粉红粘帚霉、粉红粘帚霉菌液及在防治向日葵菌核病害中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种粉红粘帚霉、粉红粘帚霉菌液及在防治向日葵菌核病害中的应用。本发明专利技术采用的粉红粘帚霉MES72701，保藏单位名称：中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号：CGMCC 3.11519；本发明专利技术提供了一种粉红粘帚霉菌液，其中粉红粘帚霉孢子含量为1.8×10

【技术实现步骤摘要】
粉红粘帚霉、粉红粘帚霉菌液及在防治向日葵菌核病害中的应用
本专利技术属于植物病害生物防治
，具体涉及一种粉红粘帚霉、粉红粘帚霉菌液及在防治向日葵菌核病害中的应用。
技术介绍
向日葵是我国重要的油料作物，近年来我国向日葵产区受向日葵菌核病危害大，严重的甚至造成向日葵绝产绝收。影响向日葵产量及品质提升，阻碍向日葵产业的发展。向日葵菌核病(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)称核盘菌，属子囊菌亚门真菌。病菌以菌核在土壤内、病残体中及种子间越冬。病原菌在0-37℃温度范围内均能生长，生长最适温度为25℃。向日葵菌核病在整个生育期均可发病，造成茎杆、茎基、花盘及种仁腐烂。常见的有根腐型、茎腐型、叶腐型及花腐型4种症状，其中根腐型、花腐型受害严重。春季低温、多雨茎腐重，花期多雨盘腐重。连作田土壤中菌核量大，病害重。常规防治方法采用轮作、种植抗病品种、清除烧毁田间病残体的方式进行预防及病菌扩散以及采用腐霉利、菌核净等化学农药拌种、花期喷洒纹枯利或农利灵等方法防治病害的发生。通常这些操作较为繁琐且化学农药会造成农药残留等问题，影响向日葵产量和品质的提升，化学防治会造成环境污染，不符合绿色可持续性发展的道路和方向。微生物能有效防治植物病害的发生，同时利用拮抗微生物进行植物病害的防治符合绿色防控的发展方向。因此，采用何种微生物来有效防治向日葵菌核病，是需要解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种粉红粘帚霉、粉红粘帚霉菌液及在防治向日葵菌核病害中的应用。本专利技术提供的粉红粘帚霉菌液对引起向日葵菌核病菌的核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)拮抗效果明显，能防止或减轻向日葵菌核病的发生，促进向日葵稳产、增收，改善和提高向日葵的产量和品质。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了粉红粘帚霉在防治向日葵菌核病害中的应用。申请人经检索，目前未见有采用粉红粘帚霉(Clonostachysrosea)防治向日葵病的相关道，本专利技术创造性的将粉红粘帚霉用于防治向日葵菌核病，防效明显，并且绿色环保，能降低农药使用量及提高农产品的产量和质量，其大面积推广使用的前景十分广阔。作为上述方案的进一步改进：优选的，粉红粘帚霉为粉红粘帚霉(Clonostachysrosea)MES72701，保藏单位名称：中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号：CGMCC3.11519，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本专利技术采用的该株粉红粘帚霉MES72701是2019年12月从中国普通微生物保藏管理中心(CGMCC)购买获得，活化培养后在4℃和-80℃冰箱保藏。粉红粘帚霉为半知菌门，丝孢纲，丛梗孢目，丛梗孢科，粘帚霉属，粉红粘帚霉。在PDA平板上，菌丝初为白色疏松的匍匐菌丝，气生菌丝不发达，后菌丝变成粉红色，菌落底部有橙红色色素产生。本专利技术提供了一种粉红粘帚霉菌液，其中活性成分包括上述粉红粘帚霉。优选的，粉红粘帚霉菌液中粉红粘帚霉孢子含量为1.8×107个/mL-2.3×107个/mL。本专利技术提供了上述粉红粘帚霉菌液在防治向日葵菌核病害中的应用。本专利技术提供了一种粉红粘帚霉菌液的制备方法，包括步骤：挑取经活化培养的粉红粘帚霉新鲜菌丝，接种到含固体PDA培养基的平皿上，然后放置在25℃-30℃恒温培养箱内，培养12-16天；之后在培养皿内加入20-30mL含吐温80的无菌水，用涂布器将孢子洗下，并过滤，进行8-12倍梯度稀释。本专利技术在接种时，接种至少3个平皿。优选的，固体PDA培养基配方包括：葡萄糖20g/L，马铃薯200g/L，琼脂19g/L，水1000mL；含吐温80的无菌水中，吐温80的质量浓度为0.02％-0.08％；过滤是采用纱布进行，纱布的层数为四层。本专利技术采用的固体PDA培养基的pH值不需要进行调节，按上述比例配制完成即可；PDA培养基的配置方法参考常规马铃薯葡萄糖培养基的配制即可。本专利技术提供了根据上述方法制备得到的粉红粘帚霉菌液。本专利技术提供了上述粉红粘帚霉菌液在防治向日葵菌核病害中的应用。本专利技术提供的粉红粘帚霉菌液在防治向日葵菌核病害中的应用方法包括步骤：将粉红粘帚霉菌液按照1：(1-5)的比例用水稀释，之后均匀浇在植物根部。本专利技术提供的技术方案，具有如下的有益效果：(1)本专利技术提供的粉红粘帚霉、粉红粘帚霉菌液对引起向日葵菌核病菌的核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)拮抗效果明显，能防止或减轻向日葵菌核病的发生，促进向日葵稳产、增收，改善和提高向日葵的产量和品质；(2)将本专利技术提供的粉红粘帚霉菌液进行苗期盆栽防治向日葵菌核病，防治效果达80％以上，防效明显，并且属于绿色环保制剂、能降低农药使用量及提高农产品的产量和质量，其大面积推广使用的前景十分广阔。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明图1为本专利技术实施例2中粉红粘帚霉拮抗向日葵菌核病菌效果图；图2为本专利技术实施例2中的仅接种向日葵菌核病对照效果图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例的技术方案进行清楚、完整地描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本专利技术的技术方案，因此只是作为示例，而不能以此来限制本专利技术的保护范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。本专利技术涉及的菌株来源具体如下：(1)本专利技术使用的向日葵菌核病菌是申请人从内蒙古赤峰发病田块菌核上分离纯化获得的，经16SrDNA鉴定为向日葵菌核病(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)；(2)本专利技术使用的粉红粘帚霉(Clonostachysrosea)MES72701是2019年12月从中国普通微生物保藏管理中心(CGMCC)购买获得，保藏单位名称：中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号：CGMCC3.11519，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。活化培养后在4℃和-80℃冰箱保藏。实施例1：粉红粘帚霉MES72701菌液的制备本实施例提供一种粉红粘帚霉MES72701菌液的制备方法，包括如下步骤。1、接种及培养挑取经活化培养的MES72701新鲜菌丝，接种到固体PDA培养基上，接种3个平皿，然后放置在28℃恒温培养箱内，培养15天。PDA培养基配方为：葡萄糖20g/L，马铃薯200g/L，琼脂19g/L，水1000mL，自然pH；PDA培养基的配置方法参考常规马铃薯葡萄糖培养基的配制。2、孢子液的制备15天后，在每个培养皿内加入25mL的无菌水中(含有0.05％的吐温80)，用涂布器将孢子洗下，并用四层纱布过滤，进行10倍梯度稀释。3、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.粉红粘帚霉在防治向日葵菌核病害中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.粉红粘帚霉在防治向日葵菌核病害中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述粉红粘帚霉为粉红粘帚霉MES72701，保藏单位名称：中国普通微生物保藏管理中心，保藏编号：CGMCC3.11519。


3.一种粉红粘帚霉菌液，其特征在于：包括权利要求1或2所述的粉红粘帚霉。


4.根据权利要求3所述的粉红粘帚霉菌液，其特征在于：粉红粘帚霉孢子含量为1.8×107个/mL-2.3×107个/mL。


5.权利要求3所述的粉红粘帚霉菌液在防治向日葵菌核病害中的应用。


6.一种粉红粘帚霉菌液的制备方法，其特征在于，包括步骤：挑取经活化培养的粉红粘帚霉新鲜菌丝，接种到含固体PDA培养基的平皿上，然后放置在25℃-30℃恒温培...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾欣燕，肖培英，赵晓琛，李立培，刘刚，
申请(专利权)人：天津开发区坤禾生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12