一种检测痕量蛋白质的方法技术

本发明专利技术提供一种检测痕量蛋白质的方法。将NanoOrange蛋白定量试剂盒中的荧光检测试剂和缓冲液混合，得到工作液，将标准品和待测样品分别与工作液混合，进行检测并计算结果。本发明专利技术中，将NanoOrange蛋白定量检测试剂盒中的荧光检测试剂和缓冲液混合，获得工作液，无需对荧光检测试剂和缓冲液进行稀释，简化了操作，此外，无需限制样品的进样量，提高了蛋白质含量检测的限度和灵敏度。含量检测的限度和灵敏度。含量检测的限度和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
一种检测痕量蛋白质的方法


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及一种检测痕量蛋白质的方法。

技术介绍

[0002]乳糖存在于大多数哺乳动物乳汁中，是一种由葡萄糖和半乳糖组成的天然二糖。乳糖可作为口服制剂、吸入剂辅料和注射剂辅料，是一种冻干粉针良好的赋形剂，但供注射用的乳糖使用时会受到一定的限制，乳糖在注射剂中慎用的原因在于其主要来源于动物，其中痕量的杂质蛋白可能引发人体的过敏反应，对用药安全造成极大的挑战，因此需要对其中杂质蛋白质进行严格控制。目前检测乳糖中蛋白质含量的方法主要有如下几种方法：
[0003]凯氏定氮法，现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等，其中较精密的半微量法(中国药典2020版四部0704第二法)，要求进样的含氮量为1.0mg～2.0mg，因此，该方法并不适用于定量检测乳糖中痕量的蛋白质；
[0004]考马斯亮蓝染料比色法(Bradford法)，考马斯亮蓝G
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250染料游离状态下呈棕红色，与蛋白质结合后变为蓝色，在一定浓度范围内蛋白质
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染料复本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测痕量蛋白质的方法，其特征在于，所述方法包括：将NanoOrange蛋白定量检测试剂盒中的荧光检测试剂和缓冲液混合，得到工作液，将标准品和待测样品分别与工作液混合，进行检测并计算结果。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述荧光检测试剂和缓冲液的体积比为(44～54):1；优选地，所述标准品和工作液的体积比为(4～9):1；优选地，所述待测样品和工作液的体积比为(4～9):1。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法还包括配制标准品的步骤；优选地，所述配制标准品包括使用稀释剂将标准品进行稀释；优选地，所述稀释剂包括去离子水；优选地，所述标准品包括牛血清白蛋白和/或β
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乳球蛋白。4.根据权利要求1
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3任一项所述的方法，其特征在于，所述将标准品和待测样品分别与工作液混合后，还包括孵育和冷却的步骤。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述孵育在避光条件下进行；优选地，所述孵育的温度为90～96℃；优选地，所述孵育的时间为8～12min。6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述冷却在避光条件下进行；优选地，所述冷却的温度为20～30℃；优选地，所述冷却的时间为15～25min。7.根据权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：徐静，李婵，甘雅玲，张梦雨，梁兴杰，
申请(专利权)人：国家纳米科学中心，
类型：发明
国别省市：