一种稻田土壤生物固氮潜势的测定方法技术

一种稻田土壤生物固氮潜势的测定方法，包括泥浆配制、同位素标记、生物固氮量测定及潜势计算。该方法利用

【技术实现步骤摘要】
一种稻田土壤生物固氮潜势的测定方法
本专利技术属于生物固氮领域，具体涉及一种稻田土壤生物固氮潜势的测定方法。
技术介绍
生物固氮是指微生物利用大气中惰性的氮气，在固氮酶的作用下将其转化为氨的过程，在工业合成氨技术专利技术之前，生物固氮一直是生态系统中氮素输入的重要过程。存在土壤中的生物固氮主要存在以下三种形式：共生生物固氮、联合生物固氮和自生生物固氮，其中共生固氮微生物需要与其他生物形成特异性结构以实现固氮效果，如根瘤；而参与后两者固氮过程的微生物生态类型多样，分布更加广泛，虽固氮量不及前者，但对生态系统氮素的固定和周转仍具有重要意义。目前，测定土壤生物固氮量的方法主要有总氮差值法、乙炔抑制法和同位素示踪法。总氮差值法通过计算生态系统中氮输入和输出的差值得出固氮量，但是忽略了氨挥发、径流、硝化-反硝化等过程导致的氮素损失，因此其结果的重复性和准确性较差。乙炔抑制法是利用固氮酶能将乙炔转化为乙烯的特性，通过测定一段时间内的乙烯转化量来间接推算固氮酶活性及固氮量的方法，其特点是成本低，操作相对简便，可在短时间内批量处理样品。但是该方法在准确定量上存本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种稻田土壤生物固氮潜势测定方法，其特征在于步骤为：(1)泥浆配制：将过2mm筛的新鲜土壤样本和水按质量比1:7混合制成泥浆，冲氦气30分钟，在氦气环境下将曝过气的泥浆分装入12mL顶空瓶中并拧紧瓶盖，保证瓶中没有气泡，然后将泥浆置于旋转培养箱内室温避光预培养24h；(2)同位素标记：利用玻璃进样针刺穿瓶盖隔垫向泥浆样品中添加0.5mL丰度为99％

【技术特征摘要】
1.一种稻田土壤生物固氮潜势测定方法，其特征在于步骤为：(1)泥浆配制：将过2mm筛的新鲜土壤样本和水按质量比1:7混合制成泥浆，冲氦气30分钟，在氦气环境下将曝过气的泥浆分装入12mL顶空瓶中并拧紧瓶盖，保证瓶中没有气泡，然后将泥浆置于旋转培养箱内室温避光预培养24h；(2)同位素标记：利用玻璃进样针刺穿瓶盖隔垫向泥浆样品中添加0.5mL丰度为99％15N-N2，同时利用针头排出等体积泥浆，添加完15N-N2的泥浆样品置于旋转培养箱室温避光培养；(3)生物固氮量测定：培养结束后将泥浆重新分装进12mL顶空瓶，然后向培养前和培养后的泥浆样品加入0.2mL次溴酸钠碘溶液并震荡均匀，再以1500r·min-1速度离心5min，最后利用膜进样质谱仪测定上清液水溶解的N2同位素信号强度；(4)标准曲线绘制和生物固氮潜势计算：制备0、2、4、8、10、20μmol·L-1丰度为99％的15NH4Cl，溶液分装于12mL顶空瓶中，用微量进样针往每个顶空瓶中加入0.2mL氧化剂将15NH4+氧化为N2，所述N2为29N2和30N2，利用MIMS测定水中15N信号强度，15N信号强度等于两倍30...

【专利技术属性】
技术研发人员：单军，吴敏，金科，颜晓元，
申请(专利权)人：中国科学院南京土壤研究所，
类型：发明
国别省市：江苏;32