一种载物玻璃器皿、荧光显微成像装置及使用方法制造方法及图纸

本发明专利技术涉及显微成像技术领域，公开了一种载物玻璃器皿、荧光显微成像装置及使用方法，其中载物玻璃器皿包括：本体，具有用于对待观察样品进行承载的载物面；至少一个荧光标记物，设置在载物面上，荧光标记物的荧光激发波长和发射波长与待观察样品中的荧光物质的激发波长和发射波长不同。通过设置荧光标记物，使得在对样品进行观察时有一个参照标准，便于快速寻找之前观察的感兴趣区域。同时，将荧光标记物的激发波长和发射波长设置成样品中的荧光物质的特性不同，以形成对比，避免影响实验的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种载物玻璃器皿、荧光显微成像装置及使用方法
本专利技术涉及显微成像
，具体为一种载物玻璃器皿、荧光显微成像装置及使用方法。
技术介绍
细胞或组织切片荧光成像实验中，需要将样品放置在荧光成像装置上进行对感兴趣的位置进行观察并利用成像装置显示荧光图像，另外还可以利用摄像装置进行拍照以便于科研论文使用。部分荧光成像实验可能需要对样品处理前后的相同位置进行观察。但是现有传统的荧光成像实验中，细胞或组织切片等样品观察时需要放置在透明的玻璃载物器皿上，然后再将放有样品的透明的玻璃载物器皿固定到载物台上，选定合适的放大倍数，通过粗调机构和细调机构不断调节载物台，以便在放大视野中找到需要观察的位置。现有传统的载物玻璃器皿为一块透明的载玻片或者一个透明的共聚焦皿，将样品培养在共聚焦皿上或者将组织切片固定在载玻片上以便于在荧光成像装置上进行观察。处理前，将样品放置在荧光显微成像装置下，找到感兴趣的位置观察，之后在荧光显微成像装置外对样品进行相应的处理工序后，完成处理后再次将样品放置在荧光显微成像装置下对之前感兴趣的位置观察进行再次观察，此时由于没有任何可供参考的标记，导致观察比较费时费力，而且寻找的成功率也比较低。现有传统的做法会采用对样品进行侵入式的标记，比如将载物玻璃器皿中样品需要观察位置的细胞群体进行破坏，使之形成无细胞的空白标记，以便于在荧光显微成像装置下进行寻找，但是这种标记方式容易造成整个样品污染，破坏样品状态，进而影响到实验结果的准确性，而且由于实验处理需要长时间孵育，空白标记位置可能会再次长满细胞，导致寻找不易。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服现有技术中的传统的荧光显微成像装置在细胞荧光成像实验中，当需要观察处理前后相同位置时，由于缺乏标记物，操作费时费力且成功率较低的技术问题，从而提供一种带有标记物的载物玻璃器皿、具有该载物玻璃器皿的荧光显微成像装置及该荧光显微成像装置的使用方法。为此，本专利技术的其中一个目的在于提供一种载物玻璃器皿，包括：本体，具有用于对待观察样品进行承载的载物面；至少一个荧光标记物，设置在所述载物面上，所述荧光标记物的荧光激发波长和发射波长与待观察样品中的荧光物质的激发波长和发射波长不同。可选的，所述的载物玻璃器皿，所述荧光标记物至少包括两条呈十字型相交的荧光标记部且两条所述荧光标记部的荧光物质在同一激发光下的发射波长不同。可选的，所述的载物玻璃器皿，所述荧光标记物呈正交叉的十字型或者米字型。可选的，所述的载物玻璃器皿，所述荧光标记物适于固定在所述载物面的几何中心位置。可选的，所述的载物玻璃器皿，所述荧光标记物包括多个，多个所述荧光标记物呈规律性排布。可选的，所述的载物玻璃器皿，所述荧光标记物为一面设有荧光的薄膜荧光贴纸，设有所述荧光的一面粘贴在所述载物面上；或在所述载物面对侧的定位面设有由所述定位面朝向所述载物面方向凹陷的插槽，所述荧光标记物插置固定在所述插槽内。本专利技术的另一个目的在于提供一种荧光显微成像装置，包括：激发光模块，用于产生作为激发光的激光束；电控载物台，包括操作台、可受所述操作台控制在水平面移动的载物台和安装在所述载物台上的可受所述操作台控制以相对于所述载物台转动的旋转模块，所述操作台可显示所述载物台的平面位移量及所述旋转模块的旋转角度；载物玻璃器皿，所述载物玻璃器皿为上述任一项所述的载物玻璃器皿，固定在所述旋转模块上并与所述旋转模块随动，用于放置待观察样品，所述激光束聚焦在所述载物玻璃器皿上的荧光标记物和所述待观察样品上；图像采集模块，适于采集上述荧光标记物和待观察样品分别被所述激光束激发而转换生成的荧光图像；计算机，与所述图像采集模块连接，用于显示所述荧光图像。可选的，所述的荧光显微成像装置，所述旋转模块包括：旋转件，安装在所述载物台上，所述旋转件上安装有用于固定和移动所述载物玻璃器皿的推片器结构；旋转控制件，与所述操作台及所述旋转件电连接，适于受所述操作台控制以驱动所述旋转件旋转。可选的，所述的荧光显微成像装置，所述载物台的平面位移量及所述旋转模块的旋转角度可以显示在操作台的显示屏幕上或者显示在计算机的软件界面上。本专利技术的还有一个目的在于提供一种荧光显微成像装置的使用方法，包括以下步骤：S1.将待观察样品固定在电控载物台的旋转模块上；S2.在相应放大倍数的视野中找到载物玻璃器皿上的荧光标记物，判断视野中荧光标记物是否与显示屏幕或成像软件界面的标准十字匹配，若不匹配，通过操作台调整电控载物台的水平位移量和旋转角度，使得荧光标记物与标准十字重合匹配，之后将此刻显示的电控载物台的位移量和旋转角度进行调零以标定原点位置；S3.调节电控载物台并在视野中找到待观察样品的目标观察区域，记录此时显示的位移量和旋转角度；S4.取下待观察样品进行相应处理，再次放入电控载物台上的载物玻璃器皿上，重复上述步骤S2并根据步骤S3记录的位移量和旋转角度调节电控载物台再次找到处理前观察的区域，进行再次观察。本专利技术技术方案，具有如下优点：1.本专利技术的载物玻璃器皿，包括：本体，具有用于对待观察样品进行承载的载物面；至少一个荧光标记物，设置在所述载物面上，所述荧光标记物的荧光激发波长和发射波长与待观察样品中的荧光物质的激发波长和发射波长不同。通过设置荧光标记物，使得在对样品进行观察时有一个参照标准，便于快速寻找之前观察的感兴趣区域。同时，将荧光标记物的激发波长和发射波长设置成样品中的荧光物质的特性不同，以形成对比，避免影响实验的准确性。2.本专利技术的载物玻璃器皿，所述荧光标记物至少包括两条呈十字型相交的荧光标记部且两条所述荧光标记部的荧光物质在同一激发光下的发射波长不同。以便于能够准确的确定水平面坐标的X向和Y向的方向，避免了再次观察时无法确定方向的问题。3.本专利技术的荧光显微成像装置，包括激发光模块，用于产生作为激发光的激光束；电控载物台，包括操作台、可受所述操作台控制在水平面移动的载物台和安装在所述载物台上的可受所述操作台控制以相对于所述载物台转动的旋转模块，所述操作台可显示所述载物台的平面位移量及所述旋转模块的旋转角度；载物玻璃器皿，所述载物玻璃器皿为上述任一项所述的载物玻璃器皿，固定在所述旋转模块上并与所述旋转模块随动，用于放置待观察样品，所述激光束聚焦在所述载物玻璃器皿上的荧光标记物和所述待观察样品上；图像采集模块，适于采集上述荧光标记物和待观察样品分别被所述激光束激发而转换生成的荧光图像；计算机，与所述图像采集模块连接，用于显示所述荧光图像。由于具备了上述的具有荧光标记物的载物玻璃器皿，在进行细胞实验观察时，可以该荧光标记物进行原点的标定。通过将载物台设置成可水平移动，搭配旋转模块，使得放置在载物台上的载物玻璃器皿内的待观察样品能够在水平面移动和旋转，通过操作台进行操作并显示水平位移量和旋转角度，以便于在进行再次观察时，可以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种载物玻璃器皿，其特征在于，包括：/n本体(1)，具有用于对待观察样品进行承载的载物面(10)；/n至少一个荧光标记物(11)，设置在所述载物面(10)上，所述荧光标记物(11)的荧光激发波长和发射波长与待观察样品中的荧光物质的激发波长和发射波长不同。/n

【技术特征摘要】
1.一种载物玻璃器皿，其特征在于，包括：
本体(1)，具有用于对待观察样品进行承载的载物面(10)；
至少一个荧光标记物(11)，设置在所述载物面(10)上，所述荧光标记物(11)的荧光激发波长和发射波长与待观察样品中的荧光物质的激发波长和发射波长不同。


2.根据权利要求1所述的一种载物玻璃器皿，其特征在于，所述荧光标记物(11)至少包括两条呈十字型相交的荧光标记部且两条所述荧光标记部的荧光物质在同一激发光下的发射波长不同。


3.根据权利要求1或2所述的一种载物玻璃器皿，其特征在于，所述荧光标记物(11)呈正交叉的十字型或者米字型。


4.根据权利要求1-3任一项所述的一种载物玻璃器皿，其特征在于，所述荧光标记物(11)适于固定在所述载物面(10)的几何中心位置。


5.根据权利要求1所述的一种载物玻璃器皿，其特征在于，所述荧光标记物(11)包括多个，多个所述荧光标记物(11)呈规律性排布。


6.根据权利要求1-5任一项所述的一种载物玻璃器皿，其特征在于，所述荧光标记物(11)为一面设有荧光的薄膜荧光贴纸，设有所述荧光的一面粘贴在所述载物面(10)上；或
在所述载物面(10)对侧的定位面设有由所述定位面朝向所述载物面(10)方向凹陷的插槽，所述荧光标记物(11)插置固定在所述插槽内。


7.一种荧光显微成像装置，其特征在于，包括：
激发光模块，用于产生作为激发光的激光束；
电控载物台(2)，包括操作台(5)、可受所述操作台(5)控制在水平面移动的载物台(2)和安装在所述载物台(2)上的可受所述操作台(5)控制以相对于所述载物台(2)转动的旋转模块(3)，所述操作台(5)可显示所述载物台(2)的平面位移量及所述旋转模块(3)的旋转角度；
载物玻璃器皿，所述载物玻璃器皿为权利要求1-6任一项所述的载...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭晓，彭政，刘浩，宋一纨，于德良，袁玉峰，聂凯旋，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：广东;44