一种基于即时检测试纸条的核酸检测方法、检测探针及其试剂盒技术

本发明专利技术涉及核酸检测技术领域，尤其涉及一种基于即时检测试纸条的核酸检测方法、检测探针及其试剂盒。本发明专利技术核酸检测方法基于CRISPR/Cas12a系统和早孕试纸联用，将本发明专利技术非特异性hCG检测探针与特异性识别待测序列的crRNA序列结合对核酸进行检测，大大降低了检测成本，具有明显的检测靶标普适性，灵敏度高、特异性好，检测灵敏度可媲美荧光终点表征法，最低可检测至2个分子拷贝数。

【技术实现步骤摘要】
一种基于即时检测试纸条的核酸检测方法、检测探针及其试剂盒
本专利技术涉及核酸检测
，尤其涉及一种基于即时检测试纸条的核酸检测方法、检测探针及其试剂盒。
技术介绍
突发和一系列重大急性、慢性传染病一直是对人类健康危害最大、造成死亡人数最多的严重疾患。特别是一些基因型多样、结构蛋白复杂的传染性病毒，由于疫苗的研发周期较长，因此在寻找新药物的同时，现场即时精准检测(Point-of-caretesting,POCT)是有效排查和控制各种重大急、慢性传染病原的重要前提。目前，市面上对于突发性病毒传染病的检测方法主要为两种，一种是对病毒核酸进行检测，另一种是抗原抗体检测。由于这两种方法检测感染后的窗口期不同，核酸检测的窗口期明显短于抗原抗体检测，故更利于感染的早期筛查。因此，实现传染病的灵敏、特异、便携式的核酸检测仍然是目前不断完善和发展的目标。近年来，随着分子诊断领域的蓬勃发展，为了开发便携式诊断系统，科学家们开创了一种新的传感理念，即利用商品化POCT产品检测非原始待测物；这种方法不仅可以降低仪器开发成本，同时也可以真正实现核酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于即时检测试纸条的核酸检测方法，其特征在于，包括：/n将待测核酸样本、hCG标记的单链DNA探针、crRNA和Cas12a蛋白溶于缓冲液，反应，获得第一反应液；/n在第一反应液中加入基底物质孵育，获得第二反应液；/n将第二反应液滴加至早孕试纸条的样品垫上，等待5-8min，观察检测线和质控线的显色情况，判断是否含有待测核酸；/n所述crRNA为特异性结合待测核酸的crRNA序列；/n所述基底物质为能够与hCG标记的单链DNA探针结合的大分子物质。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于即时检测试纸条的核酸检测方法，其特征在于，包括：
将待测核酸样本、hCG标记的单链DNA探针、crRNA和Cas12a蛋白溶于缓冲液，反应，获得第一反应液；
在第一反应液中加入基底物质孵育，获得第二反应液；
将第二反应液滴加至早孕试纸条的样品垫上，等待5-8min，观察检测线和质控线的显色情况，判断是否含有待测核酸；
所述crRNA为特异性结合待测核酸的crRNA序列；
所述基底物质为能够与hCG标记的单链DNA探针结合的大分子物质。


2.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述待测核酸样本为：待测核酸的DNA全长或片段、待测核酸的PCR产物或恒温扩增产物。


3.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述单链DNA探针的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。


4.根据权利要求3所述的核酸检测方法，其特征在于，所述hCG标记的单链DNA探针中，所述hCG蛋白的氨基酸序列通过NH2C6修饰在所述单链DNA探针的5＇端。


5.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述基底物质为通过碱基互补与单链DNA探针结合的任意序列的大分子量单链DNA，
或为

【专利技术属性】
技术研发人员：李冰凌，杜衍，唐艺丹，杨媚婷，
申请(专利权)人：中国科学院长春应用化学研究所，
类型：发明
国别省市：吉林;22