一种用于Bax和Bcl-2的免疫组织化学染色方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，公开了一种用于Bax和Bcl

【技术实现步骤摘要】
一种用于Bax和Bcl
‑
2的免疫组织化学染色方法


[0001]本专利技术涉及生物
，特别涉及一种用于Bax和Bcl
‑
2的免疫组织化学染色方法。

技术介绍

[0002]免疫组织化学法(Immunohistochemistry，IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。Bcl
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2蛋白质家族是细胞凋亡过程中的一类重要调节因子，目前发现其成员个数己超过25个。
[0003]Bcl
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2蛋白质家族主要通过相互作用使线粒体外膜通透并释放促凋亡因子导致细胞凋亡，所有Bcl
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2蛋白质只有定位在线粒体外膜才能发挥调控细胞凋亡的作用。其分为两类：1.效应者：包括Bax等为促凋亡蛋白，一般都含有BH1
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BH4结构域，生理状态下大多以未活化的单体形式定位于细胞浆中，内质网等细胞器中也有少本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫组织化学染色方法，其特征在于，所述染色方法中，包括：采用胰酶
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EDTA溶液进行抗原修复。2.根据权利要求1所述的免疫组织化学染色方法，其特征在于，所述染色方法，具体包括如下步骤：S1、取动物组织制成蜡块后切片，再脱蜡，水化处理；S2、将所述S1得到的切片置于0.1～0.15体积％的胰酶
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EDTA溶液中进行抗原修复；S3、将所述S2得到的切片滴加1～3体积％的过氧化氢溶液进行孵育；S4、往所述S3得到的切片加入一抗进行孵育；S5、往所述S4得到的切片加入二抗进行孵育；S6、对所述S5得到的切片进行DAB染色；S7、将所述S6得到的切片依次采用苏木素复染、盐酸酒精分化、稀碳酸锂水溶液返蓝操作；S8、将所述S7得到的切片进行脱水，使透明，封片。3.根据权利要求2所述的免疫组织化学染色方法，其特征在于，所述S1具体为：取动物组织制成蜡块后切片，然后将得到的切片在常温下置于二甲苯中浸泡10～12分钟，更换二甲苯后再重复浸泡两次；采用100％，95％，90％，80％，70％体积百分比的乙醇，浓度由高到低依次浸泡3～5分钟，其后蒸馏水浸泡3～5分钟，PBS清洗1～3次，每次3～6分钟。4.根据权利要求2所述的免疫组织化学染色方法，其特征在于，所述S2具体为：将所述S1得到的切片置于0.1～0.15体积％的胰酶
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EDTA溶液中，于35～40℃下孵育20～40分钟，其后PBS清洗1～3次，每次3～6分钟。5.根据权利要求4所述的免疫组织化学染色方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李樵锋，张伟伦，梁浩钊，辛宁，许正涛，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：