白血病检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及白血病检测试剂盒，涉及生物检测和治疗技术领域。该检测试剂盒包含抗MLAA

【技术实现步骤摘要】
白血病检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物检测和治疗
，具体而言，涉及一种白血病检测试剂盒。
技术背景
[0002]急性白血病(acute leukemia，AL)是由于造血干/祖细胞在增殖发育过程中发生了一系列基因的异常改变、于分化过程的不同阶段发生分化阻滞、凋亡障碍和恶性增殖而引起的一组异质性的造血系统恶性肿瘤。疾病发展迅速、凶猛，因此白血病的早期快速确诊与分型对挽救患者生命是十分关键的。但由于白血病属造血干细胞异常的克隆性疾病，具高度异质性、分化差异性大等特点，传统的细胞形态学分型法仅能使70％左右的AL得以准确分型。随着细胞免疫学的深入研究、流式细胞仪的应用以及分子生物学的不断进展，将细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学相结合而形成的现代MICM分型诊断法已成为诊断急性白血病(AL)的重要手段。其中白血病的免疫学分型是利用单克隆抗体检测白血病细胞的细胞膜和细胞浆抗原以分析其表型，了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。
[0003]急性单核细胞白血病(M5)是急性髓性白血病中较常见的类型，病情进展快，预后差。此前由于缺乏M5相关的特异性分子标志物，对于大多数M5患者仅能通过临床特征进行分层和预后判断。现有研究鉴定出具有特异性抗体、阳性率高的M5抗原新基因MLAA
‑
34。
[0004]MLAA
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34是CAB39L基因的新型剪接突变体，编码一个含有337个氨基酸残基的蛋白质，其主要定位于细胞膜和胞膜下。MLAA
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34是一个表达在细胞膜表面的与M5发病及预后相关的新的白血病抗凋亡基因，发挥类似癌基因的功能，可作为M5早期检查和靶向治疗的潜在分子标志物。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种抗MLAA
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34抗体，其可特异性结合MLAA
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34蛋白，具有较高的特异性，可用于通过免疫印迹(Western Blot)、酶联免疫吸附(ELISA)以及流式细胞术(FACS)等手段检测样品中的MLAA
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34蛋白，也可以用于MLAA
‑
34蛋白在细胞中的定性、定量和定位检测。
[0006]本专利技术的另一目的在于提供一种抗MLAA
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34的抗体片段，其具有与上述抗MLAA
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34抗体等同的效果，可特异性结合MLAA
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34蛋白，具有较高的特异性。
[0007]本专利技术的另一目的在于提供上述抗MLAA
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34抗体以及抗MLAA
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34的抗体片段的在检测和治疗中的应用。
[0008]本专利技术的另一目的在于提供上述抗MLAA
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34抗体的制备方法，所制得的抗MLAA
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34抗体效价高，特异性好。
[0009]本专利技术的另一目的在于提供一种检测MLAA
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34蛋白的试剂盒。
[0010]本专利技术提供以下技术方案：
[0011]一种抗MLAA
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34单克隆抗体，其包含轻链可变区，该轻链可变区含有CDR1区、CDR2
区和CDR3区，其中轻链CDR1区、CDR2区和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3、4和5所示；此外还包含重链可变区，该重链可变区含有CDR1区、CDR2区和CDR3区，重链CDR1区、CDR2区和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6、7和8所示。
[0012]在一些实施方案中，本专利技术所述的抗MLAA
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34抗体，其含有重链可变区和轻链可变区，其中，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0013]在一些实施方案中，本专利技术所述的抗MLAA
‑
34抗体包含两条重链和两条轻链，或由两条重链和两条轻链构成，其中各重链包含上述的重链恒定区序列、重链可变区序列或CDR序列，且各轻链包含上述的轻链恒定区序列、轻链可变区序列或CDR序列。本专利技术的抗体可以是全长抗体，所述全长抗体包含恒定区，所述全长抗体轻链恒定区进一步包含鼠源κ、λ链序列。所述全长抗体重链恒定区进一步包含鼠源IgG1、IgG2a、IgG2b或IgG3或IgA或IgM序列。
[0014]在一些实施方案中，本专利技术所述MLAA
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34抗体轻链恒定区进一步优选为κ链。所述抗体重链恒定区进一步优选为IgG1。
[0015]在一些实施方式中，本专利技术的抗MLAA
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34抗体是由上述的抗MLAA
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34抗体或抗体片段形成的Fab片段、Fab'片段、F(ab')2片段、Fv片段、双抗体、线性抗体、单链抗体分子或多特异性抗体。
[0016]在一些实施方式中，本专利技术的抗MLAA
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34抗体在检测生物样品中MLAA
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34蛋白中的应用。
[0017]一种检测MLAA
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34抗蛋白的试剂盒，其含有上述的抗MLAA
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34抗抗体或上述的抗MLAA
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34抗的抗体片段。
[0018]有益效果
[0019]本专利技术的有益效果主要体现在：提供一种新的抗MLAA
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34抗体，其可特异性结合MLAA
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34蛋白，具有较高的特异性，可用于通过免疫印迹(Western Blot)、酶联免疫吸附(ELISA)以及流式细胞术(FACS)等手段检测样品中的MLAA
‑
34蛋白，也可以用于MLAA
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34蛋白在细胞中的定性、定量和定位检测。为急性单核细胞白血病(M5)患者的早期诊断及预后判断、疗效观察提供了一种有效工具。
附图说明
[0020]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。
[0021]图1小鼠单克隆抗体亚型鉴定
[0022]图2抗MLAA
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34抗体特异性鉴定
[0023]图3流式细胞术(FACS)检测样品中的MLAA
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34蛋白
具体实施方式
[0024]以下所述仅为本专利技术的优选实施例而已，并不用于限制本专利技术，对于本领域的技术人员来说，本专利技术可以有各种更改和变化。凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。
[0025]实施例1.抗MLAA
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34抗体制备及鉴定
[0026]用DMEM培养基培养稳定表达MLAA
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34的CHO细胞，将107个CHO
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MLAA
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34
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细胞与弗氏完全佐剂一起注射到雌性Balb/c本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗MLAA
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34单克隆抗体，其包含重链可变区，该重链可变区含有CDR1区、CDR2区和CDR3区，其中重链CDR1区、CDR2区和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3、4和5所示；和轻链可变区，该轻链可变区含有CDR1区、CDR2区和CDR3区，其中轻链CDR1区、CDR2区和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6、7和8所示。2.根据权利要求1所述的抗MLAA
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34抗体，其包含如SEQ ID NO:1所示的重链可变区序列和如SEQ ID NO:2所示的轻链可变区序列。3.根据权利要求1
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2任一项所述的抗MLAA
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34抗体，其特征在于：所述抗体还包含选自鼠源IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG...

【专利技术属性】
技术研发人员：王阳，金鑫，
申请(专利权)人：北京瀚梅生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：