一种硫酸化修饰青钱柳多糖及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种硫酸化修饰青钱柳多糖及其制备方法和应用，属于修饰多糖技术领域。本发明专利技术在青钱柳多糖中引入硫酸基团，提高了多糖的水溶性；所述硫酸化修饰青钱柳多糖的硫酸化修饰位点为→4)‑α‑D‑Glcp‑(1→C6，而且硫酸化修饰并未破坏多糖的主链，还会去除在酸性和高温条件下不稳定的侧链，提高多糖的稳定性，进而提高多糖的生物活性，降低IC

【技术实现步骤摘要】
一种硫酸化修饰青钱柳多糖及其制备方法和应用
本专利技术涉及修饰多糖
，尤其涉及一种硫酸化修饰青钱柳多糖及其制备方法和应用。
技术介绍
硫酸化修饰能够通过改变多糖结构和构象来改善多糖的多种生物活性，而青钱柳一直是作为保健药物的原材料而备受关注。随着人们对健康的追求渐高，青钱柳多糖的免疫活性被深入挖掘，利用化学方法进一步改善多糖活性成为研究热点。然而，硫酸化青钱柳多糖的一级结构及硫酸化青钱柳多糖抗氧化的作用机理尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种硫酸化修饰青钱柳多糖及其制备方法和应用，所述硫酸化修饰青钱柳多糖为一级结构，具有优异的抗氧化活性。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种硫酸化修饰青钱柳多糖，具有式I所示结构：其中，X+Y＝10，X和Y均不为0且均为正整数；所述→[3)-β-D-Galp-(1]2→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galf-(1→[4)--D-Glcp-(1]X→[4)-α-D-Glcp-(1]Y→为主链；所述α-D-Glcp-1→、α-L-Araf-(1→和α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→为侧链；所述α-D-Glcp-1位于侧链α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→上Galp的C6位点；所述α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→位于主链上对应位置Galp的C4位点；所述α-L-Araf-(1→分别位于主链上对应位置Galp的C6位点、Galf的C6位点和C5位点；所述HSO4-位于主链上对应位置Glcp的C6位点；所述主链的链段相连形成闭环结构；所述硫酸化修饰青钱柳多糖为一级结构。本专利技术提供了上述技术方案所述硫酸化修饰青钱柳多糖的制备方法，包括以下步骤：将青钱柳叶粉末与水混合，进行超声浸提，得到青钱柳多糖；将所述青钱柳多糖的甲酰胺溶液与硫酸化试剂混合，进行硫酸化修饰，得到硫酸化修饰青钱柳多糖；所述硫酸化试剂为氯磺酸和吡啶的混合物，所述氯磺酸和吡啶的体积比为1:6。优选的，所述青钱柳叶粉末的制备过程包括：将青钱柳叶依次进行清洗、第一干燥、粉碎、过筛、脱脂和第二干燥，得到青钱柳叶粉末。优选的，所述青钱柳叶粉末与水的用量比为1:10mL。优选的，所述超声浸提的温度为70～80℃，时间为1～1.5h。优选的，完成所述超声浸提后，还包括将所得产物依次进行第一浓缩、醇沉、透析、第一干燥、纤维素柱吸附、洗脱、第二浓缩和第二干燥，得到青钱柳多糖。优选的，所述醇沉所用试剂为体积分数95％的乙醇。优选的，所述青钱柳多糖的甲酰胺溶液的浓度为10～30mg/mL；所述硫酸化试剂与青钱柳多糖的甲酰胺溶液的体积比为1:2。优选的，所述硫酸化修饰的温度为60℃，时间为2h。本专利技术提供了上述技术方案所述硫酸化修饰青钱柳多糖或上述技术方案所述制备方法制备得到的硫酸化修饰青钱柳多糖在制备抗氧化药物中的应用。本专利技术提供了一种硫酸化修饰青钱柳多糖，本专利技术在青钱柳多糖中引入硫酸基团，提高了多糖的水溶性；所述硫酸化修饰青钱柳多糖的硫酸化修饰位点为→4)-α-D-Glcp-(1→C6，而且硫酸化修饰并未破坏多糖的主链，硫酸基团的引入可以提高多糖提供氢离子的能力，氢离子能够与自由基离子结合形成稳定的络合物以终止自由基链式反应，所以该硫酸化修饰青钱柳多糖具有较好的抗氧化性；同时硫酸化修饰还可以提高青钱柳多糖的水溶性，增大机体利用率，还会去除在酸性和高温条件下不稳定的侧链，提高多糖的稳定性，进而提高多糖的生物活性，降低IC50值，能够提高多糖的使用范围并降低使用量。本专利技术结合硫酸化修饰青钱柳多糖的结构特征，找到对提高抗氧化活性有效的修饰位点，为揭示其构效关系以及硫酸化有效定位修饰提供了理论依据和可能，同时为开发以青钱柳为原料的功能性食品和保健药品提供了理论依据。附图说明图1为实施例1制备的CPP0.05和S-CPP0.05的HPGPC色谱图和单糖组成图；图2为实施例1制备的CPP0.05和S-CPP0.05的FT-IR光谱图；图3为实施例1制备的CPP0.05和S-CPP0.05在不同倍率下的扫描电镜图；图4为实施例1制备的CPP0.05的甲基化色谱分析谱图；图5为实施例1制备的CPP0.05和S-CPP0.05的1HNMR光谱(A,B)、13CNMR光谱(C,D)和Dept135光谱(E)图；图6为实施例1制备的CPP0.05的2D光谱图；图7为实施例1制备的S-CPP0.05的2D光谱图；图8为CPP0.05和S-CPP0.05的抗氧化作用效果图；图9为CPP0.05和S-CPP0.05对H2O2诱导的DCs存活率的影响图及对照图；图10为MDA(A)、SOD(B)和CAT(C)的表达量(与对照组的比值)数据图；图11为Nrf2(A)和Keap1(B)的相对蛋白表达量(与对照组的比值)数据图。具体实施方式本专利技术提供了一种硫酸化修饰青钱柳多糖，具有式I所示结构：其中，X+Y＝10，X和Y均不为0且均为正整数；所述→[3)-β-D-Galp-(1]2→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galf-(1→[4)--D-Glcp-(1]X→[4)-α-D-Glcp-(1]Y→为主链；所述α-D-Glcp-1→、α-L-Araf-(1→和α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→为侧链；所述α-D-Glcp-1位于侧链α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→上Galp的C6位点；所述α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→位于主链上对应位置Galp的C4位点；所述α-L-Araf-(1→分别位于主链上对应位置Galp的C6位点、Galf的C6位点和C5位点；所述HSO4-位于主链上对应位置Glcp的C6位点；所述主链的链段相连形成闭环结构；所述硫酸化修饰青钱柳多糖为一级结构。在本专利技术中，所述硫酸化修饰青钱柳多糖的硫酸化修饰位点为→4)-α-D-Glcp-(1→C6，而且硫酸化修饰并未破坏多糖的主链，但会去除在酸性和高温条件下不稳定的侧链，提高多糖的稳定性，进而提高多糖的生物活性，降低IC50值，能够提高多糖的使用范围并降低使用量。本专利技术提供了上述技术方案所述硫酸化修饰青钱柳多糖的制备方法，包括以下步骤：将青钱柳叶粉末与水混合，进行超声浸提，得到青钱柳多糖；将所述青钱柳多糖的甲酰胺溶液与硫酸化试剂混合，进行硫酸化修饰，得到硫酸化修饰青钱柳多糖；所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种硫酸化修饰青钱柳多糖，其特征在于，具有式I所示结构：/n

【技术特征摘要】
1.一种硫酸化修饰青钱柳多糖，其特征在于，具有式I所示结构：



其中，X+Y＝10，X和Y均不为0且均为正整数；
所述→[3)-β-D-Galp-(1]2→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galf-(1→[4)--D-Glcp-(1]X→[4)-α-D-Glcp-(1]Y→为主链；
所述α-D-Glcp-1→、α-L-Araf-(1→和α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→为侧链；
所述α-D-Glcp-1位于侧链α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→上Galp的C6位点；
所述α-L-Araf-(1→4)-β-D-Galp-(1→位于主链上对应位置Galp的C4位点；
所述α-L-Araf-(1→分别位于主链上对应位置Galp的C6位点、Galf的C6位点和C5位点；
所述HSO4-位于主链上对应位置Glcp的C6位点；
所述主链的链段相连形成闭环结构；
所述硫酸化修饰青钱柳多糖为一级结构。


2.权利要求1所述硫酸化修饰青钱柳多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将青钱柳叶粉末与水混合，进行超声浸提，得到青钱柳多糖；
将所述青钱柳多糖的甲酰胺溶液与硫酸化试剂混合，进行硫酸化修饰，得到硫酸化修饰青钱柳多糖；
所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王文君，韩艺，欧阳克蕙，李景恩，陈凌利，张清峰，赵猛，张阳，
申请(专利权)人：江西农业大学，
类型：发明
国别省市：江西;36