一种维生素B制造技术

本发明专利技术涉及一种维生素B

【技术实现步骤摘要】
一种维生素B
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注射液有关物质的检测方法


[0001]本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种维生素B
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注射液有关物质的检测方法。

技术介绍

[0002]维生素B
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化学名为Coα
‑
[α
‑
(5,6
‑
二甲基苯并咪唑基)]‑
Coβ氰钴酰胺，结构式如下：
[0003][0004]分子式：C
63
H
88
CoN
14
O
14
P，分子量：1355.37。
[0005]维生素B
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又称钴胺素或氰钴素，是唯一含金属元素的维生素。维生素B
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为浅红色的针状结晶，易溶于水和乙醇，在pH值4.5～5.0弱酸条件下最稳定，强酸或碱性溶液中分解，遇热可有一定程度破坏，遇强光或紫外线易被破坏。维生素B
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的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血；防止大脑神经受到破坏。成人皮下注射治疗维生素B
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缺乏症时，肌内注射或静脉注射最高可达1mg一次。鉴于维生素B
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的重要作用，维生素B
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注射液的质量至关重要。经查阅国内外药典及文献，ChP、USP、JP收载的维生素B
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注射液中均未进行有关物质的控制。USP、EP收载的API方法中均为等度洗脱，且使用的色谱柱粒径均为5μm，不能将各未知杂质及特定杂质34
‑
甲基维生素B
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与其相邻峰进行有效分离；现有文献中的洗脱梯度及十八烷基硅烷填料的色谱柱也不能准确分离各未知杂质及特定杂质34
‑
甲基维生素B
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与其相邻峰，均无法准确检测维生素B
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注射液中34
‑
甲基维生素B
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含量。
[0006]由于上述方法存在的缺点，提供一种准确可靠的高效液相色谱法测定维生素B
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注射液中34
‑
甲基维生素B
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含量以保证维生素B
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注射液的质量和疗效显得迫在眉睫和意义重大。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是在现有技术的基础上，提供一种维生素B
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注射液有关物质的检测方法，可以准确分离各未知杂质及特定杂质34
‑
甲基维生素B
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与其相邻峰。
[0008]本专利技术的技术方案如下：
[0009]一种维生素B
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注射液有关物质的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱对维生素B
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注射液及有关物质进行检测，其高效液相色谱条件包括：色谱柱为：Agilent ZORBAX SB
‑
C8；以流动相A和流动相B作为混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A为磷酸氢二钠溶液；所述流动相B为甲醇；所述梯度洗脱的过程如下：在0～10分钟内，流动相A和流动相B的体积比由82:18匀速渐变至77:23；在10～70分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持77:23不变；在70～85分钟内，流动相A和流动相B的体积比由77:23匀速渐变至45:55；在85～95分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持45:55不变；在95～96分钟内，流动相A和流动相B的体积比由45:55匀速渐变至82:18；在96～105分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持82:18不变。
[0010]具体梯度洗脱过程按照下表1所示。
[0011]表1梯度洗脱过程
[0012]时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)082181077237077238545559545559682181058218
[0013]在一种优选方案中，本专利技术采用的色谱柱为不封端的Agilent ZORBAX SB
‑
C8色谱柱，例如，色谱柱的长度为150mm，直径为4.6mm，填料粒径为3.5μm。采用本专利技术的色谱柱和特定的洗脱程序，在其他条件的配合下，可以准确分离各未知杂质及特定杂质34
‑
甲基维生素B
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与其相邻峰，用于测定维生素B
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注射液中34
‑
甲基维生素B
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含量，专属性强，重现性好，结果准确可靠，从而对维生素B
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注射液产品质量进行准确的评价，保证维生素B
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注射液产品的安全及疗效。
[0014]本专利技术的检测方法还包括如下高效液相色谱条件：
[0015]检测波长为359～363nm，优选为361nm。
[0016]进一步地，柱温为30～40℃，优选为35℃。
[0017]进一步地，流速为0.7～0.9mL/min；优选为0.8mL/min。
[0018]更进一步地，进样量为10～50μL；优选为20μL。
[0019]本专利技术以流动相A和流动相B作为混合流动相进行梯度洗脱，其中流动相A为磷酸氢二钠溶液，可以按照如下方法制备：称取无水磷酸氢二钠3.5～4.5g加入至1000ml超纯水中，混和均匀后，用磷酸调节pH至3.2～3.8，即得。
[0020]在一种优选方案中，流动相A的制备方法如下：称取无水磷酸氢二钠3.97g加入至1000ml超纯水中，混和均匀后，用磷酸调节pH至3.5，即得。
[0021]采用本专利技术的方法检测维生素B
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注射液及其有关物质时，包括配制如下溶液：
[0022]稀释剂(空白溶液)：体积比为3:1的流动相A和流动相B混合液。例如，量取流动相A 750ml与流动相B 250ml，混匀后，超声脱气约3～5min，即得。
[0023]供试品溶液按照如下方法制备：移取维生素B
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注射液，加入稀释剂(流动相A和流动相B的体积比为3:1)稀释至浓度为1.0mg/ml维生素B
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溶液。
[0024]对照品溶液按照如下方法制备：(1)准确称取25mg维生素B
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对照品于25ml容量瓶中，加稀释剂溶解并定容至刻度，摇匀后制备对照品储备液；(2)准确移取1.0ml对照品储备液于100ml容量瓶中，加稀释剂稀释并定容至刻度，摇匀后，即得对照品溶液。
[0025]供试品加标溶液按照如下方法制备：(1)准确称取5mg 34
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甲基维生素B
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对照品于10ml容量瓶中，加稀释剂溶解并定容至刻度，摇匀后，即得34
‑
甲基维生素B
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对照品溶液；(2)移取浓度为1.0mg/ml的维生素B
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溶液10ml，向其中加入浓度为0.5mg/ml的34
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种维生素B
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注射液有关物质的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱对维生素B
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注射液及有关物质进行检测，其高效液相色谱条件包括：色谱柱为：Agilent ZORBAX SB
‑
C8；以流动相A和流动相B作为混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A为磷酸氢二钠溶液；所述流动相B为甲醇；所述梯度洗脱的过程如下：在0～10分钟内，流动相A和流动相B的体积比由82:18匀速渐变至77:23；在10～70分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持77:23不变；在70～85分钟内，流动相A和流动相B的体积比由77:23匀速渐变至45:55；在85～95分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持45:55不变；在95～96分钟内，流动相A和流动相B的体积比由45:55匀速渐变至82:18；在96～105分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持82:18不变。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的长度为150mm，直径为4.6mm，填料粒径为3.5μm。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱条件还包括：检测波长为359～363nm，优选为361nm。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱条件还包括：柱温为30～40℃，优选为35℃。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱条件还包括：流速为0.7～0.9mL/min；优选为0.8mL/min。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱条件还包括：进样量为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐咏群，黄锡伟，董海霞，胡铮，田欣欣，
申请(专利权)人：南京健友生化制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：