用于过继免疫疗法的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及赋予和/或增加由细胞免疫疗法介导的免疫应答的药剂、组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于过继免疫疗法的组合物和方法相关申请的交叉引用本申请要求2019年07月23日提交的美国临时申请号62/877,331和2020年06月25日提交的美国临时申请号63/044,059的优先权。该申请的内容通过引用整体并入本文。专利
本专利技术涉及重组抗原受体及其用途。经过工程化改造以表达此类抗原受体的T细胞可用于治疗以表达一种或多种与所述抗原受体结合的抗原为特征的疾病。
技术介绍
过继免疫疗法涉及向患者施用免疫效应细胞以产生治疗作用。嵌合抗原受体(CAR)T细胞的出现为改善过继免疫疗法提供了有用的工具。为此，使用基因工程将定义特异性的抗原靶向受体插入T细胞，这极大地扩展了过继免疫疗法的能力。CAR是一种类型的抗原靶向受体，其由与胞外抗原结合域融合的胞内T细胞信号传导域组成。基于抗体的CAR直接识别细胞表面抗原，而不依赖于主要组织相容性复合物(MHC)介导的呈递，从而允许在所有患者中使用对任何给定抗原具有特异性的单个受体构建体。最初，CAR将抗原识别域融合至T细胞受体(TCR)复合物的CD3ζ(CD3ζ)活化链。随后的CAR迭代包括与CD3ζ串联的次级共刺激信号，包括来自CD28的胞内域或多种TNF受体家族分子，如4-1BB(CD137)和OX40(CD134)。除了CD3ζ以外，第三代受体包括两种不同的共刺激信号，最常见的来自CD28和4-1BB。第二代和第三代基于抗体的CAR在体外和体内均改善了抗肿瘤有效性。转基因T细胞受体(tTCR)和基于TCR的CAR(TCR-CAR)与基于抗体的CAR不同，其主要在于tTCR和基于TCR的CAR以MHC(HLA)限制性方式结合至抗原。因此，tTCR和基于TCR的CAR极大地扩展了可能的靶点列表。此前已经描述了以两种单独的病毒载体形式建立的包含人CD28和CD3ζ(CD3Z)的胞质域或人CD28和CD3ε(CD3E)的胞质域的第二代TCR-CAR(Govers等，JournalofImmunology,2014,193:5315–5326)，以及此前在美国专利号9,206,440和ImEJ等，Recombination–deletionbetweenhomologouscassettesinretrovirusissuppressedviaastrategyofdegeneratecodonsubstitution.MolecularTherapy—Methods&ClinicalDevelopment(2014)Articlenumber:14022中描述的以单一病毒载体形式建立的包含人CD28和CD3ζ的胞质域的第二代TCR-CAR。此外，此前还描述了以单一病毒载体形式建立的包含单链TCR和人CD28和CD3ζ的胞质域的第二代TCR-CAR(Walseng等，ATCR-basedChimericAntigenReceptor.SciRep.2017Sep6；7(1):10713)。除了CD3ζ以外，第三代受体包括两种不同的共刺激信号，最常见的来自CD28和4-1BB。第二代和第三代基于抗体的CAR在体外和体内改善了抗肿瘤有效性。与第二代或第三代基于抗体的CAR不同的是，tTCR和基于TCR的CAR面临各种障碍，如为了有效的tTCR或基于TCR的CAR表达和活性而失去稳定性。尽管tTCR本身在其自身分子中缺乏共刺激信号传导，但目前报道的基于TCR的CAR缺乏足够的共刺激信号传导元件(如4-1BB)或缺乏针对最佳细胞表面表达盒CAR介导的T细胞活性的最佳设计。对新的基于TCR的CAR设计以及提供具有增强功能的细胞的过继疗法存在需求。
技术实现思路
本公开内容在多个方面解决了上述需求。在一个方面中，本公开内容提供了一种抗原受体，其包含(I)第一多肽链，所述第一多肽链包含胞外域、跨膜(TM或Tm)域(TMD)和胞质域(Cyt或cyt)，所述胞外域包含TCRβ链或其抗原结合片段；和(II)第二多肽链，所述第二多肽链包含胞外域(Ec)、跨膜域和胞质域，所述胞外域包含TCRα链或其抗原结合片段。所述TCRβ链和所述TCRα链形成抗原结合位点。在实施方式中，所述第一多肽链在所述跨膜域和所述胞质域的一个或多个中基本上不同于所述第二多肽链。所述第一多肽链的所述胞质域或所述第二多肽链的所述胞质域包含(a)0、1或2个拷贝的人4-1BB或其片段的胞质域，或(b)0、1或2个拷贝的人CD3ζ(CD3Z)或其片段的胞质域，或(c)0、1或2个拷贝的人CD3ε(CD3E)或其片段的胞质域，或(d)0、1或2个拷贝的人CD28或其片段的胞质域的。在所述抗原受体中，所述第一多肽链的所述跨膜域或所述第二多肽链的所述跨膜域可以包含选自以下的一者：CD8的跨膜域和CD28的跨膜域。在一些实施方式中，所述抗原受体包含1或2个拷贝的人4-1BB的所述胞质域。此类抗原受体的实例包括由本文所述的载体NT4、5、6、21、22、23、24、25和27编码的那些。在一些实例中，所述抗原受体可以包含1或2个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。在其他实例中，所述抗原受体可以包含1或2个拷贝的人CD28的所述胞质域。实例包括由载体NT6、21、22、23、24、25和27编码的那些。在一个实施方式中，所述抗原受体仅包含1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。所述抗原受体还可以仅包含1个拷贝的CD28的所述跨膜域和1个拷贝的CD8的所述跨膜域。在一个实例中(如由NT22编码的)，所述第一多肽链可以包含TCRβ链的所述胞外域、1个拷贝的所述CD28跨膜域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域，而所述第二多肽链可以包含TCRα链的所述胞外域、1个拷贝的所述CD8的跨膜域和1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域。在一个实施方式中，所述抗原受体包含2个拷贝的人4-1BB的所述胞质域、2个拷贝的人CD28的所述胞质域和2个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。例如，两条链的每一个可以包含人4-1BB的所述胞质域、人CD28的所述胞质域和人CD3ζ的所述胞质域的每一者的1个拷贝(例如，由NT6编码)。或者，一条多肽链(例如，所述第一多肽链)可以包含2个拷贝的人CD28的所述胞质域，而另一条(例如，所述第二多肽链)可以包含2个拷贝的人4-1BB的所述胞质域。实例包括由载体NT25编码的。在所述抗原受体的一个实施方式中，两条链中的一条具有人CD3ζ的所述胞质域。例如，所述第一多肽链可以包含1个拷贝的人CD28的所述跨膜域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。所述第二多肽链可以包含1个拷贝的人CD8的所述跨膜域和1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域，但不含人CD3ζ的胞质域。实例包括由NT22编码的。在一个实施方式中，所述第一多肽链和所述第二多肽链具有不同的共刺激域。例如，所述第一多肽链可以包含1个拷贝的人CD8的所述胞质域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗原受体，其包含(I)第一多肽链，所述第一多肽链包含胞外域、跨膜域和胞质域，所述胞外域包含T细胞受体(TCR)β链或其抗原结合片段，和(II)第二多肽链，所述第二多肽链包含胞外域、跨膜域和胞质域，所述胞外域包含TCRα链或其抗原结合片段，其中/n所述TCRβ链和所述TCRα链形成抗原结合位点，和/n所述第一多肽链的或所述第二多肽链的所述胞质域包含：/n0、1或2个拷贝的人4-1BB或其片段的胞质域，或/n0、1或2个拷贝的人CD3ζ或其片段的胞质域，或/n0、1或2个拷贝的人CD3ε或其片段的胞质域，或/n0、1或2个拷贝的人CD28或其片段的胞质域。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20190723 US 62/877,331;20200625 US 63/044,0591.一种抗原受体，其包含(I)第一多肽链，所述第一多肽链包含胞外域、跨膜域和胞质域，所述胞外域包含T细胞受体(TCR)β链或其抗原结合片段，和(II)第二多肽链，所述第二多肽链包含胞外域、跨膜域和胞质域，所述胞外域包含TCRα链或其抗原结合片段，其中
所述TCRβ链和所述TCRα链形成抗原结合位点，和
所述第一多肽链的或所述第二多肽链的所述胞质域包含：
0、1或2个拷贝的人4-1BB或其片段的胞质域，或
0、1或2个拷贝的人CD3ζ或其片段的胞质域，或
0、1或2个拷贝的人CD3ε或其片段的胞质域，或
0、1或2个拷贝的人CD28或其片段的胞质域。


2.根据权利要求1所述的抗原受体，其中所述第一多肽链在所述跨膜域和所述胞质域的一个或多个中基本上不同于所述第二多肽链。


3.根据权利要求1所述的抗原受体，其包含1或2个拷贝的人4-1BB的所述胞质域。


4.根据权利要求3所述的抗原受体，其包含1或2个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。


5.根据权利要求3或4所述的抗原受体，其包含1或2个拷贝的人CD28的所述胞质域。


6.根据权利要求1或2所述的抗原受体，其仅包含1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。


7.根据权利要求1或2所述的抗原受体，其仅包含1个拷贝的CD28的所述跨膜域、1个拷贝的CD8的所述跨膜域、1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。


8.根据权利要求1或2所述的抗原受体，其包含2个拷贝的人4-1BB的所述胞质域、2个拷贝的人CD28的所述胞质域和2个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。


9.根据权利要求8所述的抗原受体，其中
所述第一多肽链的所述胞质域包含1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域，和
所述第二多肽链的所述胞质域包含1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。


10.根据权利要求1或2所述的抗原受体，其中
所述第一多肽链包含1个拷贝的人CD28的所述跨膜域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域，和
所述第二多肽链包含1个拷贝的人CD8的所述跨膜域和1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域。


11.根据权利要求1或2所述的抗原受体，其中
所述第一多肽链包含1个拷贝的人CD8的所述跨膜域、1个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域，和
所述第二多肽链包含1个拷贝的人CD8的所述跨膜域、1个拷贝的人4-1BB的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。


12.根据权利要求1或2所述的抗原受体，其中
所述第一多肽链包含1个拷贝的人CD8的所述跨膜域、2个拷贝的人CD28的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域，和
所述第二多肽链包含1个拷贝的人CD8的所述跨膜域、2个拷贝的人4-1BB的所述胞质域和1个拷贝的人CD3ζ的所述胞质域。


13.根据权利要求1-12中任一项所述的抗原受体，其中所述第一或第二多肽链的所述跨膜域包含选自以下的一者：CD8的跨膜域和CD28的跨膜域。


14.根据权利要求1-13中任一项所述的抗原受体，其中所述抗原结合位点在MHC(HLA)限制性方式的背景下结合至肿瘤抗原，或肿瘤相关抗原(TAA)，或病毒抗原，或者其中当在细胞上表达时，所述胞外域在MHC(HLA)限制性方式的背景下...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨文，
申请(专利权)人：杨文，
类型：发明
国别省市：美国;US