一种植物花粉管液泡荧光标记构建方法与应用技术

一种植物花粉管液泡荧光标记构建方法，包括，克隆肌醇转运蛋白基因AT2G43330 INT1的CDS序列，其序列如SEQ ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个碱基形成的具有同等功能的核苷酸序列；将INT1连接进入花粉管特异启动子启动红色荧光蛋白RFP的Gateway表达载体，通过所述载体在植物花粉中表达融合蛋白RFP‑INT1，其中，RFP为红色荧光蛋白，INT1为拟南芥AT2G43330编码的氨基酸序列；转化植物，筛选，鉴定，获得具有荧光信号的转基因植物。本发明专利技术所构建红色标记能够应用于科学研究，用来确定未知蛋白的亚细胞定位；同时通过瞬时转化，能够快速显示植物花粉液泡动态，间接反映花粉活力，便于筛选优异种质和遗传材料。

【技术实现步骤摘要】
一种植物花粉管液泡荧光标记构建方法与应用
本专利技术属于遗传工程领域，具体地说，涉及一种植物花粉管液泡荧光标记构建方法与应用。
技术介绍
植物的受精对于结实至关重要，花粉的功能在双受精过程中尤为关键，很多育种技术都是利用雄性不育开展的，比如三系杂交水稻、光敏不育系水稻等。为了丰富种质资源，在自然界野生种中筛选雄性不育株系势在必行，但目前检测花粉活力的分子手段还相对较少。很多植物的花粉在体外能够萌发生长出花粉管，花粉管是一种能够迅速生长的极性细胞，生长过程中伴随着细胞器的动态变化，花粉管的液泡往往呈网状结构，其完整性能够间接反应花粉管生长速度和活力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，构建一种植物花粉管液泡荧光标记显示花粉管液泡动态，间接反映花粉活力，以便于筛选优异种质和遗传材料。为实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案具体如下：一种植物花粉管液泡荧光标记构建方法，包括：克隆肌醇转运蛋白基因AT2G43330INT1的CDS序列，其序列如SEQIDNo.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个碱基形成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物花粉管液泡荧光标记构建方法，其特征在于，包括：/n克隆肌醇转运蛋白基因AT2G43330 INT1的CDS序列，其序列如SEQ ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个碱基形成的具有同等功能的核苷酸序列；将INT1连接进入花粉管特异启动子启动红色荧光蛋白RFP的Gateway表达载体，通过所述载体在植物花粉中表达融合蛋白RFP-INT1，其中，RFP为红色荧光蛋白，INT1为拟南芥AT2G43330编码的氨基酸序列；转化植物，筛选，鉴定，获得具有荧光信号的转基因植物。/n

【技术特征摘要】
1.一种植物花粉管液泡荧光标记构建方法，其特征在于，包括：
克隆肌醇转运蛋白基因AT2G43330INT1的CDS序列，其序列如SEQIDNo.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个碱基形成的具有同等功能的核苷酸序列；将INT1连接进入花粉管特异启动子启动红色荧光蛋白RFP的Gateway表达载体，通过所述载体在植物花粉中表达融合蛋白RFP-INT1，其中，RFP为红色荧光蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：万智远，
申请(专利权)人：江苏师范大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32