本发明专利技术涉及抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并且(i)抑制细菌与肠上皮细胞，优选人肠上皮细胞的黏附，和/或(ii)消耗细菌。本发明专利技术还提供了包含根据本发明专利技术的抗体或其抗原结合片段的药物、或包含由根据本发明专利技术的方法生产的抗体的药物。本发明专利技术还涉及包含根据本发明专利技术的抗体或其抗原结合片段的试剂盒，其用于减少Th17细胞增殖、减少Th17细胞分化或降低Th17细胞活性和/或抑制B细胞形成针对内源性抗原的抗体。根据本发明专利技术的试剂盒任选地包含抗生素。本发明专利技术还涉及用于生产根据本发明专利技术的抗体的方法，该方法包括以下步骤：a)用来自暂定种丝状段细菌抗原的免疫原性肽免疫鸡；和b)获得并纯化在鸡中或在所述鸡下的蛋中形成的抗体。本发明专利技术最后涉及用于生产根据本发明专利技术的药物的方法，该方法包括以下步骤：a)生产根据本发明专利技术的抗体或其抗原结合片段；和b)将抗体或其抗原结合片段制成药物。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过抗体介导的特定肠道细菌的中和作用治疗免疫性疾病本专利技术涉及通过抗体介导的特定肠道细菌的中和作用治疗免疫性疾病和其他疾病。更具体地，本专利技术涉及抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段与暂定种丝状段细菌(CandidatusSavagella)的抗原结合，并且(i)抑制细菌与肠上皮细胞，优选人肠上皮细胞的黏附，和/或(ii)消耗细菌。本专利技术还提供了包含根据本专利技术的抗体或其抗原结合片段的药物、或包含由根据本专利技术的方法生产的抗体的药物。本专利技术还涉及包含根据本专利技术的抗体或其抗原结合片段的试剂盒，其用于减少Th17细胞增殖、减少Th17细胞分化或降低Th17细胞活性和/或抑制B细胞形成的针对内源性抗原的抗体。根据本专利技术的试剂盒任选地包含抗生素。本专利技术还提供了用于生产根据本专利技术的抗体的方法，该方法包括：a)用来自暂定种丝状段细菌抗原的免疫原性肽免疫鸡；和b)回收和纯化在鸡中或在所述鸡下的蛋中形成的抗体。本专利技术最后涉及用于生产根据本专利技术药物的方法，其包括：a)生产根据本专利技术的抗体或其抗原结合片段；和b)将抗体或其抗原结合片段制成药物。每个人体内都有超过100万亿个细菌，它们整体被称为微生物组。这些细菌大多寄生在在肠道中，对人类消化植物纤维、提供维生素和取代有害微生物很有用。这种共生关系代表着对人类免疫系统的日常考验：只有一层上皮细胞的单层屏障将人与人的微生物组隔开。肠壁的免疫细胞必须不断地在对有益细菌的耐受和对有害细菌的防御之间做出选择。因此，微生物组的组成对免疫系统，从而对人类健康有直接而重大的影响也就不足为奇了[1]。在过去的几十年里，在所有工业化国家中，免疫介导的疾病都显著增加。这些疾病包括频繁诊断的溃疡性结肠炎、克罗恩病、类风湿性关节炎、1型糖尿病和多发性硬化症，但也有变应性疾病，如神经性皮炎和过敏性哮喘。这些疾病的增长速度如此之快，以至于基因变化不可能是原因。例如，1980年至1994年间，美国过敏性哮喘的发病率上升了75％，而同期发展中国家的发病率保持不变[6]。必须要问的问题是，什么样的环境影响可以解释免疫介导的疾病的快速上升。饮食习惯的改变，特别是盐、脂肪、糖、农药和抗生素污染食物摄入量的增加，以及没有免疫调节和寄生肠道蠕虫，可能会导致微生物组和免疫系统之间的动态平衡失调(生物失调)。生物失调的其他原因可能在于出生后肠道定植的改变，例如剖腹产后，以及生活环境卫生程度的提高。然而，人体微生物组对免疫反应的表现有相当大的影响[1]。某些非病理性的细菌本身仍然可以施加免疫调节或免疫刺激的影响。因此，以治疗性免疫调节为目的影响微生物组代表了选定免疫疾病的发病率[7]，这是许多社会经济相关疾病的有趣治疗方法。虽然以前的方法，例如益生菌[8]、益生元[9]和抗生素[10]疗法在某些情况下已经成功，但它们对于达到预期的免疫效果来说太不特异了。一种名为暂定种丝状段细菌(分段丝状细菌，SFB)的丝状细菌与宿主表现出特别有趣的相互作用：在婴儿期，它大量参与免疫系统的发育和成熟；在生命的后期，它刺激获得性免疫系统的某些效应细胞，Th17细胞，而效应细胞反过来可以对抗有害的肠道细菌。然而，同样的免疫细胞也负责免疫介导性疾病的发展和进展，如自身免疫性疾病和特应性疾病。事实上，在类风湿性关节炎、多发性硬化症和过敏性哮喘的动物模型中，没有SFB定植的实验动物表现出明显较少的症状[2-4]。暂定种丝状段细菌(SFB)在肠道黏膜中产生持续的生理性炎症反应，从而增强对病理性肠道细菌的免疫防御。这种进化上保守的概念过度(例如，在失调的情况下)可能会有害，并导致身体其他部位的免疫介导性疾病[1]。近年来，这种联系日益引起基础科学的兴趣，并成为高级出版物的主题[2；3；11-13]。US2012/276149描述了SFB的施用，以增强对肠道感染的免疫能力。WO2011/047153描述了对Th17免疫反应的调节，包括通过影响SFB的黏附和增殖。然而，具体的治疗概念还没有被描述出来。因此，本专利技术解决的技术问题可以被认为是提供这种治疗方法的技术问题。该技术问题是通过权利要求中描述的和下面描述的实施方案来解决的。因此，本专利技术涉及抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并且(i)抑制细菌与肠上皮细胞，优选人肠上皮细胞的黏附，和/或(ii)消耗细菌。优选地，抗体或抗原结合片段与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并且抑制细菌与肠上皮细胞，优选人肠上皮细胞的黏附，和/或消耗细菌。根据本专利技术的抗体或其抗原结合片段特异性地结合到暂定种丝状段细菌(分段丝状细菌，SFB)的抗原，优选地结合到细菌壁蛋白。在此，选择抗原，使得根据本专利技术的抗体或其抗原结合片段的结合抑制细菌与肠上皮细胞的黏附或消耗细菌。根据本专利技术的抗体或其抗原结合片段与抗原的结合也可以抑制细菌的增殖。这些机制的组合也包含在本专利技术的上下文中。例如，可以选择抗原，使得根据本专利技术的抗体与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并抑制细菌与肠上皮细胞的黏附并消耗细菌。替代地，可以选择抗原，使得根据本专利技术的抗体与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并抑制细菌与肠上皮细胞的黏附并抑制细菌的增殖。还包括所有三种机制的组合，因此抗原被定义为使得根据本专利技术的抗体或抗原结合片段与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并且抑制细菌与肠上皮细胞的黏附，抑制细菌的增殖以及消耗细菌。在FraunhoferIZI和ITEM进行的研究中，有可能表明口服抗体治疗可以降低SFB的定植密度，这种对微生物组的特异性校正导致免疫介导疾病的免疫耐受。SFB特异性抗体是从SFB蛋白免疫的鸡的鸡蛋中回收的；这种方法可以快速、高度成本有效地产生强结合抗体，这些抗体也表现出特殊的酸稳定性，因此非常适合口服治疗[5]。形成本专利技术基础的概念如图1所示：丝状暂定种丝状段细菌(分段丝状细菌，SFB)定植于肠壁，并通过树突状细胞激活Th17细胞，这有助于自身免疫和特应性。首先，鉴定、合成适合该细菌的菌壁蛋白，并将其注射到鸡体内。这些鸡形成高度特异性的中和的抗SFB抗体，这些抗体可以从鸡蛋中分离出来，并可用于口服抗体治疗。肠道中SFB微生物数量的减少会导致Th17效应细胞活性的降低，从而导致免疫耐受。用口服施用的抗体特异性中和SFB的主要优点是，实际上不会将抗体转移到循环中，因此可以避免抗体治疗的常见不良反应，或者例如在地塞米松治疗过敏性呼吸道疾病的情况下观察到的不良反应。已经描述了口服施用抗体成功用于减少肠道病原病毒[14]、真菌[15]和细菌[16；17]的实例。然而，到目前为止，以免疫调节为目的的口服抗体疗法只针对免疫系统的直接靶点进行。其中一个成功的实例是使用针对T细胞表面蛋白CD3的抗体([18]；US7883703B2)。本专利技术的一个主要优点是使用来自经免疫的鸡的鸡蛋的治疗性IgY抗体。这种方法有很多优点：除了高成本效益的生产过程外，可以快速和大量地制备抗体。IgY比IgG更耐酸，因此特别适合口服施用。一只鸡每年可以产生高达30克的纯抗体，而且这种抗体具有很高的结合强度。最后，IgY具有不同于哺乳动物本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并且(i)抑制细菌与肠上皮细胞，优选人肠上皮细胞的黏附，和/或(ii)消耗细菌。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180803 DE 102018213030.21.一种抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段与暂定种丝状段细菌的抗原结合，并且(i)抑制细菌与肠上皮细胞，优选人肠上皮细胞的黏附，和/或(ii)消耗细菌。
2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段选自：免疫球蛋白分子、多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、CDR嫁接产生的抗体、人源化抗体、Fab、Fab′、F(ab′)2、Fv、二硫键连接的Fv、ScFv、单结构域抗体、双抗体、多特异性抗体、双特异性抗体和双特异抗体。
3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其中抗体是鸡免疫球蛋白分子或抗体。
4.根据权利要求3所述的抗体或其抗原结合片段，其中鸡免疫球蛋白分子为IgY。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段导致Th17细胞增殖减少、Th17细胞分化减少或Th17细胞活性降低和/或抑制B细胞形成的针对内源性抗原的抗体。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中暂定种丝状段细菌的抗原是细菌壁蛋白，优选包含SEQIDNo.1所示的氨基酸序列的肌球蛋白交叉反应抗原。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中抗体或抗原结合片段与肌球蛋白交叉反应抗原的表位结合，所述表位组成为或包含氨基酸序列SVLDEFYWLDKKDPYSL(SEQIDNo.2)、PDFKAVRFTRRNQYESMI(SEQIDNo.3)或...
【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯多夫·尔克鲁格，丹尼尔·克里斯托夫·瓦格纳，阿米·布劳恩，克里斯蒂娜·海塞，
申请(专利权)人：弗劳恩霍夫应用研究促进协会，
类型：发明
国别省市：德国;DE
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