低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutY119V制造技术

本发明专利技术公开了一种低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutY119V，该突变体MutY119V具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。与野生酶InuAMN8相比，突变酶MutY119V的热活性和热稳定性发生了改变，在低温环境下具有更高的催化活性且更容易热变性，有利于通过温度变化控制酶的催化反应。50℃处理后，野生酶InuAMN8的酶活从88％降至81％，而突变酶MutY119V的酶活从75％降至41％；55℃处理后，野生酶InuAMN8的酶活从70％降至17％，而突变酶MutY119V在55℃处理10min后完全失活。本发明专利技术的突变体MutY119V可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。酿酒和洗涤等行业。酿酒和洗涤等行业。

【技术实现步骤摘要】
低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutY119V


[0001]本专利技术涉及一种外切菊粉酶突变体，具体涉及一种低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutY119V。

技术介绍

[0002]菊粉是构成菊芋块茎的主要成分，可占其湿重的19％或干重的70％。菊芋易种植、产量高，且耐寒、耐贫瘠及耐干旱，是重要的非粮作物。
[0003]菊粉由果糖聚合而成，末端与一分子葡萄糖残基相连。外切菊粉酶从菊粉的非还原端逐个水解β
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2,1糖苷键，最终将菊粉降解为果糖和少部分的葡萄糖，该果糖浆中果糖含量可达到总糖量的95％。果糖广泛用于食品、医药、生物能源等行业，可作为天然甜味剂替代蔗糖，可以供糖尿病患者食用，可作为原料用来生产生物乙醇等。因而，外切菊粉酶可应用于食品、酿酒和生物能源等行业中(Singh RS et al.International Journal of Biological Macromolecules,2017,96:312
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322.)。
[0004]低温酶具有重要的开发价值。低温下的食品处理可防止微本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.低温活性提高的外切菊粉酶突变体MutY119V，其特征在于，该突变体MutY119V具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的突变体MutY119V的编码基因mutY119V。3.根据权利要求2所述的编码基因mutY119V，其特征在于，该编码基因mutY119V具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。4.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutY119V的重组载体。5.包含如权利要求2或3所述的编码基因mutY119V的重组菌。6.如权利要求1所述的突变体MutY119V的制备方法，其特征在于，该方法包含：将具有如SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的野生外切菊粉酶基因inuAMN8和表达载体pEasy
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E1相连接，获得包含inuAMN8的重组表达质粒pEasy
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E1
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inuAMN8；以质粒pEasy
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E1
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inuAMN8为模板，以如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的突变引物，通过PCR扩增得到包含mutY119V的重组表达质粒pEasy
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E1

【专利技术属性】
技术研发人员：周峻沛，张蕊，黄遵锡，岑潇龙，唐湘华，许波，李俊俊，韩楠玉，吴倩，高艳秀，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：