一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，更具体的涉及一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法。一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，包括以下步骤：S01：细胞培养；S02：细胞诱导分化；S03：细胞分化程度判断。经本发明专利技术开发的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法可以高效快速的进行分化，避免了细胞分化过程中出现减少的现象；经本发明专利技术开发的方法可以保证在分化7天就有大面积脂滴出现，保证了细胞分化的顺利进行；经本申请开发的方法提高了细胞培养分化的效率，减少了空气中二氧化碳等物质对培养基的影响进而对细胞培养过程造成的损害。培养基的影响进而对细胞培养过程造成的损害。

【技术实现步骤摘要】
一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法


[0001]本专利技术属于生物
，更具体的涉及一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法。

技术介绍

[0002]间充质干细胞是一种多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力。随着科技的进步，研究者们致力于研究间充质干细胞的发展，主要因为其在临床的应用较多，在一些人类现阶段面临的疑难杂症的攻克上有待发挥更大的作用。
[0003]间充质干细胞分化成脂的研究也是一个重要的研究方向。尤其是现阶段随着美容修复行业的发展，脂肪组织是重建和修复再生组织的种子细胞来源，可大大驱动新生组织的重建。如果可以开发一种高效的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，可降低此类工作的难度，为美容行业的发展提供便捷。

技术实现思路

[0004]为了解决上述技术问题，本专利技术的第一方面提供了一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，包括以下步骤：
[0005]S01：细胞培养；
[0006]S02：细胞诱导分化；
[0007]S03：细胞分化程度判断。
[0008]作为一种优选的技术方案，S01步骤所述的细胞培养为人间充质干细胞培养。
[0009]作为一种优选的技术方案，S02步骤所述的细胞诱导分化通过加入诱导分化成脂试剂进行诱导。
[0010]作为一种优选的技术方案，S03步骤所述的细胞分化程度判断通过染色剂染色判断。
[0011]作为一种优选的技术方案，所述的染色剂选自脂溶性染色剂中的一种。<br/>[0012]作为一种优选的技术方案，所述的脂溶性染色剂选自苏丹III、苏丹IV、甲基橙、苏丹红5B中的至少一种。
[0013]作为一种优选的技术方案，S01步骤所述的细胞培养采用的培养基为MM3培养基；所述的MM3培养基由血清替代物和间充质干细胞基础培养基组成。
[0014]作为一种优选的技术方案，所述的血清替代物和间充质干细胞基础培养基的体积比为1：18～21。
[0015]作为一种优选的技术方案，所述的血清替代物和间充质干细胞基础培养基的体积比为1：19。
[0016]本专利技术的第二方面提供了一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法的应用，用于脐带、脂肪、胎盘、羊膜的间充质干细胞诱导分化成脂。
[0017]有益效果：本专利技术提供的高效的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，具有以下
优点：
[0018]1.经本专利技术开发的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法可以高效快速的进行分化，避免了细胞分化过程中出现减少的现象；
[0019]2.经本专利技术开发的方法可以保证在分化7天就有大面积脂滴出现，保证了细胞分化的顺利进行；
[0020]3.经本申请开发的方法提高了细胞培养分化的效率，减少了空气中二氧化碳等物质对培养基的影响进而对细胞培养过程造成的损害。
具体实施方式
[0021]结合以下本专利技术的优选实施方法的详述以及包括的实施例可进一步地理解本专利技术的内容。除非另有说明，本文中使用的所有技术及科学术语均具有与本申请所属领域普通技术人员的通常理解相同的含义。如果现有技术中披露的具体术语的定义与本申请中提供的任何定义不一致，则以本申请中提供的术语定义为准。
[0022]在本文中使用的，除非上下文中明确地另有指示，否则没有限定单复数形式的特征也意在包括复数形式的特征。还应理解的是，如本文所用术语“由
…
制备”与“包含”同义，“包括”、“包括有”、“具有”、“包含”和/或“包含有”，当在本说明书中使用时表示所陈述的组合物、步骤、方法、制品或装置，但不排除存在或添加一个或多个其它组合物、步骤、方法、制品或装置。此外，当描述本申请的实施方式时，使用“优选的”、“优选地”、“更优选的”等是指，在某些情况下可提供某些有益效果的本专利技术实施方案。然而，在相同的情况下或其他情况下，其他实施方案也可能是优选的。除此之外，对一个或多个优选实施方案的表述并不暗示其他实施方案不可用，也并非旨在将其他实施方案排除在本专利技术的范围之外。
[0023]为了解决上述技术问题，本专利技术的第一方面提供了一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，包括以下步骤：
[0024]S01：细胞培养；
[0025]S02：细胞诱导分化；
[0026]S03：细胞分化程度判断。
[0027]在一些优选的实施方式中，S01步骤所述的细胞培养为人间充质干细胞培养。
[0028]在一些优选的实施方式中，S01步骤所述的细胞培养时间为1～2天。
[0029]在一些优选的实施方式中，S02步骤所述的细胞诱导分化通过加入诱导分化成脂试剂进行诱导。
[0030]诱导分化成脂试剂，购于以色列Biological Industries(BioInd)公司。
[0031]在一些优选的实施方式中，S02步骤中加入的诱导分化试剂每隔24～48小时更换一次。
[0032]在一些优选的实施方式中，S02步骤所述的诱导分化时间为7～9天。
[0033]在一些优选的实施方式中，S03步骤所述的细胞分化程度判断通过染色剂染色判断。
[0034]在一些优选的实施方式中，S03步骤中出现脂滴后加入染色剂进行细胞分化程度判断。
[0035]在一些优选的实施方式中，所述的染色剂选自脂溶性染色剂中的一种。
[0036]在一些优选的实施方式中，所述的脂溶性染色剂选自苏丹III、苏丹IV、甲基橙、苏丹红5B中的至少一种。
[0037]在一些优选的实施方式中，所述的脂溶性染色剂选自苏丹红5B。
[0038]苏丹红5B，购于以色列Biological Industries(BioInd)公司。
[0039]在一些优选的实施方式中，S01步骤所述的细胞培养采用的培养基为MM3培养基；所述的MM3培养基由血清替代物和间充质干细胞基础培养基组成。
[0040]间充质干细胞基础培养基，型号05
‑
200
‑
1A，购于以色列Biological Industries(BioInd)公司；血清替代物，型号EPAGMP
‑
500，购于EliteCell生物医药集团公司。
[0041]在一些优选的实施方式中，所述的血清替代物和间充质干细胞基础培养基的体积比为1：18～21。
[0042]在一些优选的实施方式中，所述的血清替代物和间充质干细胞基础培养基的体积比为1：19。
[0043]经过申请人大量创造性实验探究证明，在本申请中选择以色列BiologicalIndustries(BioInd)公司的间充质干细胞基础培养基和EliteCell生物医药集团的血清替代物可以保证间充质干细胞迅速分化成脂，在分化成脂实验进行7天后，就可以通过显微镜观察到大面积脂滴出现，证明了此方法促使人间充质干细胞分化成脂的高效性。并且在血清替代物和间充质干细胞基础培养基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，其特征在于，包括以下步骤：S01：细胞培养；S02：细胞诱导分化；S03：细胞分化程度判断。2.根据权利要求1所述的高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，其特征在于，S01步骤所述的细胞培养为人间充质干细胞培养。3.根据权利要求1所述的高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，其特征在于，S02步骤所述的细胞诱导分化通过加入诱导分化试剂进行诱导。4.根据权利要求1所述的高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，其特征在于，S03步骤所述的细胞分化程度判断通过染色剂染色判断。5.根据权利要求4所述的高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂的方法，其特征在于，所述的染色剂选自脂溶性染色剂中的一种。6.根据权利要求5所述的高效率的人间充质干细胞诱导分化成脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱灏，
申请(专利权)人：华夏源细胞工程集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：