食品中亚硝酸盐和硝酸盐的定量检测方法技术

本发明专利技术涉及检测不同种类食品中的亚硝酸盐和硝酸盐的方法，本发明专利技术的方法不仅节约时间，且节约成本，同时提高工作效率和检验结果，是一种准确性高的食品中亚硝酸盐和硝酸盐的定量检测方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，属于食品的一种检验方法。
技术介绍
亚硝酸盐和硝酸盐属于食品的一种发色剂，食品在加工生产过程中，食品中的硝酸盐被肠道中的细菌还原成亚硝酸盐，当在人体中的摄入量过多时，使血液中二价铁的红血蛋白变成三价铁的血红蛋白，使人体失去携氧功能而窒息，同时亚硝酸盐还能与胺类化合物形成亚硝胺，具有强烈的致癌作用。在食品检测中将亚硝酸盐和硝酸盐列为强制检验项目。其次，在我国部分地区，由于水质的原因，水中的亚硝酸盐和硝酸盐含量较高，当地人们的身体健康状况受到影响，因此，进行食品中亚硝酸盐和硝酸盐的检验已成为质量安全保证的关注要点。目前在食品中硝酸盐和亚硝酸盐检测的方法有很多种，如定性的液体试剂法和固体试剂法；定量的试剂盒法、极谱法、色谱法、分光光度法等。但每种方法的适用性不同，色谱、分光光度法、极谱法需要配备贵重的检测设备，试剂盒法属于快速法耗材费用较高，不同的检测方法适用范围有限，方法之间交叉太大，寻求一种既经济且准确性高的方法非常有必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种实用性广泛，可以检测不同种类食品中的亚硝酸盐和硝酸盐的方法，本专利技术的方法不仅节约时间，且节约成本，同时提高工作效率和检验结果，是一种准确性高的。本专利技术的检测原理为将样品用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白去脂肪，摇匀，过滤，分别取等体积的滤液，一份滤液在酸性条件下加磺胺和萘乙二胺盐酸盐，在波长538nm处测量，测定样品中本身含有的亚硝酸根(NO2-)，通过换算计算出样品中的亚硝酸盐；另一份滤液通过镉柱，使滤液中的硝酸根离子(NO3-)还原为亚硝酸离子(NO2-)，然后同上进行显色，测量样品中原有的亚硝酸离子(NO2-)和硝酸离子(NO3-)还原生成的亚硝酸离子(NO2-)的总量，由二者之差计算硝酸离子(NO3-)含量，进而计算出样品中的硝酸盐含量。在本专利技术的检测方法中，所用试剂除注明者外，均为分析纯，水为去离子水，不含亚硝酸盐及硝酸盐；饱和硼砂溶液0.25mol/L(即106±0.1g/L)亚铁氰化钾溶液，1mol/L(即220±0.1g/L)乙酸锌溶液。在本专利技术的检测方法中，所用的显色溶液溶液I2g/L的磺胺溶液；溶液II1g/L萘乙二胺盐酸盐溶液，避光贮存，冰箱保存；溶液III盐酸水溶液，其中盐酸∶水为445∶555(体积比)。在本专利技术的检测方法中，使用的盐酸-氨水缓冲溶液为pH 9.60～9.70(其产生的作用，除控制溶液的pH外，还可缓解镉对亚硝酸根的还原)，用精密的pH计调PH值为9.60～9.70；所使用的EDTA溶液为335g/L的二水乙二胺四乙酸二钠(Na2C10H14N2O32H2O)。在本专利技术的检测方法中，使用的仪器设备为分析天平感量0.001g、0.0001g；电热恒温水浴锅温度可调；刮勺末端用聚四氯乙烯包裹；高速组织捣碎机1000-12000r/min；分光光度计；滤纸无亚硝酸离子(NO2-)。在本专利技术的检测方法中，请特别注意对于颜色较深的样品，须经过脱色处理，否则样品本身的颜色影响吸光度的测定；由于镉是有害元素，在处理镉粒时，不要用手直接接触(处理时，可以带上橡胶手套等，可以采用镊子等工具夹取)，同时注意不要弄到皮肤上，一旦接触立即用大量清水冲洗。在本专利技术的检测方法中，其中没有特定提及的物质浓度、所使用物质的体积、容器的体积、所使用的仪器、所使用的时间等一些参数，都是本领域所熟知的，或者属于本领域技术人员按照常规知识可确定的。本专利技术的技术方案包括如下步骤1.样品的制备根据种类不同，在制备样品时略有不同，基本原则都是无论哪种种类，都是将待测样品用捣碎机充分捣碎混匀来制备的1.1.新鲜果蔬先将新鲜水果、蔬菜洗净，凉(就是将水自然沥干)去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，按比例加入一定量水(蕃茄、桔子等多汁样品可不加水)，用高速捣碎机制成均浆，但在称试样时应扣除水量。加水量的比例一般为切碎所得物质重量的1倍或两倍重量，本领域技术人员可以很容易地按照常规技术确定加水量。1.4.冷冻罐头及酱制品罐头及酱制品应全部倒出，制成均浆备用。冷冻制品应先在密闭容器中解冻，混匀，分取一部分备用。1.5.添加果料制品(如果粒酸奶、橙汁等)将待测样品用捣碎机充分捣碎混匀，备用。1.4.乳粉及婴幼儿食品取有代表性样品将其混匀，备用其中代表性样品是指所取样品能够代表整体待测样品的特性及均匀性和样品的一致性，在检测中我们是取小部分检测，用其结果代表整批样品，所以取样要有代表性，这是通常取样的一般性要求。2.样品的分析2.1.制备无色清亮滤液按照试样中亚硝酸盐和硝酸盐含量的大小，准确称取制备的样品(均浆的)10-30g(精确到0.0001g)放入烧杯中，加入5±0.1mL饱和硼砂溶液和100±1mL(70-80℃)热水；置沸水浴中加热15min～20min，并用磁力搅拌器连续搅拌。取出后冷却到室温，再加入10±0.1mL亚铁氰化钾溶液，10±0.1mL乙酸锌溶液和脱色剂，每次加入后均充分摇匀。然后定量转入容量瓶中，用水定容。用滤纸过滤，得到无色清亮滤液。2.2.亚硝酸盐含量的测定用移液管吸取一定量上述无色清亮滤液置于适量容积的容量瓶中，用约三倍的水稀释。加入适量的溶液III和适量的溶液I混匀，置于室温下避光处，再加入适量的溶液II，混匀，5～10min后用水定容，于15min～20min内，在分光光度计上，用1cm光径吸收池，以零管调零，于波长538nm测其吸光度。通过亚硝酸盐标准曲线求出样品的浓度。同时做空白试验，即不加样品，其它步骤同样品检测一致。在该亚硝酸盐含量测定中，优选地，无色清亮滤液∶稀释用水∶溶液III∶溶液I∶溶液II的体积比为20∶60∶6∶5∶2。2.3.硝酸盐含量的测定2.3.1将无色清亮的滤液用过镉柱还原用移液管吸取一定量的无色清亮滤液置于适量容积的容量瓶中，加氨缓冲液，倒入镉柱顶部的贮液杯中，以小于6mL/min的流速过柱。洗提液(过柱后的液体)接入容量瓶中。当贮液杯快要排空时，用水冲洗小烧杯，再倒入贮液杯中。冲洗水流完后，再用水重复一次。当第二次冲洗水快流完时，将贮液杯装满水，以最大流速(即为将硝酸盐还原装置中的止水夹开关打到最大)过柱，得到洗提液。当容量瓶中的洗提液接近容量瓶容积时，取出容量瓶，用水定容，混匀。同时作空白实验，(即用实验用水代替无色清凉滤液，加氨缓溶液进行过柱，得到空白的洗提液)。在该步骤中，无色清亮滤液∶氨缓冲液一般为20∶5，但氨缓溶液可多加，直到与滤液混合后，澄清为止。2.3.2测定移取一定量的洗提液加入于适量容量瓶中，加入适量的溶液III和适量的溶液I混匀，置于室温下避光处，再加入适量的溶液II，混匀，5～10min后用水定容，于15～20min内，在分光光度计上测定，通过亚硝酸盐标准曲线求出样品的浓度。同时做空白试验，即从得到的空白的洗提液中吸取一定量的体积进行显色，进行空白测试。在该步测定中，优选地，洗提液∶溶液III∶溶液I∶溶液II的体积比为20∶6∶5∶2。3.计算亚硝酸盐的含量和硝酸盐含量3.1亚硝酸盐的含量3.1.1样品中 C1-无色清亮滤液的吸光度，通过亚硝酸盐标准曲线的回归方程计算出的NO2-的浓度，μg/mL； m-样品的质量，g；V1-所取无色清亮滤液的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测食品中亚硝酸盐和硝酸盐的定量检测方法，其特征在于，所述方法包括如下三个步骤：（１）．样品的制备；（２）．样品的分析；（３）．计算亚硝酸盐的含量和硝酸盐含量；其中，步骤２样品的分析包括亚硝酸盐含量的测定和硝酸盐含量的测定。

【技术特征摘要】
1.一种检测食品中亚硝酸盐和硝酸盐的定量检测方法，其特征在于，所述方法包括如下三个步骤(1).样品的制备；(2).样品的分析；(3).计算亚硝酸盐的含量和硝酸盐含量；其中，步骤2样品的分析包括亚硝酸盐含量的测定和硝酸盐含量的测定。2.权利要求1的定量检测方法，其特征在于，其中步骤1样品的制备通常无论是种类相同或不同，基本原则都是将待测样品用捣碎机充分捣碎混匀来制备的，具体可分为以下几类1.1.新鲜果蔬先将新鲜水果、蔬菜洗净，凉去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，按比例加入一定量的水-多汁样品可不加水，用高速捣碎机制成均浆，但在称试样时应扣除水量；1.2.冷冻罐头及酱制品罐头及酱制品应全部倒出，制成均浆备用；冷冻制品应先在密闭容器中解冻，混匀，分取一部分备用；1.3.添加果料制品将待测样品用捣碎机充分捣碎混匀；1.4.乳粉及婴幼儿食品取有代表性样品将其混匀，备用。3.权利要求1的定量检测方法，其特征在于，其中步骤2样品的分析包括如下步骤2.1.制备无色清亮滤液按照试样中亚硝酸盐和硝酸盐含量的大小，准确称取制备的样品10-30g放入烧杯中，加入5±0.1mL饱和硼砂溶液和100±1mL热水；置沸水浴中加热，并用磁力搅拌器连续搅拌，取出后冷却到室温，再加入10±0.1mL亚铁氰化钾溶液，10±0.1mL乙酸锌溶液和脱色剂，每次加入后均充分摇匀，然后定量转入容量瓶中，用水定容，用滤纸过滤，得到无色清亮滤液；2.2.亚硝酸盐含量的测定用移液管吸取一定量上述无色清亮滤液置于适量容积的容量瓶中，用水稀释；加入适量的溶液III和适量的溶液I混匀，置于室温下避光处，再加入适量的溶液II，混匀，用水定容，于15min～20min内，在分光光度计上，于波长538nm测其吸光度；通过亚硝酸盐标准曲线求出样品的浓度；同时做空白试验，即不加样品，其它步骤同样品检测一致；在该亚硝酸盐含量测定中，无色清亮滤液∶稀释用水∶溶液III∶溶液I∶溶液II的体积比为20∶60∶6∶5∶2；2.3.硝酸盐含量的测定2.3.1将无色清亮的滤液用过镉柱还原用移液管吸取一定量的无色清亮滤液置于适量容积的容量瓶中，加氨缓冲液，倒入镉柱顶部的贮液杯中，以小于6mL/min的流速过柱；洗提液-过柱后的液体接入容量瓶中；当贮液杯快要排空时，用水冲洗小烧杯，再倒入贮液杯中；冲洗水流完后，再用水重复一次；当第二次冲洗水快流完时，将贮液杯装满水，以最大流速过柱，得到洗提液；当容量瓶中的洗提液接近容量瓶容积时，取出容量瓶，用水定容，混匀；同时作空白实验；在该步骤中，无色清亮滤液∶氨缓冲液一般为20∶5，但氨缓溶液可多加，直到与滤液混合后，澄清...

【专利技术属性】
技术研发人员：张秀梅，李翠枝，
申请(专利权)人：内蒙古伊利实业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：15[中国|内蒙]