基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法技术

本发明专利技术涉及化妆品制备技术领域，且公开了基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法，包括以下步骤：S1：间充质干细胞的组织成分液获取步骤；S2：向细胞培养工厂中继续加入蛋白培养基P1和含双抗的PBS缓冲液继续进行培养；S3：纤维滤纸或滤膜进行过滤后不沉淀的溶解液，收集至新容器内，为细胞内可溶性的大量粘多糖，脂肪小体等小分子物质的溶液。本发明专利技术中，提供了包含间充质干细胞分泌因子、红景天干细胞提取物、蚯蚓激酶、透明质酸的组合物。提供了高达100余种活性物质。通过透明质酸良好的构架体使其保持良好的吸收状态。酸良好的构架体使其保持良好的吸收状态。

【技术实现步骤摘要】
基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法


[0001]本专利技术涉及化妆品制备
，具体为基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法。

技术介绍

[0002]红景天提取物主要成份为红景天苷和甙元酪醇、络塞维，含苯丙酯类和类黄酮类。经鉴定红景天独特活性化学成分为苯丙酯类,rosavin(活性最强)，rhodiolin，rosarin，rosin，红景天甙和其甙元对酪醇。通过对nk细胞及b细胞免疫的增强作用，具有显著的增强免疫功能，保护心脑血管，尤其是心脑血管组织出现损伤以及异常刺激的情况下，使心脏收缩力的下降被阻止，出现有益的适应性反应。红景天甙可以显著提高色氨酸和5
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羟色氨酸，血清素前体传送入脑的速度，因此具有抗忧郁作用。
[0003]红景天干细胞中高含量的提取物的制作基本原理为：取红景天的幼嫩部位获得形成层，获得复原组织。对复原组织进行培养，分化。获得大量的红景天形成层干细胞。
[0004]为此，我们提出基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法。

技术实现思路

[0005](一)解决的技术问题
[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供了具体为基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法。
[0007](二)技术方案
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法，包括以下步骤：
[0009]S1：间充质干细胞的组织成分液获取步骤；
[0010]S2：向细胞培养工厂中继续加入蛋白培养基P1和含双抗的PBS缓冲液继续进行培养；
[0011]S3：纤维滤纸或滤膜进行过滤后不沉淀的溶解液，收集至新容器内，为细胞内可溶性的大量粘多糖，脂肪小体等小分子物质的溶液；
[0012]S4：间充质干细胞的干细胞分泌因子液获取；
[0013]S5：取设定的间充质干细胞加入到细胞培养工厂中进行培养；
[0014]S6：纤维滤纸或滤膜进行过滤后不沉淀的溶解液，收集至新容器内，经再次灭菌处理，获得物为细胞内可溶性的大量粘多糖，脂肪小体等小分子物质，所制得液体也是间充质干细胞分泌素；
[0015]S7：红景天干细胞以及提取内容物的制备。
[0016]作为优选，所述S1中，取设定的间充质干细胞加入到细胞培养工厂中进行培养，获得目标数量的间充质干细胞，然后用含有双抗的PBS缓冲液反复对细胞培养工厂中的目标间充质干细胞进行清洗，然后将收集的间充质干细胞放置与加入不含丙酮，不含酚红，不含
二甲基亚砜制剂的细胞培养基细胞培养基(无菌蒸馏水1000ml，60％低糖DMEM，40％MCDB201为基础培养源，然后添加(按体积计算)1％～3％胎牛血清、维生素B1(单独灭菌)1μg/ml，维生素B6(单独灭菌)2mg/ml，5～15μg/L碱性成纤维细胞生长因子、10～25μg/L血小板生长因子、5～15μg/L内皮细胞生长因子，5～15μg/L表皮细胞生长因子，0.25～0.5g/L胎盘白蛋白，NaCl(氯化钠)0.5g，完全培养基和含双抗的PBS缓冲液体积比为1∶3～5，总PH值缓冲至7.2土0.2可由碳酸氢钠或磷酸二氢钠调节，)中的新容器内，此时采用酶溶细胞破壁法，在细胞培养基中加入溶壁酶，所需浓度为1
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2％(W/V)，酶解温度为25
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35℃，酶解时间为1
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2小时，用倒置显微镜观察细胞破碎程度，满意后所制得液体为间充质干细胞的组织成分液。
[0017]作为优选，所述S2中，通过蛋白反应测试，达到目标蛋白浓度后，吸取细胞培养工厂中的上清液，放置与新的容器内，在上清液中加入PCFT聚合铁阳离子高分子聚合絮凝剂，使所吸取的上清液中蛋白质发生沉淀，然后将含有沉淀的上清液通过纤维滤纸或滤膜进行过滤，将过滤沉淀的蛋白质转移到半透膜中，用无菌蒸馏水对半透膜中的沉淀物质进行数次清洗，将以蛋白质为主要成分的沉淀从半透膜上收集至新容器中，所制得液体为间充质干细胞的组织成分的蛋白加强培养液。
[0018]作为优选，所述S4中，取设定的间充质干细胞加入到细胞培养工厂中进行培养，获得目标数量的间充质干细胞，然后用含有双抗的PBS缓冲液反复对细胞培养工厂中的目标间充质干细胞进行清洗，移出含间充质干细胞的A液前体后，继续向原有细胞培养工厂中再次添加蛋白培养基P1(P1：无菌蒸馏水1000ml，甘氨酸0.5g，天冬酰胺0.5g，天冬酰胺0.5g，丝氨酸0.5g，苏氨酸0.5g，半胱氨酸0.5g，Na2HPO4(磷酸氢二钠)2.0g，KH2PO4(磷酸二氢钾)3.0g，NaCl(氯化钠)0.5g，NH4Cl(氯化铵)0.5g,葡萄糖(单独灭菌)10.0g，维生素B1(单独灭菌)1μg/ml.)和含双抗的PBS缓冲液，继续进行培养，通过蛋白反应测试，达到目标蛋白浓度后，吸取细胞培养工厂中的上清液，放置与新的容器内，在上清液中加入PCFT聚合铁阳离子高分子聚合絮凝剂，使所吸取的上清液中蛋白质发生沉淀，然后将含有沉淀的上清液通过纤维滤纸或滤膜进行过滤，将过滤沉淀的蛋白质转移到半透膜中，用去离子水对半透膜中的沉淀物质进行数次清洗，将以蛋白质为主要成分的沉淀从半透膜上收集至新容器中，所制得液体为间充质干细胞分泌素。
[0019]作为优选，所述S5中，获得目标数量的间充质干细胞，然后用含有双抗的PBS缓冲液反复对细胞培养工厂中的目标间充质干细胞进行清洗，移出含间充质干细胞的A液前体后，继续向原有细胞培养工厂中再次添加蛋白培养基P2(P2：无菌蒸馏水1000ml，胰蛋白胨5.0g,Na2HPO4(磷酸氢二钠)2.0g，KH2PO4(磷酸二氢钾)3.0g，NaCl(氯化钠)0.5g，NH4Cl(氯化铵)0.5g,葡萄糖(单独灭菌)10.0g，维生素B1(单独灭菌)1μg/ml.)和含双抗的PBS缓冲液，继续进行培养，通过蛋白反应测试，达到目标蛋白浓度后，吸取细胞培养工厂中的上清液，放置与新的容器内，在上清液中加入PCFT聚合铁阳离子高分子聚合絮凝剂，使所吸取的上清液中蛋白质发生沉淀，然后将含有沉淀的上清液通过纤维滤纸或滤膜进行过滤，将过滤沉淀的蛋白质转移到半透膜中，用去离子水对半透膜中的沉淀物质进行数次清洗，将以蛋白质为主要成分的沉淀从半透膜上收集至新容器中，所制得液体也是间充质干细胞分泌素。
[0020]作为优选，所述S7中的具体步骤为：第一步，取春季新鲜挖取的红景天根或根茎，
立即避光、避热、在20℃清洗，医用碘伏浸泡0.5min，立即用无菌蒸馏水清洗干净，5～20％的NaHCO3浸泡3min(7≦PH设定值≦11，10≦最佳PH值≦11)，无菌镊子取出红景天根，无菌滤纸吸干，4℃保存备用，全过程避光、避热，因为热、光以及氧化过程的红景天，内部的有效成分含量大幅度下降，碱化处理可以提高有效成分的稳定性、溶解性；
[0021]第二步，在无菌条件下，在工作台将红景天根切成厚度0.5～2mm的薄片本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：间充质干细胞的组织成分液获取步骤；S2：向细胞培养工厂中继续加入蛋白培养基P1和含双抗的PBS缓冲液继续进行培养；S3：纤维滤纸或滤膜进行过滤后不沉淀的溶解液，收集至新容器内，为细胞内可溶性的大量粘多糖，脂肪小体等小分子物质的溶液；S4：间充质干细胞的干细胞分泌因子液获取；S5：取设定的间充质干细胞加入到细胞培养工厂中进行培养；S6：纤维滤纸或滤膜进行过滤后不沉淀的溶解液，收集至新容器内，经再次灭菌处理，获得物为细胞内可溶性的大量粘多糖，脂肪小体等小分子物质，所制得液体也是间充质干细胞分泌素；S7：红景天干细胞以及提取内容物的制备。2.根据权利要求1所述的基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法，其特征在于，所述S1中，取设定的间充质干细胞加入到细胞培养工厂中进行培养，获得目标数量的间充质干细胞，然后用含有双抗的PBS缓冲液反复对细胞培养工厂中的目标间充质干细胞进行清洗，然后将收集的间充质干细胞放置与加入不含丙酮，不含酚红，不含二甲基亚砜制剂的细胞培养基细胞培养基(无菌蒸馏水1000ml，60％低糖DMEM，40％MCDB201为基础培养源，然后添加(按体积计算)1％～3％胎牛血清、维生素B1(单独灭菌)1μg/ml，维生素B6(单独灭菌)2mg/ml，5～15μg/L碱性成纤维细胞生长因子、10～25μg/L血小板生长因子、5～15μg/L内皮细胞生长因子，5～15μg/L表皮细胞生长因子，0.25～0.5g/L胎盘白蛋白，NaCl(氯化钠)0.5g，完全培养基和含双抗的PBS缓冲液体积比为1∶3～5，总PH值缓冲至7.2土0.2可由碳酸氢钠或磷酸二氢钠调节，)中的新容器内，此时采用酶溶细胞破壁法，在细胞培养基中加入溶壁酶，所需浓度为1
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2％(W/V)，酶解温度为25
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35℃，酶解时间为1
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2小时，用倒置显微镜观察细胞破碎程度，满意后所制得液体为间充质干细胞的组织成分液。3.根据权利要求1所述的基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法，其特征在于，所述S2中，通过蛋白反应测试，达到目标蛋白浓度后，吸取细胞培养工厂中的上清液，放置与新的容器内，在上清液中加入PCFT聚合铁阳离子高分子聚合絮凝剂，使所吸取的上清液中蛋白质发生沉淀，然后将含有沉淀的上清液通过纤维滤纸或滤膜进行过滤，将过滤沉淀的蛋白质转移到半透膜中，用无菌蒸馏水对半透膜中的沉淀物质进行数次清洗，将以蛋白质为主要成分的沉淀从半透膜上收集至新容器中，所制得液体为间充质干细胞的组织成分的蛋白加强培养液。4.根据权利要求1所述的基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法，其特征在于，所述S4中，取设定的间充质干细胞加入到细胞培养工厂中进行培养，获得目标数量的间充质干细胞，然后用含有双抗的PBS缓冲液反复对细胞培养工厂中的目标间充质干细胞进行清洗，移出含间充质干细胞的A液前体后，继续向原有细胞培养工厂中再次添加蛋白培养基P1(P1：无菌蒸馏水1000ml，甘氨酸0.5g，天冬酰胺0.5g，天冬酰胺0.5g，丝氨酸0.5g，苏氨酸0.5g，半胱氨酸0.5g，Na2HPO4(磷酸氢二钠)2.0g，KH2PO4(磷酸二氢钾)3.0g，NaCl(氯化钠)0.5g，NH4Cl(氯化铵)0.5g,葡萄糖(单独灭菌)10.0g，维生素B1(单独灭菌)1μg/ml.)和含双抗的PBS缓冲液，继续进行培养，通过蛋白反应测试，达到目标蛋白浓度后，吸
取细胞培养工厂中的上清液，放置与新的容器内，在上清液中加入PCFT聚合铁阳离子高分子聚合絮凝剂，使所吸取的上清液中蛋白质发生沉淀，然后将含有沉淀的上清液通过纤维滤纸或滤膜进行过滤，将过滤沉淀的蛋白质转移到半透膜中，用去离子水对半透膜中的沉淀物质进行数次清洗，将以蛋白质为主要成分的沉淀从半透膜上收集至新容器中，所制得液体为间充质干细胞分泌素。5.根据权利要求1所述的基于红景天干细胞提取物等组合物的水性化妆品制备方法，其特征在于，所述S5中，获得目标数量的间充质干细胞，然后用含有双抗的PBS缓冲液反复对细胞培养工厂中的目标间充质干细胞进行清洗，移出含间充质干细胞的A液前体后，继续向原有细胞培养工厂中再次添加蛋白培养基P2(P2：无菌蒸馏水1000ml，胰蛋白胨5.0g,Na2HPO4(磷酸氢二钠)2.0g，KH2PO4(磷酸二氢钾)3.0g，NaCl(氯化钠)0.5g，NH4Cl(氯化铵)0.5g,葡萄糖(单独灭菌)10.0g，维生素B1(单独灭菌)1μg/ml.)和含双抗的PBS缓冲液，继续进行培养，通过蛋白反应测试，达到目标...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘哲，
申请(专利权)人：西安美丽起点生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：