一种检测金黄色葡萄球菌的新方法及其检测试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种基于组合特征肽的靶向分析检测金黄色葡萄球菌及肠毒素的新方法及试剂盒。具体地本发明专利技术中公开了可作为金黄色葡萄球菌及其分泌的肠毒素A和肠毒素B检测标准的特征肽。本发明专利技术的特征肽检测技术实现了同时检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素，极大的减少了检测时间和假阳性结果，为金黄色葡萄球菌及其肠毒素的检出提供了可靠有效的质量控制方法。肠毒素的检出提供了可靠有效的质量控制方法。肠毒素的检出提供了可靠有效的质量控制方法。

【技术实现步骤摘要】
一种检测金黄色葡萄球菌的新方法及其检测试剂盒

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[0001]本专利技术属于食源性致病菌检测领域，以金黄色葡萄球菌及其肠毒素的特征肽 为研究对象，开发了一种基于特征肽的靶向分析检测食品中金黄色葡萄球菌的新 方法及其检测试剂盒。

技术介绍
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[0002]食源性致病菌的存在严重威胁着人类健康与公共卫生。食物携带的致病微生 物可以在宿主体内繁殖并表达毒力因子，进而损伤机体健康。尽管公共卫生水平 不断提高，但时至今日食源性致病菌仍频繁引起疾病暴发。高效严谨的检验检疫 手段，对于食源性致病菌危害的控制和国民食品安全极其重要。
[0003]金黄色葡萄球菌是一种典型的食源性致病菌，常用的检测方法有凝固酶法、 酶联免疫法(ELISA)、荧光PCR。凝固酶试验技术基于致病性葡萄球菌产生的 凝固酶与纤维蛋白原反应产生沉淀实现检疫，但该方法存在灵敏度低、生物危险 性大、成本高、制剂有限等缺点。酶联免疫反应可以通过金黄色葡萄球菌肠毒素 与抗体的相互作用实现快速检测，但该方法常由于检测样本中所含无关抗原造成 假阳性结果且成本偏高。随着分子技术的发展，依赖于特定识别本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于组合特征肽的靶向分析检测金黄色葡萄球菌及肠毒素的检测方法，其特征在于，所述金黄色葡萄球菌及肠毒素的组合特征肽选自下组：I1(AYLAVPAAPK)I2(DYNSPTLIGWVK)I3(SQSYGQGSDQIR)I4(AFAQLVTK)I5(AGYTVNNTPK)I6(SISSGYTSGR)I7(DFVNALPTLPDSK)I8(NLVSEVTDAVEK)I9(NITQDQDIHAVPK)SEA1(YNLYNSDVFDGK)SEA2(SELQGTALGNLK)SEB1(VLYDDNHVSAINVK)SEB2(VTAQELDYLTR) 。2.如权利要求1所述金黄色葡萄球菌组合特征肽，其特征在于，I1、I2、I3、I4、I5、I6、I7、I8、I9中特征肽阳性检出≥3条，则视为金黄色葡萄球菌阳性。3.如权利要求1所述金黄色葡萄球菌组肠毒素特征肽，其特征在于，SEA1、SEA2特征肽的阳性检出≥1条，则视为金黄色葡萄球菌肠毒素A阳性；SEB1、SEB2特征肽的阳性检出≥1条，则视为金黄色葡萄球菌肠毒素B阳性。4.如权利要求1所述的靶向分析检测方法，其特征在于，采用液相色谱
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质谱联用系统对金黄色葡萄球菌及肠毒素的组合特征肽进行检测；优选地，采用LC
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ESI/QQQ MRM模式进行检测。5.一种基于组合特征肽的金黄色葡萄球菌及肠毒素检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括权利要求1中所述的金黄色葡萄球菌及肠毒素的组合特征肽。6.如权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括金黄色葡萄球菌免疫亲和磁珠(A)、增菌液(B)、生理盐水(C)、Buffer ...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洪彬，王玉迎，赵宏，董志珍，赵良娟，赵化冰，
申请(专利权)人：天津海关动植物与食品检测中心，
类型：发明
国别省市：