敲低或抑制STING活性物质的医药用途制造技术

本申请提供了一种敲低或抑制干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon gene，STING)活性物质的医药用途，具体来说是敲低或抑制STING的物质在制备防治心脑血管疾病药物中的应用；在动脉粥样硬化患者及动脉粥样硬化相关的细胞和动物模型中，发现抑制STING活化，可以抑制TBK1、IRF3和NF

【技术实现步骤摘要】
敲低或抑制STING活性物质的医药用途


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及敲低或抑制干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon gene，STING)的物质在制备动脉粥样硬化相关血管疾病防治药物中的应用。

技术介绍

[0002]随着社会发展，心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)正逐渐成为威胁人类健康的世界性问题，预计到2030年，CVD将继续成为全球主要的死亡原因。动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是缺血性心脏病、中风和周围血管疾病的共同病理生理基础，高胆固醇血症、高血压和遗传等多种危险因素共同造成，并且肥胖、糖尿病、吸烟和久坐等生活方式会加剧AS的进展。AS是一种慢性血管炎性疾病，其主要病变特征为血管内膜脂质沉积，伴有平滑肌细胞和纤维基质增生，逐渐发展成动脉粥样硬化斑块。研究发现炎症在AS发生发展过程中发挥重要作用，AS相关的炎症是由促炎细胞因子、炎症信号通路、修饰的脂蛋白和粘附分子介导的。因此，明确炎症信号通路对AS的影响，寻找新的AS相关血管疾病治疗思路与靶点极为重要。
[0003]环磷酸鸟苷
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腺苷酸合成酶(cyclic GMP
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AMP synthase,cGAS)
‑
干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon gene,STING)信号通路是细胞质内重要的DNA感知通路，cGAS通过带正电荷的氨基酸残基与带负电荷的DNA磷酸主链相互作用。当胞质出现异常的DNA时，cGAS可以与其直接结合，随后cGAS二聚体化并发生构象变化，催化ATP和GTP合成环鸟嘌呤腺嘌呤(cyclic GMP
‑
AMP,cGAMP)。cGAMP作为第二信使，招募位于内质网膜上的STING，STING迅速发生二聚化被激活，活化的STING从内质网经高尔基体迁移至细胞核周围的点状膜结构上，磷酸化激活TANK结合激酶1(TANK
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bingding kinase 1,TBK1)，再分别促进干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)和核因子
‑
κB(nuclear factor kappa
‑
B,NF
‑
κB)磷酸化活化，产生多种下游生物学效应。
[0004]STING是一个多功能接头蛋白，为胞内模式识别受体(pattern
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recognition receptors,PRRs)，包含4个跨膜结构域，分别为二聚化结构域、环二核苷酸相互作用域以及与TBK1相互作用结构域(“Molecular mechanisms and cellular functions of cGAS
–
STING signalling，Karl
‑
Peter Hopfner，Veit Hornung，Nature Reviews Molecular Cell Biology”)。在静息状态下，STING呈现出自抑制失活状态。通过激活cGAS
‑
STING信号通路诱导IFN等细胞因子产生，有效激发和影响适应性免疫，参与适应性免疫的效应阶段。该通路对病毒感染、自身免疫性疾病、肿瘤及神经系统疾病等都具有调节作用。
[0005]目前，STING蛋白在心血管疾病中的作用及其机制尚未有任何相关的研究和报道。

技术实现思路

[0006]针对上述问题，本申请提供一种敲低或抑制STING(stimulator of interferon gene,干扰素基因刺激因子)活性物质的医药用途。
[0007]具体而言，本申请首先提供了敲低或抑制STING活性物质在制备防治心血管疾病药物中的应用；特别是在制备防治动脉粥样硬化药物中的应用。
[0008]进一步而言，上述敲低或抑制STING活性物质包括可敲低STING蛋白表达的小干扰RNA或STING活性抑制剂。
[0009]进一步而言，上述可敲低STING蛋白表达的小干扰RNA的正义链核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示(5
‘‑
CCGGAUUCGAACUUACAAUTT
‑3’
)，反义链核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示(5
‘‑
AUUGUAAGUUCGAAUCCGGTT3
’
)。
[0010]进一步而言，上述STING抑制剂为Amlexanox。
[0011]本申请通过Western Blot发现动脉粥样硬化病人主动脉组织、Apoe
‑
/
‑
小鼠主动脉组织以及人冠状动脉内皮细胞中STING蛋白被激活。在致病因素刺激下，内皮的活化和功能障碍是AS形成的始动环节。本专利技术首次明确STING对内皮功能调节机制，有效防止内皮功能障碍及其导致的AS发生，为AS的诊断及治疗提供新的防治药物研发途径和药物作用靶点，具有十分重要的药用价值。
附图说明
[0012]图1为p
‑
STING、STING、p
‑
TBK1、TBK1、p
‑
IRF3、IRF3、p
‑
p65、p65在正常人和动脉粥样硬化病人的主动脉组织中的蛋白表达水平示意图：
[0013]检测方法为提取正常人和动脉粥样硬化病人主动脉组织中的蛋白后，用Western Blot检测p
‑
STING、STING、p
‑
TBK1、TBK1、p
‑
IRF3、IRF3、p
‑
p65、p65蛋白表达水平。
[0014]图2为Ox
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LDL、LPS、TNFα刺激HCAECs后检测p
‑
STING、STING、p
‑
TBK1、TBK1、p
‑
IRF3、IRF3表达水平示意图：
[0015]检测方法为HCAECs给予Ox
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LDL(100μg/mL)、LPS(1μg/mL)、TNFα(50nM)刺激24h后，再Western Blot检测p
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STING、STING、p
‑
TBK1、TBK1、p
‑
IRF3、IRF3蛋白表达水平。
[0016]图3为Ox
‑
LDL、LPS、TNFα刺激HCAECs后STING、TBK1蛋白相互作用示意图；
[0017]检测方法为：HCAECs分别给予Ox
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LDL(100μg/mL)、LPS(1μg/mL)、TNFα(50nM)刺激24h，再通过CO
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IP检测STING和TBK1蛋白相互作用水平。
[0018]图4为Ox
‑
LDL刺激HCAE本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.敲低或抑制STING活性物质在制备防治心血管疾病药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述敲低或抑制STING活性物质包括敲低STING蛋白表达的小干扰RNA或STING活性抑制剂。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述小干扰RNA的核...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈宏山，李雪松，陈佳婧，朱瑞功，季娴，吴玄，姜虹，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：