SmbZIP2基因在提高丹参中丹酚酸含量中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一条转录因子SmbZIP2在提高丹参丹酚酸含量中的应用。本发明专利技术从脱落酸诱导的丹参转录组数据库中筛选到全长1386bp的SmbZIP2基因。利用CRISPR

【技术实现步骤摘要】
SmbZIP2基因在提高丹参中丹酚酸含量中的应用


[0001]本专利技术涉及一条SmbZIP2基因，通过敲除SmbZIP2基因可以提高丹参中丹酚酸的含量，属于基因工程


技术介绍

[0002]丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)为唇形科多年生草本植物，始载于《神农本草经》，《本草经疏》、《本草纲目》中亦有记载，作为一种传统中药在我国沿用已久。丹参被广泛应用于治疗心脑血管疾病、月经不调及各种炎症等，也因此被纳入《中华人民共和国药典》。目前市场上以丹参为原料生产的剂型包括注射剂、冲剂、糖浆剂、片剂等，其中包含复方丹参片、复方丹参滴丸、丹参注射液、丹参酮胶囊、冠心丹参片、丹参保心茶、丹参红花茶等上百种中成药。丹参中主要活性成分包含脂溶性的丹参酮类化合物及水溶性的酚酸类化合物。其中水溶性成分主要包含丹酚酸A,B,C及迷迭香酸，咖啡酸等。由于丹参植株生长周期长及丹参中丹酚酸含量较低，化学合成成本高的现象导致市场上丹酚酸供不应求的现状日益明显。如何提高丹参中丹酚酸含量已成为近些年的研究热点。
[0003]诱导子处理是提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一条SmbZIP2基因，其特征在于，其基因序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种权利要求1所述SmbZIP2基因在提高丹参中丹酚酸含量中的应用，其特征在于，通过在丹参中敲除SmbZIP2基因来促进丹参毛状根产生丹酚酸。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述在丹参中敲除SmbZIP2基因具体包括如下步骤：(1)在SmbZIP2基因第一外显子区设计sgRNA序列；(2)将sgRNA序列构建于含有CRISPR
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Cas9表达框的中间载体上；(3)将含有sgRNA序列的CRISPR
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Cas9表达框构建到植物表达载体上；(4)将步骤(3)所得的敲除载体转入到发根农杆菌中；(5)利用步骤(4)所转化的发根农杆菌菌株遗传转化丹参外植体，所获得的毛状根经过PCR鉴定及测序确定敲除成功株系。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中，根据G
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19base
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NGG原则在SmbZIP2基因第一外显子区设计sgRNA序列，其基因序列如SEQ ID NO.12所示。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中，所用含有CRISPR
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Cas9表达框的中间载体为18T
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CRISPR
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Cas9，其含有EcoRI，HindI...

【专利技术属性】
技术研发人员：开国银，时敏，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：