一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用技术

本发明专利技术适用于玉米育种技术领域，提供了一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用。利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，包括以下步骤：诱导剂选择；分区；诱导剂处理，包括以下步骤：各区在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂，然后套回纸袋；诱导剂筛选；最优诱导剂处理；收获。本发明专利技术通过对诱导剂的改进来解决试剂使用上的安全问题、花粉污染问题、操作效率问题，在保证安全的同时改进诱导效果，可加快玉米自交系的选育速度，且诱导率高，能保证种质资源遗传的稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用
本专利技术属于玉米育种
，尤其涉及一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用。
技术介绍
玉米自交系选育的常规方法，完成一个自交系选育至少要经过7代以上的连续自交，对于遗传背景复杂的材料甚至要10代以上。为了加快选育速度，传统方法是采用诱导系进行诱导单倍体后加倍或利用秋水仙素等单一化学试剂诱导法。但是诱导系诱导法存在单倍体籽粒难挑选和难加倍等问题，而利用秋水仙素等化学诱导法存在试剂致癌、诱导率偏低、花粉污染、操作速度缓慢以及效率低等问题。
技术实现思路
本专利技术实施例的目的在于提供一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用，旨在解决
技术介绍
中指出的现有技术存在的问题。本专利技术实施例是这样实现的，一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，包括以下步骤：诱导剂选择；分区：田间按照诱导剂数量进行分区；诱导剂处理，包括以下步骤：各区在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂，然后套回纸袋；诱导剂筛选：收获后计算各区的诱导率，得到最优诱导剂；最优诱导剂处理，包括以下步骤：在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入最优诱导剂，然后套回纸袋；收获：成熟时收获果穗，获得基因型纯合的二倍体种子，经下一代鉴定得到纯系。作为本专利技术实施例的另一种优选方案，诱导剂选择中：复方A包括体积比为1：(1～1.2)的氟乐灵与青鲜素；复方B包括体积比为1：(1～1.2)的氟乐灵与戊炔草胺；复方C包括体积比为1：(1～1.2)：(1～1.2)的氟乐灵、青鲜素与戊炔草胺；复方D包括体积比为1：(1～1.2)的青鲜素与戊炔草胺。作为本专利技术实施例的另一种优选方案，设置两组对照，对照A包括氟乐灵，对照B包括秋水仙素。作为本专利技术实施例的另一种优选方案，所述注入诱导剂的300～500倍液1.5～2.5ml。作为本专利技术实施例的另一种优选方案，注入最优诱导剂的300～500倍液1.5～2.5ml。作为本专利技术实施例的另一种优选方案，吐丝3～5天后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝。作为本专利技术实施例的另一种优选方案，所述诱导糯质玉米的最优诱导剂为复方B，诱导率达61.4％。作为本专利技术实施例的另一种优选方案，所述诱导普通玉米的最优诱导剂为复方D，诱导率达57.9％。本专利技术实施例的另一目的在于提供一种所述的育种方法在糯质玉米育种中的应用。本专利技术实施例的另一目的在于提供一种所述的育种方法在普通玉米育种中的应用。本专利技术通过对诱导剂的改进来提高诱导率，可加快玉米自交系的选育速度，且能保证种质资源遗传的稳定性；本专利技术可解决试剂使用上的安全问题、花粉污染问题、操作效率问题，在保证安全的同时改进诱导效果。本专利技术在实际操作过程中可实现全天候作业，操作简单、处理速度快、适合规模化应用，育种成本可大大降低。附图说明图1为实施例1不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图2为实施例2不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图3为实施例3不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图4为实施例4不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图5为实施例5不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图6为实施例6不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图7为实施例7不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图8为实施例8不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图9为实施例9不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。图10为实施例10不同诱导剂处理对玉米诱导株率的影响结果示意图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。以下结合具体实施例对本专利技术的具体实现进行详细描述。实施例1该实施例提供了一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，包括以下步骤：(1)诱导剂选择：复方A包括体积比为1：1的氟乐灵与青鲜素；复方B包括体积比为1：1的氟乐灵与戊炔草胺；复方C包括体积比为1：1：1的氟乐灵、青鲜素与戊炔草胺；复方D包括体积比为1：1的青鲜素与戊炔草胺；设置两组对照，对照A包括氟乐灵，对照B包括秋水仙素；(2)分区：田间按照诱导剂数量进行分区，分成复方A区、复方B区、复方C区、复方D区、对照A区、对照B区；(3)操作处理：各区在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝3天后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂(注入诱导剂的300倍液1.5ml)，然后套回纸袋；(4)诱导剂筛选：收获后计算各区的诱导率，得到诱导糯质玉米和诱导普通玉米的最优诱导剂；(5)最优诱导剂处理：在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝3天后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入最优诱导剂(注入诱导剂的300倍液1.5ml)，然后套回纸袋；(6)收获：成熟时收获果穗，获得基因型纯合的二倍体种子，经下一代鉴定得到纯系。2019年得到278粒糯玉米籽粒，海南加代自交，收获278个果穗，2020年种成穗行，经田间鉴定，淘汰88个穗行，得到190个自交系。实施例2该实施例提供了一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，包括以下步骤：(1)诱导剂选择：复方A包括体积比为1：1.2的氟乐灵与青鲜素；复方B包括体积比为1：1.2的氟乐灵与戊炔草胺；复方C包括体积比为1：1.2：1.2的氟乐灵、青鲜素与戊炔草胺；复方D包括体积比为1：1.2的青鲜素与戊炔草胺；设置两组对照，对照A包括氟乐灵，对照B包括秋水仙素；(2)分区：田间按照诱导剂数量进行分区，分成复方A区、复方B区、复方C区、复方D区、对照A区、对照B区；(3)操作处理：各区在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝5天后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂(注入诱导剂的500倍液2ml)，然后套回纸袋；(4)诱导剂筛选：收获后计算各区的诱导率，得到诱导糯质玉米和诱导普通玉米的最优诱导剂；(5)最优诱导剂处理：在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝5天后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入最优诱导剂(注入诱导剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，其特征在于，包括以下步骤：/n诱导剂选择；/n分区：田间按照诱导剂数量进行分区；/n诱导剂处理，包括以下步骤：各区在吐丝前对玉米雌穗套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂，然后套回纸袋；/n诱导剂筛选：收获后计算各区的诱导率，得到最优诱导剂；/n最优诱导剂处理，包括以下步骤：在吐丝前对玉米雌穗套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入最优诱导剂，然后套回纸袋；/n收获：成熟时收获果穗，获得基因型纯合的二倍体种子，经下一代鉴定得到纯系。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，其特征在于，包括以下步骤：
诱导剂选择；
分区：田间按照诱导剂数量进行分区；
诱导剂处理，包括以下步骤：各区在吐丝前对玉米雌穗套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂，然后套回纸袋；
诱导剂筛选：收获后计算各区的诱导率，得到最优诱导剂；
最优诱导剂处理，包括以下步骤：在吐丝前对玉米雌穗套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入最优诱导剂，然后套回纸袋；
收获：成熟时收获果穗，获得基因型纯合的二倍体种子，经下一代鉴定得到纯系。


2.根据权利要求1所述的利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，其特征在于，诱导剂选择中：
复方A包括体积比为1：(1～1.2)的氟乐灵与青鲜素；
复方B包括体积比为1：(1～1.2)的氟乐灵与戊炔草胺；
复方C包括体积比为1：(1～1.2)：(1～1.2)的氟乐灵、青鲜素与戊炔草胺；
复方D包括体积比为1：(1～1.2)的青鲜素与戊炔草胺。


3.根据权利要求2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓东，李志刚，刘鹏，向殿军，曹霞，张巍巍，姚威港，史铎，
申请(专利权)人：内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15