一种用于检测HER2基因扩增水平的探针组及其应用制造技术

技术编号:28460850 阅读:65 留言:0更新日期:2021-05-15 21:25
本发明专利技术涉及基因检测技术领域,具体涉及一种用于检测HER2基因扩增水平的探针组及其应用,该探针组由说明书表1所示的核苷酸序列制备得到。在HER2基因的非重复区域,采用多种不同长度的寡核苷酸文库,在使用尽可能少的探针的基础上,增加探针分辨率;其在制备的过程中还采用PCR掺入法,保证产物中含有更多的荧光基团,采用上述探针组用于检测HER2基因的扩增水平,在30分钟内即可完成石蜡组织样本的FISH杂交,敏感性高,特异性强且杂交背景干净、信噪比低。比低。比低。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测HER2基因扩增水平的探针组及其应用


[0001]本专利技术涉及基因检测
,具体涉及一种用于检测HER2基因扩增水平的探针组及其应用。

技术介绍

[0002]表皮生长因子受体(EGFR)通路是影响肿瘤的重要通路,EGFR属于酪氨酸激酶受体家族,主要在上皮组织细胞表面,包括HER1、HER2、HER3和HER4等成员。其中HER2是原癌基因HER2/neu编码的一种分子量为185kD跨膜糖蛋白p185,HER2基因扩增与增加细胞分化、局部及远处转移、迁移、减少细胞凋亡、加快血管发生、肿瘤侵袭、局部及远处转移密切相关。基础研究表明HER2的过量表达可促进肿瘤细胞的转移,一方面通过调节上皮细胞钙黏蛋白等黏附因子的表达来促进迁移,另一方面可启动多种转移机制来加快肿瘤细胞的转移。研究表明,大约25%~30%的浸润性乳腺癌有HER2基因扩增或蛋白过表达,但是具体的表达对比情况还不明确,因此,准确地检测HER2状态不仅能为乳腺癌患者的愈后提供依据,而且是有效治疗乳腺癌的前提。
[0003]荧光原位杂交(FISH)探针指被荧光标记的已本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测HER2基因扩增水平的探针组,其特征在于,该探针组由说明书表1中所示的1245个核苷酸序列制备得到。2.根据权利要求1所述的用于检测HER2基因扩增水平的探针组,其特征在于,该探针组采用权利要求1所述的核苷酸序列,并分别在所述核苷酸序列的两端添加标签序列得到特征性引物,对所述特征性引物其进行PCR扩增得到。3.根据权利要求2所述的用于检测HER2基因扩增水平的探针组,其特征在于,PCR扩增体系中含有Alexa fluor555

dUTP标记的dUTP。4.根据权利要求2或3所述的用于检测HER2基因扩增水平的探针组,其特征在于,5

端标签序列为:TAATACGACTCACTATAGGG;3

端标签序列为:CCGCTGAGCAATAACTAGCA。5.根据权利要求4所述的用于检测HER2基因扩增水平的探针组,其特征在于,PCR扩增产物标记有荧光材料。6.制备权利要求1

5任一项所述的用于检测HER2基因扩增水平的探针组的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,以HER2基因的序列为依据,在不含重复序列的区域分别设计含45个碱基/60个碱基/80个碱基的核苷酸序列,设定探针Tm值为50℃,GC含量范围为40

6...

【专利技术属性】
技术研发人员:祝丹平魏亮肖书圣郭林
申请(专利权)人:武汉友芝友医疗科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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