一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂及制备方法，该复合添加剂由益生菌、酶制剂和益生元组成。本发明专利技术复合添加剂按照500g/t添加到仔猪饲料中，可有效替代仔猪日粮抗生素的使用。添加本发明专利技术复合添加剂的仔猪无抗饲料，与基础日粮相比，能够提高仔猪日均采食量和日增重，降低腹泻率和料肉比，生长性能和抗生素组基本一致，且本发明专利技术具有良好的经济效益和使用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂及制备方法
本专利技术属于饲料添加剂
，具体涉及一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂及制备方法。
技术介绍
农业农村部194号公告，至2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中草药除外)的商品饲料，至此，养殖行业进入饲料无抗时代。但抗生素的禁用，将带来畜禽养殖过程中动物生产性能下降、患病率增加、养殖成本抬高和效益下滑等问题，将给国内养殖企业造成较大的经济损失和技术难度。如何在不使用抗生素的养殖环境下规避上述损失已成为畜禽养殖业迫切需要解决的问题。具有潜在替抗可能的产品包括酸化剂、益生菌、益生元、酶制剂、植物精油和发酵类产物等，据饲料协会调查报告结果显示：饲料添加剂益生菌、酶制剂和益生元替代抗生素分别有70％、68％和53％的有效性。其中微生态制剂是现在替抗产品中最火热的之一，对于改善动物肠道菌群，提高动物机体健康以及免疫水平方面都有很好的效果，从而起到“以菌治菌”的作用。酶制剂经历了多年的使用和推广，应用已经非常普遍，其作用机理在于补充内源酶的不足，提高内源酶消化活性；破坏植物细胞壁，提高饲料养分消化率；降低肠道食糜粘度，减少畜禽后肠道有害微生物的繁殖；改变肠壁结构，提高养分吸收能力，在替抗类产品中是不可或缺的。益生元负责选择性地改变肠道微生物菌群的组成和代谢，能够增加双歧杆菌和其他对宿主健康有积极影响的菌种数量，通过培养内生性的益生菌来发挥微生态调理的功效。但替抗问题的解决不能简单化，一种产品并不能解决抗生素弃用所遗留下来的所有问题，替抗产品复合化、综合化势在必行。有效的配伍复方，合理的产品搭配、科学的组合方案是成功替代抗生素的关键。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在提供一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂及制备方法，以解决抗生素禁用后，仔猪养殖过程中生产性能下降、患病率增加、养殖成本抬高和效益下滑等问题。为达到上述技术目的，本专利技术具体通过以下技术方案实现：一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂，包括益生菌、酶制剂和益生元，所述的益生菌包括50×108CFU/g枯草芽孢杆菌(BacillussubtilisCICC24675)和50×108CFU/g地衣芽孢杆菌(BacilluslicheniformisCICC20446)；所述的述酶制剂包括：10000U/g木聚糖酶、500U/g淀粉酶和1000U/g葡萄糖氧化酶；所述的益生元为质量分数15％的魔芋低聚甘露寡糖。所述益生菌的制备：将枯草芽孢杆菌(BacillussubtilisCICC24675)和地衣芽孢杆菌(BacilluslicheniformisCICC20446)菌种进行活化，待活化后菌种进行一级、二级发酵罐扩大培养后，转接三级发酵培养罐中，进行48小时发酵培养，待菌株形成95％以上的芽孢后，培养液进行喷雾干燥，形成枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌饲用益生菌半成品。所述酶制剂的制备：木聚糖酶、淀粉酶和葡萄糖氧化酶分别活化后进行一级、二级种子液扩大培养，待OD值达到一定时，转接到三级发酵培养罐中，采用甲醇流加的方式进行诱导产酶，待酶活力达到最大值时，对发酵酶液进行喷雾干燥处理，制备成饲用木聚糖酶、淀粉酶和葡萄糖氧化酶半成品。所述益生元的制备：用β-甘露聚糖酶酶解魔芋精粉，对酶解后的粗纤维过滤截留，获得魔芋甘露寡糖的粗滤液，去除寡糖液中的淀粉、粗纤维颗粒和残渣，经超滤和纳滤膜提纯浓缩后，通过喷雾干燥塔进行喷雾干燥，获得魔芋低聚甘露寡糖。本专利技术复合添加剂在使用时，按照500g/t添加在仔猪饲粮中，与基础日粮相比，能够提高仔猪日均采食量和日增重，降低腹泻率和料肉比，生长性能和抗生素组基本一致，可替代抗生素的使用。本专利技术的有益效果为：在仔猪饲粮中添加500g/t的该专利技术酶菌元复合饲料添加剂，能够替代原有饲料中的复合抗生素的添加，大大减少了抗生素滥用带来的环境污染等问题。且能够有效的提高仔猪平均日采食量和平均日增重，降低料肉比和腹泻率，增加养殖效益。附图说明图1是本专利技术仔猪生长性能；图2是本专利技术仔猪腹泻率。具体实施方式下面将结合本专利技术具体的实施例，对本专利技术技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1饲用益生菌的制备(1)菌种活化本专利技术实施例所用益生菌购自微生物保藏中心，枯草芽孢杆菌(BacillussubtilisCICC24675)和地衣芽孢杆菌(BacilluslicheniformisCICC20446)。枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌活化培养基采用LB，配方为：酵母膏0.5％、胰蛋白胨1％、氯化钠1％，固体培养基加琼脂2％。将菌株接种到平板培养基上，37℃条件下培养24小时，获得活化菌种；(2)发酵培养将(1)活化的菌种，分别接种到液体LB培养基中，制备2L的摇瓶种子，进而转接到50L和400L的一、二级发酵罐中，培养12小时。分别转接到三级10T发酵培养基中。发酵培养基配方为：葡萄糖1％、玉米粉1.5％、酵母粉1％、黄豆粉2.5％、柠檬酸钠0.45％、碳酸钙0.015％、硫酸镁0.002％，在37℃条件下培养48h，待芽孢率达到95％以上即可放罐。(3)益生菌半成品制备将(2)发酵液中加入20％的淀粉，经喷雾干燥塔进行喷雾干燥，所得喷雾干粉进行计数，测定含量。枯草芽孢杆菌(BacillussubtilisCICC24675)有效活菌数可达300×108CFU/g，地衣芽孢杆菌(BacilluslicheniformisCICC20446)有效活菌数可达500×108CFU/g。实施例2饲用酶制剂的制备本专利技术实施例所用酶制剂异源表达宿主菌均有本实验室完成构建。(1)种子液制备于超净工作台挑取饲用酶制剂毕赤酵母宿主菌单菌落，在平板上进行三区划线，活化菌种。待长出单菌落后，挑取单菌落接种于200mLYEPD培养基中，酵母膏1％、蛋白胨2％、葡萄糖2％，在30℃，250rpm培养36～38h，直至湿细胞重量达到30g/L。分别使用50升和500升发酵罐进行种子扩大培养，培养基配方为酵母膏1％、蛋白胨2％、甘油2％，30℃，350rpm，添加20％(w/v)氨溶液调节pH≈4.5的条件下发酵，发酵约24小时，直至湿细胞重量达到OD600>30。(2)产酶发酵高密度发酵培养基：每升发酵培养基均包含40mL甘油，5.0mLH2SO4和基础盐培养基(26.7mL85％H3PO4、0.93gCaSO4、18.2gK2SO4、14.9gMgSO4·7H2O，4.13gKOH)，微量矿物混合物(6.0gCuSO4·5H2O，0.08gNaI，3.0gMnSO4·H2O，0.2gNa2MoO4·2H2O，0.02gH本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂，其特征在于，包括：50×10

【技术特征摘要】
1.一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂，其特征在于，包括：50×108CFU/g枯草芽孢杆菌，50×108CFU/g地衣芽孢杆菌，10000U/g木聚糖酶，500U/g淀粉酶，1000U/g葡萄糖氧化酶，质量分数15％的魔芋低聚甘露寡糖。


2.根据权利要求1所述的一种富含酶菌元仔猪替抗饲料复合添加剂，其特征在于，所述的复合添加剂添加量为500g/t。


3.权利要求1所述复合添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：<...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄遵锡，苗华彪，韩楠玉，唐湘华，张呈波，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：云南;53