金钆复合纳米探针、制备方法及应用技术

公开一种金钆复合纳米探针、制备方法及应用，能够保证同步辐射实验与常规成像、定量研究结果的一致性，可以实现同步X射线成像，大大节省同步X射线成像筛选样品的时间，可以计算得到复合探针内金属含量与细胞所表达蛋白质分子的比例关系，计算出细胞内蛋白质的表达量，是实现单细胞尺度特定蛋白质胞内分布以及表达量的定量分析的有效解决方案。这种金钆复合纳米探针，包括：纳米金和纳米氧化钆复合在一起形成的纳米复合结构、在纳米复合结构外层的包覆物质，所述包覆物质包括生物蛋白质分子和多肽分子。和多肽分子。和多肽分子。

【技术实现步骤摘要】
金钆复合纳米探针、制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及化学、纳米材料及生物学的
，尤其涉及一种金钆复合纳米探针，这种探针的制备方法，以及该金钆复合纳米探针在制备用于同步辐射X射线断层扫描单细胞蛋白质可视化成像及定量检测的应用。

技术介绍

[0002]蛋白质在细胞功能和结构构建中起着重要作用，其表达和定位影响细胞迁移、细胞间相互作用，同时还与一些病症如癌症的发展程度密切相关。但是由于在一个生物系统中，蛋白质的表达量往往出现较大的异质性，不同组织中同一蛋白表达量相差很大，即使同一组织中不同环境中的细胞表达蛋白质的量也有一定差别。在单细胞尺度分析蛋白质表达水平及分布，对于阐明每个细胞在这些系统的功能中所起的作用是很重要的。
[0003]同步辐射X射线显微镜以能量可调、高单色性、相干性和能量分辨能力的同步辐射X射线为光源，基于物质对X射线的吸收、相位、衍射、折射等物理过程，能够实现对生物细胞的高分辨三维完整及精细结构多尺度成像(几纳米
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几微米)。然而，由于蛋白质分子与生物样品本征的差异性较小，仅靠细胞蛋白样品对X本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.金钆复合纳米探针，其特征在于：其包括：纳米金和纳米氧化钆复合在一起形成的纳米复合结构、在纳米复合结构外层的包覆物质，所述包覆物质包括生物蛋白质分子和多肽分子。2.根据权利要求1所述的金钆复合纳米探针，其特征在于：所述生物蛋白质分子和多肽分子的摩尔比例是1：a，a为1～20；所述生物蛋白质分子与金钆复合纳米探针中金、钆元素的摩尔比例是1：b：c，b为10～1000，c为10～1000。3.根据权利要求1所述的金钆复合纳米探针，其特征在于：所述生物蛋白质分子是牛血清白蛋白BSA、人血清白蛋白、铁红蛋白、纤连蛋白、卵清蛋白中的一种或多种；所述多肽分子是是特定蛋白质或特定亚细胞器结构靶向序列组成的序列，所述特定蛋白质包含但不限于整合素蛋白、人表皮生长因子受体
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2蛋白、纤连蛋白、核蛋白，所述特定亚细胞器结构包括但不限于细胞膜、内质网、溶酶体、细胞核、线粒体。4.根据权利要求1所述的金钆复合纳米探针的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：(1)将一定浓度的1
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(3
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二甲氨基丙基)
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乙基碳二亚胺盐酸盐EDC水溶液，加入到蛋白质的水溶液中，室温搅拌使之混合均匀，之后再加入N
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羟基琥珀酰亚胺NHS或N
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羟基硫代琥珀酰亚胺S
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NHS的水溶液，避光继续搅拌2～12小时，得到第一溶液；(2)将一定浓度的多肽分子的水溶液加入到第一溶液中，室温搅拌半小时，之后透析提纯，冷冻干燥保存，得到多肽分子修饰的蛋白分子；(3)在一定浓度的肽蛋白水溶液中加入一定量的一定浓度的氯金酸水溶液和钆无机盐化合物的水溶液，剧烈搅拌使之混合均匀，随后加入一定量的氢氧化钠NaOH水溶液，调节pH至12左右，于37摄氏度环境中继续搅拌5～24小时，透析纯化冷冻干燥后得到金钆复合纳米探针。5.根据权利要求4所述的金钆复合纳...

【专利技术属性】
技术研发人员：王亚玲，陈春英，赵宇亮，
申请(专利权)人：国家纳米科学中心，
类型：发明
国别省市：