一种梦香文心兰的组织培养方法技术

本申请涉及植物组织培养的技术领域，具体公开了一种梦香文心兰的组织培养方法。包括以下步骤：S1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于酒精中浸泡，捞出后切取茎尖置于诱导培养基中进行诱导培养，得到原球茎；控制培养温度和湿度，诱导培养期间，使用LED光对茎尖照射；S2、将原球茎转入增殖培养基中培养，得到幼芽；控制培养温度和湿度，增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射；S3、将幼芽转入壮苗培养基中培养，直至文心兰幼芽达到6‑8cm长，得到高芽苗；控制培养温度和湿度，壮苗培养期间，使用LED光对幼苗照射。本申请的方法能够提高对文心兰组培的成功率。

【技术实现步骤摘要】
一种梦香文心兰的组织培养方法
本申请涉及植物组织培养的
，更具体地说，它涉及一种梦香文心兰的组织培养方法。
技术介绍
文心兰属兰科文心兰属，又名瘤唇兰属，全属由原生种400多个。它花小而繁多，颜色艳丽多彩，形态变化多样，花朵连续不断开放，可持续1-3个月，是上等的盆栽观赏和切花材料。文心兰传统的分株繁殖速度慢，一年仅2-3个芽，繁殖系数低。通过组培技术，可加快繁殖速度，进行工厂化生产。文心兰组织培养，一方面可以扩大其繁殖系数，从而实现规模化繁殖；另一方面，可以在保持其原有的优良性状的基础上，实现文心兰的种质资源保存和转基因研究等。文心兰组织培养的成本主要包括组培苗生产所需的培养基、设施设备、供电成本、耗材和人工成本。常规的文心兰组织培养方法为，选取文心兰基部萌发的嫩芽作为外植体，用70％酒精进行表面消毒，灭菌后用无菌水洗净，切成1-1.5mm厚的茎尖薄片，接种在准备的培养基上，保持温度在24-28℃之间，光照强度500Lux，照射16h，在MS培养基中添加1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤的培养基上，将形成的原球茎继续在增殖培养基中采用固体培养，20多天后原球茎顶端形成芽，在芽基部分分化根。约100天后，分化出的植株长出叶片，成为完整幼苗。然而常规的文心兰组培方法，对文心兰进行组培的成功率不高，难以大规模加快文心兰的繁育速度。
技术实现思路
为了提高对文心兰组培的成功率，本申请提供一种梦香文心兰的组织培养方法及培养基。本申请提供一种梦香文心兰的组织培养方法，采用如下的技术方案：一种梦香文心兰的组织培养方法，包括以下步骤：S1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于体积比70-75％的酒精中浸泡30-40秒，捞出后切取0.5-1mm的茎尖置于诱导培养基中进行诱导培养25-27天，得到原球茎；控制培养温度25-27℃，湿度70-75％，诱导培养期间，使用LED光对茎尖照射，照射时长10-12小时/天；S2、将原球茎转入增殖培养基中培养28-30天，得到幼芽；控制培养温度25-27℃，湿度75-80％，增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，照射时长14-16小时/天；S3、将幼芽转入壮苗培养基中培养，直至文心兰幼芽达到6-8cm长，得到高芽苗；控制培养温度24-26℃，湿度70-75％，壮苗培养期间，使用LED光对幼苗照射，照射时长14-16小时/天。通过采用上述技术方案，在S1中，将从幼芽上切除的顶芽置于酒精中，以对顶芽进行消毒，减少顶芽携带的细菌等杂质对后续培养造成影响，消毒后切取顶芽上的芽尖进行诱导培养，从而对其进行诱导培养，在诱导培养期间，使用LED光对茎尖进行照射，促进茎尖的培养；在S2中，将S1对茎尖诱导培养出的原球茎转移至增殖培养基中，对原球茎进行增殖培养，在增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，促进原球茎的增殖分化得到幼芽；在S3中，将幼芽转接入壮苗培养基中，使得幼苗在壮苗培养基中生长，直至得到高芽苗，在幼苗的生长期间，使用LED光对幼苗进行照射，促进幼苗的生长。优选的，所述S1中，诱导培养期间，LED光为波长范围625-630nm的红光，且所述红光的光照强度为1400lx。优选的，所述S2中，增殖培养期间，LED光为波长范围460-470nm的蓝光，且所述蓝光的光照强度为1400lx。优选的，所述S3中，壮苗培养期间，LED光为红光和蓝光的混合光，且所述红光的波长为625-630nm，蓝光的波长为450-460nm。优选的，所述S1中，在体积比70-75％的酒精中加入1mol/L的次氯酸钠溶液，且所述酒精和次氯酸钠的体积比为10：(1-2)。通过采用上述技术方案，在酒精中加入次氯酸钠，提高对顶芽的消毒杀菌能力。优选的，所述诱导培养基中包含MS、4.3-5.1mg/L的6-BA、0.1-1mg/L的NAA和50-60mg/L的次氯酸钠。通过采用上述技术方案，次氯酸钠加入诱导培养基中，能够对诱导培养基起到抑菌作用，从而提高幼芽的诱导率。优选的，所述增殖培养基中包含MS、1.3-3.1mg/L的6-BA、0.7-1.2mg/L的NAA和5-10mg/L的乳酸链球菌素。通过采用上述技术方案，乳酸链球菌素加入增殖培养基中，能够对增殖培养起到抑菌作用，从而提高原球茎的增殖率。优选的，所述壮苗培养基中包含MS、0.1-0.5mg/L的6-BA、0.5-0.8mg/L的NAA和50-100mg/L的丙酸钙。通过采用上述技术方案，丙酸钙加入壮苗培养基中，对幼芽生长培养起到抑菌作用，且能够提供钙离子，提高了幼芽的生长率。综上所述，本申请具有以下有益效果：1、由于本申请的方法包括以下步骤：S1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于体积比70-75％的酒精中浸泡30-40秒，捞出后切取0.5-1mm的茎尖置于诱导培养基中进行诱导培养25-27天，得到原球茎；控制培养温度25-27℃，湿度70-75％，诱导培养期间，使用LED光对茎尖照射，照射时长10-12小时/天；S2、将原球茎转入增殖培养基中培养28-30天，得到幼芽；控制培养温度25-27℃，湿度75-80％，增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，照射时长14-16小时/天；S3、将幼芽转入壮苗培养基中培养，直至文心兰幼芽达到6-8cm长，得到高芽苗；控制培养温度24-26℃，湿度70-75％，壮苗培养期间，使用LED光对幼苗照射，照射时长14-16小时/天；在S1中，将从幼芽上切除的顶芽置于酒精中，以对顶芽进行消毒，减少顶芽携带的细菌等杂质对后续培养造成影响，消毒后切取顶芽上的芽尖进行诱导培养，从而对其进行诱导培养，在诱导培养期间，使用LED光对茎尖进行照射，促进茎尖的培养；在S2中，将S1对茎尖诱导培养出的原球茎转移至增殖培养基中，对原球茎进行增殖培养，在增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，促进原球茎的增殖分化得到幼芽；在S3中，将幼芽转接入壮苗培养基中，使得幼苗在壮苗培养基中生长，直至得到高芽苗，在幼苗的生长期间，使用LED光对幼苗进行照射，促进幼苗的生长。具体实施方式以下结合实施例和对比例对本申请作进一步详细说明。实施例实施例1本实施例1中对梦香文心兰的组织培养方法包括以下步骤：S1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于体积比70％的酒精中浸泡40秒，捞出后切取0.5-1mm的茎尖，将茎尖置于培养箱中的诱导培养基内，对茎尖进行诱导培养25天得到原球茎；控制培养箱中的温度为27℃，湿度75％，在诱导培养期间，使用波长范围625-630nm的红光对茎尖进行照射，且红光的光强为1400lx，红光每天照射16小时；诱导培养基包含MS、4.3mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA和50mg/L的次氯酸钠；S2、将原球茎转入培养箱中的增殖培养基中，对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种梦香文心兰的组织培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/nS1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于体积比70-75％的酒精中浸泡30-40秒，捞出后切取0.5-1mm的茎尖置于诱导培养基中进行诱导培养25-27天，得到原球茎；控制培养温度25-27℃，湿度70-75％，诱导培养期间，使用LED光对茎尖照射，照射时长10-12小时/天；/nS2、将原球茎转入增殖培养基中培养28-30天，得到幼芽；控制培养温度25-27℃，湿度75-80％，增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，照射时长14-16小时/天；/nS3、将幼芽转入壮苗培养基中培养，直至文心兰幼芽达到6-8cm长，得到高芽苗；控制培养温度24-26℃，湿度70-75％，壮苗培养期间，使用LED光对幼苗照射，照射时长14-16小时/天。/n

【技术特征摘要】
1.一种梦香文心兰的组织培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
S1、从梦香文心兰母株上切取叶片尚未展开的幼苗，切取顶芽，将顶芽置于体积比70-75％的酒精中浸泡30-40秒，捞出后切取0.5-1mm的茎尖置于诱导培养基中进行诱导培养25-27天，得到原球茎；控制培养温度25-27℃，湿度70-75％，诱导培养期间，使用LED光对茎尖照射，照射时长10-12小时/天；
S2、将原球茎转入增殖培养基中培养28-30天，得到幼芽；控制培养温度25-27℃，湿度75-80％，增殖培养期间，使用LED光对原球茎进行照射，照射时长14-16小时/天；
S3、将幼芽转入壮苗培养基中培养，直至文心兰幼芽达到6-8cm长，得到高芽苗；控制培养温度24-26℃，湿度70-75％，壮苗培养期间，使用LED光对幼苗照射，照射时长14-16小时/天。


2.根据权利要求1所述的一种梦香文心兰的组织培养方法，其特征在于：所述S1中，诱导培养期间，LED光为波长范围625-630nm的红光，且所述红光的光照强度为1400lx。


3.根据权利要求1所述的一种梦香文心兰的组织培养方法，其特征在于：所述S2中，增殖培养期间，LED光为波长范围460-470n...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玉华，樊小燕，樊仲书，樊昌华，
申请(专利权)人：龙岩市禾康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35