一种表达人表皮生长因子的家蚕丝腺重组表达载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术具体涉及一种表达人表皮生长因子的家蚕丝腺重组表达载体及其制备方法和应用，属于生物材料领域。本发明专利技术所由构建的重组表达载体由截短型丝素重链N‑端结构域、C‑端结构域、优化的人表皮生长因子和家蚕核型多角体病毒增强子融合而成，最大限度地去除了融合蛋白中含有的内源丝蛋白额外结构域的冗余部分，在不影响融合外源目标蛋白整合进入丝基材料的遗传杂交过程的前提下，尽可能地消除了融合蛋白存在的多余翻译后修饰，从而实现利用遗传杂交创制表达高生物学活性人表皮生长因子的功能性蚕丝材料，为利用以家蚕为代表的先进生物合成平台开发新型高生物学活性丝基材料提供可行的解决方案。

【技术实现步骤摘要】
一种表达人表皮生长因子的家蚕丝腺重组表达载体及其制备方法和应用
本专利技术属于生物材料领域，具体涉及一种表达人表皮生长因子的家蚕丝腺重组表达载体及其制备方法和应用。
技术介绍
蚕丝，也称茧丝，是家蚕吐丝结茧时由丝腺分泌的液状丝蛋白固化及纤维化而形成的连续长纤维。蚕丝属于多孔性蛋白纤维，其作为纺织材料具有透气性好、吸湿性极佳等优点。此外，蚕丝所具有的优良机械性能、环境稳定性、生物相容性以及生物可降解性等理化性质，使其作为一种理想的生物材料逐渐在医学和生物组织工程研究领域崭露头角。近年来，蚕丝作为原材料逐渐被广泛应用于组织修复用生物材料的开发研究，并在细胞培养载体、伤口敷料、人工皮肤及组织工程支架等新型材料的创制研究领域显示出良好的应用效果和巨大的潜在开发前景。但是随着社会的发展，蚕丝所具有的传统优良性状已经不能完全满足医用生物材料的需求，科研人员们迫切地期望能够获得既保留蚕丝原有优良机械性能和生物相容性等理化性状，又具有如促细胞生长、增殖、粘附以及伤口愈合等生物学活性的新型蚕丝生物材料。以转基因家蚕作为生物杂交平台(Bio-hyb本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表达人表皮生长因子的家蚕丝腺重组表达载体，其特征在于，所述家蚕丝腺重组表达载体包括载体骨架和目的基因表达框，所述目的基因表达框包括优化的人表皮生长因子基因序列EGF和家蚕核型多角体病毒增强子hr3序列，核苷酸序列分别为SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.1。/n

【技术特征摘要】
1.一种表达人表皮生长因子的家蚕丝腺重组表达载体，其特征在于，所述家蚕丝腺重组表达载体包括载体骨架和目的基因表达框，所述目的基因表达框包括优化的人表皮生长因子基因序列EGF和家蚕核型多角体病毒增强子hr3序列，核苷酸序列分别为SEQIDNO.3、SEQIDNO.1。


2.如权利要求1所述的家蚕丝腺重组表达载体，其特征在于，所述目的基因表达框还包括编码SF-h蛋白N-端结构域1-21位氨基酸的序列优化截短型启动子FHP3s序列，核苷酸序列为SEQIDNO.2。


3.如权利要求1或2所述的家蚕丝腺重组表达载体，其特征在于，所述目的基因表达框还包括编码SF-h蛋白C-端结构域1-20位氨基酸的截短型SF-h基因轻链结合位点LBSs序列，核苷酸序列为SEQIDNO.5。


4.如权利要求3所述家蚕丝腺重组表达载体，其特征在于，所述载体骨架为pBac{3×P3-DsRed}。


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【专利技术属性】
技术研发人员：龙定沛，程岘，孙鉴锋，刘焱萍，代方银，向仲怀，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50