTTGGGAAT
‑3’
；野生型探针：5
’‑
AGATGCTGTGGTGCACGAGGTCCAGAGA(TET
‑
dT)ACA(THF)(BHQ
‑
dT)GACCTTCTCCCCACCA(C3spacer)
‑3’
；突变型探针：5
’‑
AGATGCTGTGGTGCACGAGGTCCAGAGA(CY5
‑
dT)ACC(THF)(BHQ
‑
dT)GACCTTCTCCCCACCA(C3spacer)
‑3’
。B组的VKORC1
‑
1639G>A引物和探针序列为：上游引物：5
’‑
GCAGGAGAGGGAAATATCACAGACGCCAGAG
‑3’
；下游引物：5
’‑
GTTCTCGTGCCTCAGCCTCCCAAGTAGTTT
‑3’
；野生型探针：5
’‑
AGAGAAGACCTGAAAAACAACCAT(FAM
‑
dT)GGCCGGG(THF)GCGG(BHQ
‑
dT)GGCTCACGCCT(C3spacer)
‑3’
；突变型探针：5
’‑
AGAGAAGACCTGAAAAACAACCAT(ROX
‑
dT)GGCCAGG(THF)GCGG(BHQ
‑
dT)GGCTCACGCCT(C3spacer)
‑3’
。2.如权利要求1所述的一种基于锁核酸修饰的RMA法检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物探针组，其特征在于，所述探针修饰有荧光基团和猝灭基团，所述猝灭基团修饰在THF 3
’
端的T碱基上，荧光基团修饰在SNP位点的5
’
端T碱基上或...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈大为，陈龙，张瑶，
申请(专利权)人：济南国益生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：