一种羟苯水杨胺羟基化物、制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及羟苯水杨胺羟基化物，所述羟苯水杨胺羟基化物可通过抑制RR酶而抑制乙肝病毒DNA复制，本发明专利技术还介绍了羟苯水杨胺羟基化物的制备方法，有助于解决目前对RR酶具有抑制作用的药物分子仍然比较少见的技术问题。

【技术实现步骤摘要】
一种羟苯水杨胺羟基化物、制备方法及其应用
本专利技术涉及羟苯水杨胺羟基化物，该化合物具有如下结构式：本专利技术还涉及羟苯水杨胺羟基化物的制备及其应用。
技术介绍
乙型病毒性肝炎(乙肝)仍是严重威胁我国人民健康的重要传染病之一，是引发我国原发性肝癌的主要因素。我国人群HBsAg携带率近7.2％，全世界约有3.5亿人遭受HBV感染。现有研究表明抑制HBVDNA的复制可以阻止乙肝病情进展、减缓甚至逆转肝纤维化和肝硬化并降低肝癌的发生率。目前国际抗HBV治疗指南推荐的核苷(酸)类似物治疗仍存在较多不良反应和较高的耐药率和病毒变异缺陷。此外，现有药物不能完全清除乙肝病人的肝细胞核内的cccDNA(covalentlyclosedcircularDNA)，而cccDNA在患者体内持续存在是慢性HBV感染难以得到治愈的主要原因，事实上，核苷(酸)类似物引起的HBV变异和耐药是全球乙肝治疗史上的难题，也是攻克乙肝的重要障碍。目前已有研究认为以宿主细胞中的蛋白为靶点的药物比直接作用于病毒本身药物的耐药发生率明显降低，并且以宿主细胞中的蛋白为药物靶点可以避免核苷(酸)类似物的线粒体毒性。因此，在HBV复制周期中寻找病毒-宿主细胞相互作用位点作为新的抗病毒靶标，从而开发既能清除cccDNA又能降低耐药发生率的新的抗HBV治疗方案是目前乙肝治疗及乙肝相关性肝癌防治亟需解决的关键问题，具有重要的临床意义和社会意义。核糖核苷酸还原酶(Ribonucleotidereductase,RR)是人体细胞DNA合成和修复的关键酶，其功能是将核糖核苷酸(Ribonucleotidetriphosphates，NDPs)还原为脱氧核糖核苷酸(Deoxyribonucleotidetriphosphates，dNDPs)，后者进一步被激酶磷酸化为dNTPs，为DNA合成提供原料。HBV自身无编码RR酶的基因，而成年人肝脏中大部分正常肝脏细胞处于静止状态，dNTPs浓度很低。HBV(无RR基因)通过HBx蛋白抑制肝细胞调节因子x1(RFX1)与RRM2的启动子结合或激活DNA损伤通路的Chk1-E2F1途径从而激活宿主肝细胞RR酶表达和酶活性，被异常激活的RR酶可提供足量DNA合成原料，保证HBV复制和肝癌细胞增殖对DNA原料的需求，因而RR酶是乙型肝炎及相关肝癌发生发展的关键因子蛋白，是抗乙型肝炎药物的新的靶标分子。RR酶抑制剂可切断HBVDNA复制原料供给，遏制双链松弛环状分子rcDNA(relaxedcircularDNA)合成，可阻止肝细胞内HBV大量复制，有望从源头上有效抑制HBVcccDNA形成，从而减轻肝组织炎性损伤、阻止肝炎发生发展和向肝癌转变。
技术实现思路
虽然目前已经发现RR酶是乙型肝炎及相关肝癌发生发展的关键因子蛋白，但对RR酶具有抑制作用的药物分子仍然比较少见，本专利技术为此提供了一种对RR酶具有抑制作用的药物分子，该分子为羟苯水杨胺羟基化物，其结构式如下：本专利技术发现，该分子采用SimBioSys公司的分子对接软件eHiTS(Version12.0,SimBioSysInc.,Canada)分析显示，eHiTS_Score值(eHiTS_Score对应的是log(Kd)(解离常数取对数)，值越负代表小分子化合物的结合能力越强，如-6相当于μM、-9相当于nM；数值相差为1，结合能力相差10倍)为-3.807。此外，羟苯水杨胺羟基化物还具有极强的抑制乙肝病毒DNA复制的功能，从而可用于制备治疗乙肝的药物，具体的，所述羟苯水杨胺羟基化物用于制备防治肝炎(尤其是乙型肝炎)的药物。所述药物可以制备成适应各种给药形式的剂型。本专利技术还提供了一种制备羟苯水杨胺羟基化物的方法，该方法包括：a、将中间体溶解，并加入催化剂，形成第一混合物的步骤；b、第一混合物加氢完全反应生成羟苯水杨胺羟基化物的步骤；所述催化剂为钯碳、兰尼镍、四氯化锡、三氯化铁中的一种，所述中间体为：通常b步骤的反应收率可达80％以上。所述a步骤将中间体溶解，并加入催化剂，通常a步骤中所选用的溶剂能够溶解中间体即可，一般为二氯甲烷、甲醇、乙醇、叔丁醇、乙腈、四氢呋喃、二氧六环，优选甲醇。所述催化剂的各种规格均可用于对中间体的加氢反应，所述催化剂一般优选钯碳。所述b步骤的反应温度控制在0℃-50℃。本领域技术人员可以采用各种合成路线合成中间体，但在本专利技术中，所述中间体由化合物A及化合物B反应生成，所述化合物A为：所述化合物B为：其中X为Cl、Br或I。对于化合物A及化合物B，本领域技术人员可自行查阅技术文件合成，本专利技术不再叙述。所述中间体的合成步骤包括：c、化合物A与化合物B混合溶解，形成第二混合物的步骤；d、第二混合物完全反应生成中间体的步骤。通常d步骤的反应收率可达70％以上，c步骤中所选用的溶剂为非极性溶剂，不能使用醇类等极性溶剂。所述非极性溶剂可以是二氯甲烷、二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、二氧六环中的至少一种，优选二氯甲烷、四氢呋喃。所述c步骤还包括在化合物A与化合物B混合成第二混合物的过程中，对第二混合物冷却的步骤，以抑制副产物的形成。在本专利技术的部分实施例中，所述对第二混合物冷却的步骤能够使第二混合物的温度保持在-15℃～35℃，优选-15℃～15℃。为使化合物A与化合物B能够顺利反应，所述c步骤还包括向第二混合物添加不含氢的有机碱的步骤，在该步骤中，依然对第二混合物进行冷却，使得添加所述有机碱的第二混合物的温度控制在15℃以下，以便在保持反应效率的同时尽量降低副产物的生成。在本专利技术的部分实施例中，所述有机碱为三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶，优选三乙胺。一般的，化合物A、化合物B以及有机碱的摩尔投料比为1:1-3:1-3，优选1:1-2:1-2。理论上讲，本领域技术人员可以采用其他合成路线合成本专利技术所述的羟苯水杨胺羟基化物，但本专利技术所提供的合成方法却具有显著的技术效果：1、原料便宜，成本低廉，采购非常方便，合成化合物A及化合物B的原料，技术人员均可参照技术文件选用市售产品作为初始原料；2、b步骤和d步骤的反应均很充分，副产物不容易生成，事实上，b步骤和d步骤的反应收率均在70％以上；3、所得副产物均具有一定的水溶性，可通过简单的水洗萃取即可使中间体及所述羟苯水杨胺羟基化物得以纯化，降低了纯化成本。附图说明图1为实施例1中中间体的LC/MS谱图；图2为实施例5中羟苯水杨胺羟基化物的核磁谱图；图3为实施例5中羟苯水杨胺羟基化物的LC/MS谱图；图4为实施例5中羟苯水杨胺羟基化物的HPLC谱图；图5为实施例10所述RRM2的3D结构图；图6为实施例11所述各药物对HBVDNA的影响图表。具体实施方式下面结合附图对本专利技术的实施进一步详细的描述。A、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种羟苯水杨胺羟基化物，其特征在于，结构式如下：/n

【技术特征摘要】
1.一种羟苯水杨胺羟基化物，其特征在于，结构式如下：





2.权利要求1所述的一种羟苯水杨胺羟基化物的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现：
a、将中间体溶解，并加入催化剂，形成第一混合物；所述催化剂为钯碳、兰尼镍、四氯化锡、三氯化铁中的一种，所述中间体为：



b、第一混合物加氢完全反应生成羟苯水杨胺羟基化物，反应温度为0℃-50℃；
c、化合物A与化合物B混合溶解，形成第二混合物，所述第二混合物中化合物A、化合物B以及有机碱的摩尔比为1∶1-3∶1-3；所述有机碱为三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶，
所述化合物A为：
所述化合物B为：
其中X为Cl、Br或I；
d、第...

【专利技术属性】
技术研发人员：裘云庆，楼燕，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33