一种仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛的甄别方法技术

本发明专利技术公开了一种仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛的甄别方法，属于中药材检验技术领域，包括选材、清洗、测量、冻干、外形数据处理、粉碎、干粉主微量元素测试、生境甄别等步骤。本技术方案基于仿野生岩缝栽培、活树附生栽培和大棚栽培三种不同种植生境条件下，以茎条节长、节宽，以及铁皮石斛干粉所含主、微量元素为溯源指标，采用差异分析及判别分析，建立典型判别函数散点图模型，可以经济、快速、准确、有效地甄别铁皮石斛种植生境，实现对铁皮石斛茎条和干粉产品的溯源，为铁皮石斛产品的消费者提供了一个验证或检测的渠道，可保护市场上真正优质铁皮石斛生产商家的利益，促进铁皮石斛产业朝着积极、健康的方向发展。健康的方向发展。健康的方向发展。

【技术实现步骤摘要】
一种仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛的甄别方法


[0001]本专利技术属于中药材检验
，涉及石斛的产地判别技术，具体是涉及一种仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛的甄别方法。

技术介绍

[0002]铁皮石斛为兰科石斛属附生草本植物，是一种传统名贵中药材。鉴于在自然条件下铁皮石斛的繁殖率低，加之过渡采挖，野生资源日趋枯竭。在1987年被《中国珍稀濒危保护植物名录》和《野生药材资源保护管理条例》列为三级珍稀濒危保护植物和二类药材品种。
[0003]目前，铁皮石斛的种植方式主要为三种：大棚栽培、活树附生栽培和仿野生岩缝附生栽培。历代本草对石斛药材质量的传统评价认为石斛以石生环境为优，其质重、黏齿无渣者为佳。为了保护与野生铁皮石斛品质相近的优质铁皮石斛产业，促进优质铁皮石斛产业的可持续发展，国内某些地区因地制宜，尝试规模化仿野岩缝附生栽培铁皮石斛，并取得良好成效。
[0004]在药材市场，铁皮石斛产品一般以茎条和干粉形式进行销售，仿野岩缝附生栽培铁皮石斛产品因其品质较好，市场价高于大棚栽培、活树附生栽培两种种植方式的铁皮石斛，但在买卖过程中，铁皮石斛产品要通过茎条形态来判断其栽培方式，需要极其丰富的经验，否则难以判断，而干粉形式的铁皮石斛，要通过其形态、气味等表象判别其栽培方式，更是无法实现。因此，市场上铁皮石斛以次充好的现象时有发生，消费者难以买到真正的仿野生石栽铁皮石斛优质干粉或茎条产品，而真正的仿野生石栽铁皮石斛商家由于价格偏高而失去竞争力，蒙受经济损失，导致真正的优质产品栽培难以为继，从而制约了仿野生岩缝栽培优质铁皮石斛产业的发展壮大。
[0005]究其原因，主要是现有技术中缺乏鉴别铁皮石斛干粉产品和茎条的科学方法，从而无法有效判别和区分产品生境来源。
[0006]申请号为CN201711282227.X的中国专利技术专利申请公开了一种铁皮石斛生长环境预测方法，包括生长环境预测模型和改进的BP神经网络的步骤，其中生长环境预测模型包括对获得的参数作归一化处理，使神经网络对样本具有很好的拟合性，改进的BP神经网络的步骤包括一级模糊控制器对输入误差信号e(n)处理和二级模糊控制器对输入误差变化率进行处理。该技术方案提供了一种改进的BP神经网络算法用于植物生长环境预测，改进的BP神经网络克服了传统BP神经网络收敛速度慢的缺陷，同时改变步长，从而利用模糊控制根据生长环境做出自适应变步长，提高了收敛速度。
[0007]申请号为CN201910930277.7的中国专利技术专利申请公开了一种石斛生长溯源系统，包括用于对石斛生长种植过程进行实时摄像监测的种植基地视频监视模块、用于对石斛生长种植基地气候环境进行实时监测的种植基地实时气候监测模块、用于对整个种植基地基本信息进行统一记录管理的种植基地管理模块、用于对石斛生长种植过程中各种具体种植信息进行记录监控的以便能够及时进行监控和系统管理的种植管理模块、用于对原材料进
行分析采购的采购管理模块。该石斛生长溯源系统具备能够达到石斛的可追溯、生产基地更科学的管理的优点。
[0008]但现有技术并不能达到通过铁皮石斛茎条或干粉产品反推其生长或栽培环境的效果。采取何种方式，可以在忽略产地的情况下，对铁皮石斛的生长环境进行判断，从而对产品品质进行判别，这个问题亟待解决。

技术实现思路

[0009]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛的甄别方法，从而达到通过科学、严谨的技术方法对石斛产品生长环境进行反推，判断石斛产品品质，规范石斛市场的效果。
[0010]本专利技术是通过如下技术方案予以实现的。
[0011]一种仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛的甄别方法，包括如下步骤：
[0012]步骤一：选材
[0013]于4月初铁皮石斛开花前的适宜采摘期，分别采集相似气候地区仿野生岩缝栽培、活树附生栽培和大棚栽培三种不同种植生境的铁皮石斛新鲜茎条，总数量不少于400根，共计40份样品，样品种源均来自本地驯化种源，均采集2年生茎条，样品分别摆放；
[0014]步骤二：清洗
[0015]将采集的铁皮石斛茎条样品在室内除去叶片，以自来水、蒸馏水、去离子水分别各冲洗2次，在常温条件下沥水，表面风干；
[0016]步骤三：测量
[0017]将铁皮石斛茎条样本整齐平铺摆放，使用数码相机分别批量拍摄照片，并在制图软件中对所有茎条照片统一比例尺，测量和标记茎条各节的节长和节宽(直径)尺寸数据，测量时从顶端向下，仅测量每根石斛茎条第1节至第6节对应的节长、节宽，采集若干组样本数据，记录；
[0018]步骤四：冻干
[0019]茎条测量完成后，将茎条分别冻干至恒重；
[0020]步骤五：外形数据处理
[0021]在茎条冻干过程中，对步骤三获取的茎条外形数据进行处理：
[0022]对铁皮石斛前6节茎条节长、节宽数据做统计分析；利用单因素方差分析比较三种不同生境的茎条节长、节宽是否存在显著差异，根据单因素方差分析的结果进行对比分析，选出有显著差异的节长、节宽数据，采用两两间多重比较检验法进一步验证差异性，采用判别分析构建典型判别函数散点图模型；
[0023]步骤六：粉碎
[0024]将步骤四冻干后的茎条进行粉碎，过筛，得到干粉后在干燥器储存待用；
[0025]步骤七：干粉主微量元素测试
[0026](1)标准溶液制备：将多元素标准液逐级稀释成0
‑
200ng/ml；
[0027](2)内标溶液制备：将100mg/L标准溶液逐级稀释成20ng/ml；
[0028](3)铁皮石斛干粉样品消解：
①
样品准备：称取步骤六所得铁皮石斛干粉样品0.2g，分别置于聚四氟乙烯消解管中，将消解管置于石墨消解孔中，随同样品进行空白试
验；
②
加液：向消解管中加入6mL硝酸，摇匀，拧紧管盖；
③
消解：消解仪程序升温至60℃，加热回流1h，再升温至100℃，加热回流1h，冷却至室温，打开管盖，排出红棕色气体(氮氧化物)；
④
定容：用少量超纯水吹洗消解管内壁，再用2％硝酸定容至50mL待测；
[0029](4)主微量元素含量测定：分别测定样品溶液内主量元素和微量元素含量，记录所得数据；
[0030]步骤八：干粉测试数据分析
[0031]对铁皮石斛茎条所制得茎部干粉所含主量元素、微量元素数据做统计分析：
[0032](1)利用单因素方差分析比较三种不同生境对应的干粉中矿质元素是否存在显著差异，根据单因素方差分析的结果，选出有显著差异的主、微量元素，针对有显著差异的主、微量元素采用LSD两两间多重比较检验法检验；
[0033](2)通过前期预分析，找出有显著差异特征元素，然后分别以所有矿质元素作为变量，采用逐步判别分析，甄别主、微量元素对三种不同生境铁皮石斛溯源的鉴别可靠性，获得典型判别函数散点图模型；进一步采用交互验证法(刀切法)和初始识别对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛的甄别方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：选材于4月初铁皮石斛开花前的生长时期，分别采集相似气候地区仿野生岩缝栽培、活树附生栽培和大棚栽培三种不同种植生境的铁皮石斛新鲜茎条，总数量不少于40份，样品种源均来自本地驯化种源，均采集2年生茎条，样品分别摆放；步骤二：清洗将采集的铁皮石斛茎条样品在室内除去叶片，以自来水、蒸馏水、去离子水分别各冲洗2次，在常温条件下沥水，表面风干；步骤三：测量将铁皮石斛茎条样本整齐平铺摆放，使用数码相机分别批量拍摄照片，并在制图软件中对所有茎条照片统一比例尺，测量和标记茎条各节的节长和节宽(直径)尺寸数据，测量时从顶端向下，仅测量每根石斛茎条第1节至第6节对应的节长、节宽，采集若干组样本数据，记录；步骤四：冻干茎条测量完成后，将茎条分别冻干至恒重；步骤五：外形数据处理在茎条冻干过程中，对步骤三获取的茎条外形数据进行处理：对铁皮石斛前6节茎条节长、节宽数据做统计分析；利用单因素方差分析比较三种不同生境的茎条节长、节宽是否存在显著差异，根据单因素方差分析的结果进行对比分析，选出有显著差异的节长、节宽数据，采用两两间多重比较检验法进一步验证差异性，采用判别分析构建典型判别函数散点图模型；步骤六：粉碎将步骤四冻干后的茎条进行粉碎，过筛，得到干粉后在干燥器储存待用；步骤七：干粉主微量元素测试(1)标准溶液制备：将多元素标准液逐级稀释成0
‑
200ng/ml；(2)内标溶液制备：将100mg/L标准溶液逐级稀释成20ng/ml；(3)铁皮石斛干粉样品消解：
①
样品准备：称取步骤六所得铁皮石斛干粉样品0.2g，分别置于聚四氟乙烯消解管中，将消解管置于石墨消解孔中，随同样品进行空白试验；
②
加液：向消解管中加入6mL硝酸，摇匀，拧紧管盖；
③
消解：消解仪程序升温至60℃，加热回流1h，再升温至100℃，加热回流1h，冷却至室温，打开管盖，排出红棕色气体(氮氧化物)；
④
定容：用少量超纯水吹洗消解管内壁，再用2％硝酸定容至50mL待测；(4)主微量元素含量测定：分别测定样品溶液内主量元素和微量元素含量，记录所得数据；步骤八：干粉测试数据分析对铁皮石斛茎条所制得茎部干粉所含主量元素、微量元素数据做统计分析：(1)利用单因素方差分析比较三种不同生境对应的干粉中矿质元素是否存在显著差异，根据单因素方差分析的结果，选出有显著差异的主、微量元素，针对有显著差异的主、微量元素采用LSD两两间多重比较检验法检验；(2)通过前期预分析，找出有显著差异特征元素，然后分别以所有矿质元素作为变量，
采用逐步判别分析，甄别主、微量元素对三种不同生境铁皮石斛溯源的鉴别可靠性，获得典型判别函数散点图模型；进一步采用交互验证法(刀切法)和初始识别对判别模型的可靠性进行验证；步骤九：生境甄别采集同一地区仿野生岩缝栽培、活树...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜光映，严福林，谢仁权，陈坚，何卫军，曾鉴，王勤，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：