一种防脱毛狗粮及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种防脱毛狗粮及其制备方法，包括玉米芯、成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫、猪肉糜、起酥油、白砂糖和水的植物乳杆菌与富硒酵母菌共同复合发酵的骨头型饼干。利用基因工程手段将金针菇体内体内真菌免疫调节蛋白重组到粗毛纤孔菌体内，获得高真菌免疫调节蛋白表达的粗毛纤孔菌菌丝体。将含有真菌免疫调节蛋白基因的粗毛纤孔菌菌丝体接种到玉米芯上培养，选取木质素过氧化物酶、漆酶、木聚糖酶活性高而纤维素酶低时停止玉米芯发酵，以保持玉米芯纤维素含量。利用植物乳杆菌发酵猪肉糜，并添加粗毛纤孔菌粉。二次发酵时添加粗毛纤孔菌粉、植物乳杆菌发酵猪肉的猪肉，与富硒酵母共同发酵，然后包裹玉米芯，制得狗狗可啃食、高免疫力狗粮。免疫力狗粮。

【技术实现步骤摘要】
一种防脱毛狗粮及其制备方法


[0001]本专利技术涉及食品
，具体为一种防脱毛狗粮及其制备方法。

技术介绍

[0002]免疫球蛋白(是代表机体体液免疫功能的一项重要指标，在体内承担免疫调节作用，开发的产品己被用于治疗免疫相关疾病。具有由2条重链和2条轻链构成的“Y”型结构，顶端的可变区是主要活性区域。真菌免疫调节蛋白(FIP)是从真菌中分离的一类结构与重链可变区结构极其相似而且具有免疫调节功能的小分子蛋白质。目前已发现7种，其中来源于金针薛的免疫调节蛋白经研究具有免疫调节作用，具有激活淋巴细胞产生细胞因子、预防治疗哮喘、鼻炎、湿疹等过敏症和抑制癌细胞生长等生物活性。但目前从金针燕子实体中提取天然产率极低(最高产率尚不足88mg/Kg)证明其在金针菇体中表达水平较低，因此通过品种改良或基因重组技术生产该蛋白具有重要意义。
[0003]狗狗脱毛一般有两点原因，患皮肤病或者自身免疫力低下。提升狗狗自身免疫力可以避免狗狗非自然脱毛。另外，能给狗狗真正啃食的狗粮有限，成本也高。
[0004]因此，设计成本低和含免疫球蛋白的一种防脱毛狗粮及其制备方法是很有必要的。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种防脱毛狗粮及其制备方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：一种防脱毛狗粮，包括玉米芯、成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫、猪肉糜、起酥油、白砂糖和水的植物乳杆菌与富硒酵母菌共同复合发酵的骨头型饼干。
[0007]根据上述技术方案，所述玉米芯是经过粗毛纤孔菌发酵降解7
‑
10天的玉米芯。
[0008]根据上述技术方案，所述成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫是含有金针菇真菌免疫调节蛋白的基因工程成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫。
[0009]一种防脱毛狗粮的制备方法，包括以下具体步骤：
[0010]步骤一：取低筋面粉，加适量水，富硒酵母搅拌制得面团，静置于28
‑
32℃、湿度60％的醒发箱内发酵3
‑
4h，获得一次发酵面团；富硒酵母可以为狗狗提高良好的蛋白硒，提升抗自由基能力；
[0011]步骤二：取猪肉糜，添加成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫，利用植物乳杆菌30℃厌氧搅拌发酵2
‑
4h，获得乳酸发酵猪肉糜；粗毛纤孔菌粉富含真菌多糖，将促进植物乳杆菌生长，节省发酵时间，同时提升猪肉口感和品质，也利于狗狗消化；
[0012]步骤三：将步骤二获得的乳酸发酵猪肉糜、起酥油、白砂糖、成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫加入到步骤一获得的一次发酵面团中，搅拌均匀，静置于温度35℃、湿度70％的醒发箱内发酵3
‑
6h，获得饼干成型面团；植物乳杆菌可显著提高面团中还原糖的含量，抑制丙烯
酰胺的产生；
[0013]步骤四：发酵完成的面团用压片机压至2mm厚，并包裹在玉米芯外部，制成骨头形状，在上火180℃、下火160℃下烘烤15min，冷却后得到狗粮饼干的成品。
[0014]根据上述技术方案，所述步骤三中材料质量配比：乳酸发酵猪肉糜3
‑
5份、起酥油0.5
‑
1.5份、白砂糖0.1
‑
0.5份、成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫0.2
‑
0.8份、一次发酵面团10
‑
25份。
[0015]根据上述技术方案，所述成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫的制备：通过RT
‑
PCR方法从金针菇体内获得真菌免疫调节蛋白(FIP)cDNA序列，我们在FIP的C端添加His标签，方便蛋白的纯化；利用限制性内切酶EcoR I、BamHI酶双酶切，T4DNA连接酶连接，构建了植物双元表达载体p139035S
‑
FIP,并将重组质粒转入到根癌农杆菌EHA05中。
[0016]根据上述技术方案，所述根癌农杆菌EHA05通过凝胶电泳检测，发现条带与目标基因大小一致，说明重组质粒已经转移到根癌农杆菌EHA05体内；以粗毛纤孔菌菌丝球为受体材料，根癌农杆菌EHA05的菌液浓度OD600为0.5，侵染时间20
‑
40min，在乙酞丁香酮为200μmol/L的共培养基上共培养72h。
[0017]根据上述技术方案，所述基因工程粗毛纤孔菌通过PCR与Southern杂交结果表明免疫球蛋白基因已整合到粗毛纤孔菌的基因组中，在无选择压力的PDA固体培养基上继代培养五次后仍检测到基因的存在,表明基因在转基因粗毛纤孔菌中可稳定遗传，获得高真菌免疫调节蛋白表达的粗毛纤孔菌菌丝体。
[0018]根据上述技术方案，所述基因工程粗毛纤孔菌扩大培养：培养基质量比木屑3
‑
5份，稻壳2
‑
3份，玉米粉10
‑
15份，木糖0.5
‑
1份，酵母浸粉0.8
‑
2份，石灰0.5
‑
0.8份，石膏0.5
‑
1.2份，与40
‑
70份水混合搅拌均匀，包裹在玉米芯外部，培养9
‑
12天，转移到60份木屑上继续培养15
‑
20天，培育出子实体。
[0019]根据上述技术方案，所述玉米芯发酵后切割制成长10
‑
15cm，巴氏消毒备用；成熟基因工程粗毛纤孔菌子实体清洗后，低温干燥并研磨成粉沫备用。
[0020]粗毛纤孔菌在玉米芯粉上培养，1天后检测到木质素过氧化物酶和赖锰过氧化物酶活性，木质素过氧化物酶在第5天达到最高值，赖锰过氧化物酶在第6天活达到最大值。漆酶酶活相对较低,第7天达到最大值。由此可知,前7天，木质素过氧化物酶和赖锰过氧化物酶表现出较高的活性,是粗毛纤孔菌产生的与木质素生物降解重要的胞外酶。随着粗毛纤孔菌的生长，木聚糖酶活力逐渐增加,在第10天达到最大值。而纤维素酶在培养初期酶活力极低，培养至第16天时酶活力达到最大值。所以选取粗毛纤孔菌生长了9
‑
12天的玉米芯。
[0021]与现有技术相比，本专利技术所达到的有益效果是：本专利技术，
[0022](1)通过RT
‑
PCR方法从金针菇体内获得真菌免疫调节蛋白(FIP)cDNA序列，利用限制性内切酶EcoR I、BamHI酶双酶切，T4DNA连接酶连接，构建了植物双元表达载体p139035S
‑
FIP,并将重组质粒转入到根癌农杆菌EHA05中。以粗毛纤孔菌菌丝球为受体材料，通过根癌农杆菌介导法转入真菌免疫调节蛋白基因，获得高真菌免疫调节蛋白表达的粗毛纤孔菌菌丝体，培养测试，发现菌盖中表达量最高。金针菇免疫调节蛋白作为真菌免疫调节蛋白的一种，具有促进淋巴细胞的活性和诱导白介素
‑
2和γ
‑
干扰素产生的作用，可提升狗狗自身免疫力，避免因自身免疫力不足而引起脱毛；
[0023](2)将含有真菌免疫调节蛋白基因的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种防脱毛狗粮，其特征在于：包括玉米芯、成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫、猪肉糜、起酥油、白砂糖和水的植物乳杆菌与富硒酵母菌共同复合发酵的骨头型饼干。2.根据权利要求1所述的一种防脱毛狗粮，其特征在于：所述玉米芯是经过粗毛纤孔菌发酵降解7
‑
10天的玉米芯。3.根据权利要求1所述的一种防脱毛狗粮，其特征在于：所述成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫是含有金针菇真菌免疫调节蛋白的基因工程成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫。4.一种防脱毛狗粮的制备方法，包括以下具体步骤：步骤一：取低筋面粉，加适量水，富硒酵母搅拌制得面团，静置于28
‑
32℃、湿度60％的醒发箱内发酵3
‑
4h，获得一次发酵面团；步骤二：取猪肉糜，添加成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫，利用植物乳杆菌30℃厌氧搅拌发酵2
‑
4h，获得乳酸发酵猪肉糜；步骤三：将步骤二获得的乳酸发酵猪肉糜、起酥油、白砂糖、成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫加入到步骤一获得的一次发酵面团中，搅拌均匀，静置于温度35℃、湿度70％的醒发箱内发酵3
‑
6h，获得饼干成型面团；步骤四：发酵完成的面团用压片机压至2mm厚，并包裹在玉米芯外部，制成骨头形状，在上火180℃、下火160℃下烘烤15min，冷却后得到狗粮饼干的成品。5.根据权利要求4所述的一种防脱毛狗粮的制备方法，其特征在于：所述步骤三中材料的质量配比：乳酸发酵猪肉糜3
‑
5份、起酥油0.5
‑
1.5份、白砂糖0.1
‑
0.5份、成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫0.2
‑
0.8份、一次发酵面团10
‑
25份。6.根据权利要求4所述的一种防脱毛狗粮的制备方法，其特征在于：所述成熟粗毛纤孔菌子实体粉沫的制备：通过RT
‑
PCR方法从金针菇体内获得真菌免疫调节蛋白(FIP)cDNA序列，我们在FIP的C端添加His标...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘艳，
申请(专利权)人：刘艳，
类型：发明
国别省市：