一种具有免疫调节作用的肠球菌胞外多糖及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种具有免疫调节作用的肠球菌胞外多糖及其制备方法和应用，利用海氏肠球菌(Enterococcus hirae)WEHI01发酵产生胞外多糖，并对胞外多糖进行分离纯化，海氏肠球菌WEHI01保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2019068。制备的肠球菌胞外多糖包括四种组分：EPS‑I01，EPS‑I02，EPS‑I03和EPS‑I04，组分EPS‑I02的平均分子量为2.28×10

【技术实现步骤摘要】
一种具有免疫调节作用的肠球菌胞外多糖及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生物学中的多糖
，具体为一种具有免疫调节作用的肠球菌胞外多糖及其制备方法和应用。
技术介绍
乳酸菌(Lacticacidbacteria，LAB)，泛指利用可发酵碳水化合物，并且产生大量乳酸的细菌，是公认的绿色安全(GRAS)的食品级微生物。乳酸菌除了产乳酸、乙酸、甲酸和叶酸外，还会产生其他次生代谢产物，如细菌素和胞外多糖等。乳酸菌胞外多糖不仅可以改善发酵乳制品的质构和风味，如增稠、稳定、乳化、胶凝及持水等；还具有多种生理功能，包括促进菌体黏附、抗氧化、降低胆固醇、抗肿瘤和增强人体免疫力等。乳酸菌胞外多糖的多样化，使得乳酸菌资源的挖掘和胞外多糖的生物活性研究成为了关注的焦点。肠球菌(Enterococcusspp.)是乳酸菌的一类，其作为益生菌，常被应用于饲料添加剂和微生态制剂中。肠球菌的益生功能包括：改善发酵食品的风味，拮抗食源性致病菌，调节肠道菌群平衡，调节宿主的细胞和体液免疫，降低胆固醇等。研究表明，肠球菌能够产生胞外多糖，相对于植物乳杆菌、鼠李本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有免疫调节作用的肠球菌胞外多糖，其特征在于：该肠球菌胞外多糖为海氏肠球菌胞外多糖，由海氏肠球菌WEHI01菌株发酵产生，所述海氏肠球菌WEHI01于2019年1月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2019068。/n

【技术特征摘要】
1.一种具有免疫调节作用的肠球菌胞外多糖，其特征在于：该肠球菌胞外多糖为海氏肠球菌胞外多糖，由海氏肠球菌WEHI01菌株发酵产生，所述海氏肠球菌WEHI01于2019年1月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO：M2019068。


2.根据权利要求1所述的肠球菌胞外多糖，其特征在于：所述海氏肠球菌胞外多糖包括四种组分：EPS-I01、EPS-I02、EPS-I03和EPS-I04，海氏肠球菌胞外多糖的组分EPS-I02由鼠李糖、海藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，且摩尔比为1:1.76:5.48:1.76:2.52:6.2:20.92，分子量为2.28×104Da。


3.根据权利要求2所述的肠球菌胞外多糖，其特征在于：所述海氏肠球菌胞外多糖的组分EPS-I02增强小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7的吞噬能力，同时刺激RAW264.7细胞分泌NO、TNF-α和IL-6因子。


4.一种具有免疫调节作用的肠球菌胞外多糖的制备方法，包括肠球菌胞外多糖的制备和肠球菌胞外多糖的分离纯化，其特征在于：所述肠球菌胞外多糖的制备包括以下步骤：
(1)将海氏肠球菌WEHI01的种子液以体积比1.0～4.0％的接种量接种于无菌脑心浸液肉汤培养基中，于37℃厌氧培养10～25h，获得发酵液；
(2)将步骤(1)获得的发酵液于4℃，7000～9000×g离心5min，去除菌体，获得发酵上清液；
(3)向步骤(2)获得的发酵上清液中加入2～4倍体积的无水乙醇，置于4℃冰箱中醇沉48～72h，4℃条件下，10000×g离心20min，收集沉淀物，并将沉淀物溶于水，用截留分子量为8000～14000Da的透析袋于4℃条件透析3天，期间每天换两次水，透析后的样品进行冷冻干燥，获得肠球菌胞外多糖粗提物；
(4)将步骤(3)获得的肠球菌胞外多糖粗提物复溶后，加入1/3～1/5体积的Sevag液，剧烈震荡后，9000×g离心5min，取上层水相，多次重复上述操作，获得的粗胞外多糖溶液，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶雪莹，魏华，贾凯颖，王玉洁，何瑶，魏敏，陶悦，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：江西;36