一种人iPSC来源的锥体神经细胞前体细胞及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种人iPSC来源的锥体神经细胞前体细胞及其制备方法和应用，属于脊髓损伤治疗技术领域，通过Dorsomorphin小分子化合物诱导人iPSC分化为锥体神经细胞前体细胞，分化比例高达90％以上，本发明专利技术提供的锥体神经细胞前体细胞，移植大鼠撞击模型后，能够显著改善大鼠的运动功能。将所述锥体神经细胞前体细胞移植到免疫缺陷小鼠以及经免疫抑制剂注射后的大鼠，所述分化锥体神经细胞前体细胞能够移植存活，并表现出较强的轴突投射能力。

【技术实现步骤摘要】
一种人iPSC来源的锥体神经细胞前体细胞及其制备方法和应用
本专利技术属于脊髓损伤治疗
，尤其涉及一种人iPSC来源的锥体神经细胞前体细胞及其制备方法和应用。
技术介绍
脊髓损伤(SpinalCordInjury，SCI)是一种严重的神经系统损伤疾病，是由于外部创伤造成了脊髓灰质和白质受损坏死，损伤区继发炎症反应，形成的血栓加重脊髓缺血，而胶质细胞大量增生形成的瘢痕组织阻碍神经纤维的再生，导致神经元和神经纤维的变形坏死。脊髓损伤能导致患者不同程度的截瘫。脊髓损伤不仅会给患者本人带来身体和心理的严重伤害，还会对整个社会造成巨大的经济负担。由于脊髓损伤所导致的社会经济损失，针对脊髓损伤的预防、治疗和康复已成为当今医学界的一大课题。到目前为止脊髓损伤仍是难以治愈的疾病之一，神经的修复再生较难，因此，如何有效保护神经细胞促进神经修复是恢复神经功能的决定性因素，目前较多用于此研究的细胞为干细胞，如胚胎干细胞(Embryonicstemcells，ESCs)、间充质干细胞(Marrowstromalcells，MSCs)、神经干细胞/本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人iPSC来源的锥体神经细胞前体细胞的制备方法，包括以下步骤：/n1)将人iPSC接种于matrigel基质胶上，并用iPSC专用培养基中预培养2d后，获得预培养细胞；/n2)将所述预培养细胞置于第一诱导分化培养基中进行第一诱导分化培养获得第一分化细胞；/n3)将所述第一分化细胞置于第二诱导分化培养基中进行第二诱导分化培养获得第二分化细胞；/n4)将所述第二分化细胞置于第三诱导分化培养基中进行第三诱导分化培养获得锥体神经细胞前体细胞；/n所述第一诱导分化培养基为DDM培养基+终浓度0.2～2μmol/L的Dorsomorphin+20mL/L的B27；/n所述第一诱导分化培养的时间为1...

【技术特征摘要】
1.一种人iPSC来源的锥体神经细胞前体细胞的制备方法，包括以下步骤：
1)将人iPSC接种于matrigel基质胶上，并用iPSC专用培养基中预培养2d后，获得预培养细胞；
2)将所述预培养细胞置于第一诱导分化培养基中进行第一诱导分化培养获得第一分化细胞；
3)将所述第一分化细胞置于第二诱导分化培养基中进行第二诱导分化培养获得第二分化细胞；
4)将所述第二分化细胞置于第三诱导分化培养基中进行第三诱导分化培养获得锥体神经细胞前体细胞；
所述第一诱导分化培养基为DDM培养基+终浓度0.2～2μmol/L的Dorsomorphin+20mL/L的B27；
所述第一诱导分化培养的时间为14～18d；
所述第二诱导分化培养基为DDM培养基+20mL/L的B27；
所述第二诱导分化培养的时间为7～9d；
所述第三诱导分化培养基为DDM培养基+终浓度5～15mmol/L的ROCKinhibitor+20mL/L的B27；
所述第三诱导分化培养的时间为6～8d。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一诱导分化培养基中Dorsomorph...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈志国，李默，
申请(专利权)人：首都医科大学宣武医院，
类型：发明
国别省市：北京;11