一种血清代谢标志物的用途及检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及血清样本中小分子代谢物12-羟基花生四烯酸(12-HETE)作为标志物在制备用于诊断受试者中的糖尿病视网膜病变患者的试剂盒中的新应用。本发明专利技术还涉及检测受试者中的糖尿病视网膜病变的试剂盒，通过检测来自受试者的血清中12-HETE的相对浓度，基于二元逻辑回归方程计算所述标志物的变量Prob以及判断截点值(cutoff)，判断所述受试者是否患有糖尿病视网膜病变。所述试剂盒检测成本低，重复性好，可高效检测本发明专利技术所涉及的标志物。同时，本发明专利技术可应用于辅助糖尿病视网膜病变的临床诊断，具有诊断灵敏度高，特异性好的特点，具有较高的开发应用前景。的开发应用前景。的开发应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种血清代谢标志物的用途及检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及血清样本中小分子代谢物12-HETE作为标志物在制备用于诊断受试者中的糖尿病视网膜病变患者的试剂盒中的应用。属于分析化学，生物化学以及临床医学领域。

技术介绍

[0002]糖尿病是一种常见的代谢障碍疾病，其特征是胰岛素代谢异常，常伴随高血糖、高血脂、高血压以及神经血管损伤。当前我国糖尿病的发病率居全球之首。视网膜病变是糖尿病最常见的并发症，严重危害患者的视力水平及身心健康。据统计，目前全球3.82亿糖尿病患者中有近1.26亿人患有视网膜病变，糖尿病患者失明的风险是正常人的25倍[参考文献1:Zheng Y,He M,Congdon N.Indian J Ophthalmol.2012Sep-Oct,60(5):428-31]。糖尿病视网膜病变分不同阶段，取决于视网膜血管病变的临床生物标志物的缺失或存在，如小动脉瘤、出血、软性和硬性渗出物、水肿和新生血管。糖尿病视网膜病变的分期范围从正常(或明显正常)跨越到背景性糖尿病视网膜病变(1期，2期，3期)到增生性糖尿病视网膜病变(PDR)。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血清代谢标志物在制备用于诊断受试者中的糖尿病视网膜病变的试剂盒中的用途，其特征在于：所述代谢标志物为12-羟基花生四烯酸。2.一种检测受试者中糖尿病视网膜病变的试剂盒，所述试剂盒包括：(1)标准品：氘代的12-羟基花生四烯酸(12-HETE d8)，所述标准品用于对应血清中12-羟基花生四烯酸(12-HETE)的定性；(2)提取剂：所述提取剂包括含0.3～0.7μg/ml内标(12-HETE d8)的甲醇溶液，甲基叔丁基醚以及超纯水；(3)洗脱溶液。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，洗脱溶液：乙腈/水＝4:6～6:4(v/v)，异丙醇/乙腈＝5:5～9:1(v/v)，且二种洗脱液内均含有终浓度10mM乙酸铵。4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于：(1)首先用含内标的甲醇处理来自受试者的血清样本，沉淀血清蛋白后，依次加入甲基叔丁基醚、超纯水，涡旋离心，形成两相分配体系，然后取上清，真空离心冻干，再浓缩复溶，最后进行超高效液相色谱-质谱分析(UHPLC-MS)；洗脱溶液：乙腈/水＝6:4(v/v)，异丙醇/乙腈＝9:1(v/v)，洗脱液内含10mM乙酸铵；液相色谱柱：Waters BEH C8柱,2.1mm
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100mm,1.7μm；(2)对每一个受试者血清样本中经标样定性后的色谱峰面积分别与提取剂中对应的内标物峰面积进行比较，计算12-羟基花生四烯酸的相对浓度；(3)以上述12-羟基花生四烯酸的...

【专利技术属性】
技术研发人员：许国旺，轩秋慧，欧阳瑒，王砚凤，赵欣捷，胡春秀，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：