低温适应性和盐适应性改良的菊粉酶突变体MutS120D及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程及蛋白质改造技术领域，公开了一种低温适应性和盐适应性改良的菊粉酶突变体MutS120D及其应用，该突变体MutS120D的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第120位氨基酸(丝氨酸)突变为天冬氨酸获得，MutS120D的序列如SEQIDNO.1所示。与野生酶InuAMN8相比，突变酶MutS120D的低温活性提高，在氯化钠中的活性提高，有利于酶在低温环境和高盐环境生物技术领域下的应用。本发明专利技术的低温和盐适应性改良的菊粉酶突变体MutS120D可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。酿酒和洗涤等行业。酿酒和洗涤等行业。

【技术实现步骤摘要】
低温适应性和盐适应性改良的菊粉酶突变体MutS120D及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，涉及蛋白质改造技术，具体为低温适应性和盐适应性改良的菊粉酶突变体MutS120D及应用。

技术介绍

[0002]菊粉主要存在于菊芋、菊苣、蒲公英、牛蒡和朝鲜蓟等植物体的根部或茎部，是一种来源丰富的可再生资源。菊芋价格低廉、产量高，更重要的是菊芋属于非粮作物，这些特点使菊芋的有效利用成为关注的焦点。
[0003]菊粉经外切菊粉酶水解，可得到糖含量高达95％的果糖浆。果糖甜度是蔗糖的1.5
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2.0倍，并且热量低、风味好，可作为天然甜味剂替代蔗糖；果糖代谢不受胰岛素的制约，可以供糖尿病患者食用；果糖经酵母等发酵后可以用来生产生物乙醇、2,3
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丁二醇等。因而，外切菊粉酶可应用于食品、酿酒和生物能源等行业中(Singh RS et al.International Journal of Biological Macromolecules,2017,96:312～322.)。
>[0004]低温酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低温适应性和盐适应性改良的菊粉酶突变体MutS120D，其特征在于，所述的突变体MutS120D的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.权利要求1所述突变体MutS120D的编码基因mutS120D，其特征在于，所述的编码基因mutS120D的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.包含权利要求2所述的编码基因mutS120D的重组载体。4.包含权利要求2所述的编码基因mutS120D的重组菌。5.权利要求1所述的菊粉酶突变体MutS120D的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将野生外切菊粉酶基因inuAMN8和表达载体pEasy
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E1相连接，获得包含inuAMN8的重组表达质粒pEasy
‑
E1
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inuAMN8；2)以质粒pEasy
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【专利技术属性】
技术研发人员：周峻沛，张蕊，黄遵锡，岑潇龙，唐湘华，许波，李俊俊，韩楠玉，吴倩，高艳秀，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：