精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用制造方法及图纸

技术编号:28555792 阅读:29 留言:0更新日期:2021-05-25 17:49
本发明专利技术实施例涉及光谱检测技术领域,公开了精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用。该方法包括:接收采集的污染物在波长为260nm、280nm以及320nm下的总光密度;扣除总光密度中的背景参比,得到基础总光密度,分解基础总光密度;根据比例常数△OD280

【技术实现步骤摘要】
精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用
本专利技术涉及光谱检测
,具体涉及精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用。
技术介绍
在生物学研究,特别是分子生物学研究中,经常会涉及RNA的浓度检测。传统的RNA浓度检测采取紫外光吸收的方法,在260nm波长下测量10mm光程RNA的光吸收(即光密度,记为OD260),并通过OD260计算RNA浓度:RNA浓度=40*OD260(单位:ng/ul)但是当存在污染时,比如蛋白质污染,在260nm波长下会产生干扰光吸收,而造成RNA浓度偏高,而产生严重误差。现有技术中,如果需要准确获取RNA的浓度,则需要对蛋白质污染的RNA进行提纯,然后再对提纯后的RNA进行测量,这种实现方式较为复杂,成本高。
技术实现思路
针对所述缺陷,本专利技术实施例公开了一种精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用,用于对蛋白质污染的RNA进行浓度检测,可以准确获知污染物中RNA和蛋白质的浓度。本专利技术实施例第一方面公开一种精准RNA浓度检测方法,所述方法包括本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种精准RNA浓度检测方法,其特征在于,包括:/n接收采集的污染物在波长为260nm、280nm以及320nm下的总光密度,所述污染物为含有蛋白质的RNA;/n扣除所述总光密度中的背景参比,得到基础总光密度,分解所述基础总光密度:/n△OD260

【技术特征摘要】
1.一种精准RNA浓度检测方法,其特征在于,包括:
接收采集的污染物在波长为260nm、280nm以及320nm下的总光密度,所述污染物为含有蛋白质的RNA;
扣除所述总光密度中的背景参比,得到基础总光密度,分解所述基础总光密度:
△OD260Total=△OD260RNA+△OD260PRO(1)
△OD280Total=△OD280PRO+△OD280RNA(2)
其中,△OD260Total和△OD280Total分别为污染物在波长为260nm及280nm下的基础总光密度,△OD260RNA和△OD260PRO分别为污染物中RNA和蛋白质在波长为260nm下的基础光密度,△OD280RNA和△OD280PRO分别为污染物中RNA和蛋白质在波长为280nm下的基础光密度;
根据比例常数△OD280RNA%以及△OD260PRO%对公式(1)和(2)进行改写,分别形成公式(3)和(4):
△OD260Total=△OD260RNA+△OD260PRO%*△OD280PRO(3)
△OD280Total=△OD280PRO+△OD280RNA%*△OD260RNA(4)
其中:比例常数△OD280RNA%=△OD280RNA/△OD260RNA,比例常数
△OD260PRO%=△OD260PRO/△OD280PRO;
根据公式(3)和公式(4)求取△OD260RNA和△OD280PRO;
根据△OD260RNA、△OD280PRO以及△OD260PRO%计算所述污染物中RNA的浓度M以及蛋白质的浓度N:
M=40*△OD260RNA(5)
N=1.5*△OD280PRO–0.75*△OD260PRO(6)。


2.根据权利要求1所述的精准RNA浓度检测方法,其特征在于,比例常数△OD280RNA%的获取方法,包括:
采集已经纯化的RNA样本在波长为260nm、280nm以及320nm下的光密度,分别记为OD260RNA、OD280RNA和OD320RNA;
计算所述已经纯化的RNA样本在波长为260nm和280nm下扣除背景参比的基础光密度:
△OD260ˊRNA=OD260RNA–OD320RNA
△OD280ˊRNA=OD280RNA–OD320RNA
计算△OD280RNA%:
△OD280RNA%=△OD280ˊRNA/△OD260ˊRNA
其中,△OD260ˊRNA和△OD280ˊRNA分别为已经纯化的RNA样本在波长为260nm和280nm下的基础光密度。


3.根据权利要求1所述的精准RNA浓度检测方法,其特征在于,比例常数△OD260PRO%的获取方法,包括:
采集已经纯化的蛋白质样本在波长为260nm、280nm以及320nm下的光密度,分别记为OD260PRO、OD280PRO和OD320PRO;
计算所述已经纯化的蛋白质样本在波长为260nm和280nm下扣除背景参比的基础光密度:
△OD260ˊPRO=OD260PRO–OD320PRO
△OD280ˊPRO=OD280PRO–OD320PRO
计算△OD260PRO%:
△OD260PRO%=△OD260ˊPRO/△OD280ˊPRO
其中,△OD260ˊRNA和△OD280ˊRNA分别为已经纯化的RNA样本在波长为260nm和280nm下的基础光密度。


4.根据权利要求1–3任一项所述的精准RNA浓度检测方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:公杰张俊宾郭求真谭卿
申请(专利权)人:广州睿贝医学科技有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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