黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法及其应用技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，特别涉及黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法及其应用。本发明专利技术提供一种黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法，利用高效液相色谱法对待测样品进行检测，以获得色谱图；以及基于所述色谱图，获得黄蛭益肾胶囊中所含化学成分的种类和含量；色谱柱采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以乙腈作为流动相A，以0.05～0.1％磷酸水作为流动相B进行梯度洗脱。该方法灵敏度和精密度高，稳定性和重复性好，可以客观、全面、准确的评价黄蛭益肾胶囊质量，对保证黄蛭益肾胶囊临床疗效具有重要意义。有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法及其应用


[0001]本专利技术涉及医药
，特别涉及黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法及其应用。

技术介绍

[0002]中药指纹图谱是借助于波谱或色谱技术获得的中药化学成分的光谱图或色谱图，是一种综合的、可量化的鉴别手段，是当前符合中药特色的评价中药真实性、稳定性和一致性的质量控制模式之一。目前，美国FDA、英国和印度草药典、德国药用植物学会、加拿大药用植物学会均接受色谱指纹图谱的质控方法。由于中药复方指纹图谱整张图谱是由不同峰群组成，每一峰群都代表一组生物信息，且各种生物信息之间的相互协同及拮抗作用，正好体现了中药复方的配伍和组方理论。此外，这些峰群或峰群之间通过对机体主病及主证的治疗，体现了控制某张中药复方指纹图谱，就可确保其相应药效。目前中药指纹图谱的建立方法主要有：光谱法，如紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR)；色谱法，如薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、毛细管电泳法；以及其他方法，如x射线衍射法、核磁共振法等。其中高效液相色谱法(HPLC)具有分析速度快，定量精密度高，检测器种类多，稳定性好等特点，不受样品挥发度和热稳定性的限制，比气相色谱法等其他方法应用范围更广，是构建指纹图谱的主要方法之一。
[0003]由于现行标准中黄蛭益肾胶囊缺乏指纹图谱，无法全面的控制黄蛭益肾胶囊的质量，因此，亟需开发一种黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法，以对黄蛭益肾胶囊进行质控，保障临床疗效。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法，该方法灵敏度和精密度高，稳定性和重复性好，可以客观、全面、准确的评价黄蛭益肾胶囊质量，对保证黄蛭益肾胶囊临床疗效具有重要意义。
[0005]为此本专利技术第一方面提供一种黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法。根据本专利技术的实施例，所述测定方法包括：利用高效液相色谱法对黄蛭益肾胶囊样品进行检测；
[0006]其中，所述高效液相色谱法采用的流动相包括：
[0007]流动相A，所述流动相A选自乙腈；
[0008]流动相B，所述流动相B选自0.05～0.1％磷酸水溶液。
[0009]中药的指纹图谱是指中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴定手段，能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价，具备专属性强、稳定性好、重现性好的优点，因此中药指纹图谱已经成为目前国际上较为先进的中药质量控制手段。同时，高效液相色谱法(HPLC)具有分离效率高，分析速度快，定量精密度高，检测器种类多，稳定性好等特点。不受样品挥发度和热稳定
性的限制，样品中大多数成分均可在高效液相色谱仪上进行分析检测，是构建中药指纹图谱的主要方法之一。
[0010]为了更全面、有效的控制黄蛭益肾胶囊的质量，提高其质量控制水平，让临床用药安全及疗效更加有所保证，专利技术人创造性的获得一种第一方面所述的黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法，利用该方法能够准确、全面检测黄蛭益肾胶囊中所含化学成分的种类与数量，该方法灵敏度和精密度高，稳定性和重复性好，能够实现对黄蛭益肾胶囊良好的质控。
[0011]根据本专利技术的实施例的黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法，还可以具有以下附加技术特征的至少之一：
[0012]根据本专利技术的实施例，所述高效液相色谱法采用如下梯度洗脱方式：
[0013]时间(min)A相(％)B相(％)5595151090251585352080452575553070653565754060854555
[0014]在本专利技术提供的测定方法中，所述高效液相色谱法利用上述洗脱条件，所得色谱峰形、响应及分离度均较好。而其他的洗脱条件则无法达到本专利技术的分离度和良好的峰型。
[0015]根据本专利技术的实施例，所述高效液相色谱法采用的色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
[0016]根据本专利技术的实施例，所述色谱柱为WatersShield RP18，尺寸250mm
×
4.6mm，5μm。
[0017]只有采用本专利技术提供的色谱柱以及相应的尺寸，才能够获得较好的分离效果，峰数量也较多，而采用其他的色谱柱，分离效果不好，峰型差且峰数量也较少。根据本专利技术的实施例，所述高效液相色谱法采用的柱温为28℃～32℃。
[0018]根据本专利技术的实施例，所述高效液相色谱法采用的流动相的流速为0.8～1.2mL/min。
[0019]根据本专利技术的实施例，所述高效液相色谱法采用的检测波长为205～215nm。
[0020]本专利技术提供的高效液相色谱法中，在205～215nm处的图谱信息较多且分离较好。
[0021]根据本专利技术的实施例，所述高效液相色谱法采用的进样体积8μL～12μL。
[0022]根据本专利技术的实施例，所述黄蛭益肾胶囊样品进行高效液相色谱检测之前，预先经过如下预处理；
[0023]1)将所述黄蛭益肾胶囊样品中的内容物与有机溶剂进行混合，得到溶解液；
[0024]2)将所述溶解液进行过滤，收集滤液，得待测样品溶液。
[0025]根据本专利技术的实施例，所述有机溶剂选自80～100体积％的甲醇溶液。
[0026]在本专利技术提供的测定方法中，采用80～100体积％的甲醇溶液溶解黄蛭益肾胶囊
样品中的内容物，能够进一步提高样品色谱峰信息，使得样品色谱峰信息丰富，峰形较好。
[0027]根据本专利技术的实施例，所述混合是在80～120W的功率、45～60kHz频率的超声中进行20～40min。
[0028]根据本专利技术的实施例，所述溶解液的浓度为0.08～0.12g/mL。
[0029]本专利技术提供一种黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法。根据本专利技术的实施例，所述测定方法包括以下步骤：
[0030](1)取黄蛭益肾胶囊待测样品的内容物2g，精密称定，加入甲醇20mL，超声处理30min，超声处理功率100W，频率52kHz；
[0031](2)取上清液过0.45μm的滤膜，取续滤液，得待测样品溶液；
[0032](3)以WatersShield RP18(250mm
×
4.6mm，5μm)为色谱柱，以乙腈作为流动相A，以0.05％磷酸水作为流动相B进行梯度洗脱，所述梯度洗脱条件为：
[0033][0034][0035]流速1.0mL/min，柱温30℃，进样体积10μL，检测波长：210nm。
[0036]本专利技术提供的黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法中的测定条件，是本专利技术的专利技术人经过大量实验，付出创造性劳动获得的较优的测定条件，在该测定条件下，能够进一步提高测定结果的准确度，能够更全面准确的检测黄蛭益肾胶囊待测样品中重要化学成分的种类和含量，并且进一步提高了检测的灵敏本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄蛭益肾胶囊指纹图谱测定方法，其特征在于，包括：利用高效液相色谱法对黄蛭益肾胶囊样品进行检测；其中，所述高效液相色谱法采用的流动相包括：流动相A，所述流动相A选自乙腈；流动相B，所述流动相B选自0.05～0.1％磷酸水溶液。2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用如下梯度洗脱方式：时间(min)A相(％)B相(％)5595151090251585352080452575553070653565754060854555。3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用的色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。4.根据权利要求3所述的测定方法，其特征在于，所述色谱柱为WatersShield RP18，尺寸250mm
×
4.6mm，5μm。5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用的柱温为28℃～32℃。6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用的流动相流速为0.8～1.2mL/min。7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用的检测波长为205～215nm。8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用的进样体积8μL～12μL。9.根据权利要求1～8中任一项所述的测定方法，其特征在于，所述黄蛭益肾胶囊样品进行高效液相色谱检测之前，预先经过如下预处理；1)将所述黄蛭益肾胶囊样品中的内容物...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴晶晶，李全，王恒斌，张邦国，潘耀宗，
申请(专利权)人：雷允上药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：