一种低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法技术

本发明专利技术公开了一种低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，该方法包括对经电泳分离蛋白质处理后的聚丙烯酰胺凝胶依序进行固定处理、敏化处理、水洗处理、银染处理、显色处理、终止处理和水洗处理后，实现对蛋白质的染色处理，其中，敏化处理过程中，还加入有聚乙烯吡咯烷酮、2

【技术实现步骤摘要】
一种低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法


[0001]本专利技术涉及蛋白质检测、生物化学凝胶电泳染色领域，尤其涉及一种低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法。

技术介绍

[0002]聚丙烯酰胺凝胶电泳具有高分辨的性能，是现代研究蛋白质分子各种性质特征的常用方法。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白，再结合电泳后的转硝酸纤维素膜，PVDF膜等处理方法，被称之为Western Blot蛋白印记技术。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳，尤其是目前使用最多的SDS聚丙酰胺凝胶电泳，可以方便的分离各种蛋白，进而对蛋白分子进行定性和定量的鉴定，是研究基因表达和功能的重要方法。
[0003]目前，蛋白经过SDS聚丙酰胺凝胶电泳后，将会分成不可见的，按分子量大小分布的条带，条带深浅与该处位点的蛋白质含量呈正相关。但电泳所获得的这些条带不可见，需要通过合适的染色方法，在透明的聚丙烯酰胺凝胶上进行蛋白条带显色，才能有效的获取所需分析的蛋白特征表达，分子大小，分子含量等信息。
[0004]基于蛋白的聚丙烯酰胺凝胶染色技术已开发出银染、锌染和铜染等金属离子染色方法，以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，该方法包括对经电泳分离蛋白质处理后的聚丙烯酰胺凝胶依序进行固定处理、敏化处理、水洗处理、银染处理、显色处理、终止处理和水洗处理后，实现对蛋白质的染色处理，其特征在于，敏化处理过程中，还加入有聚乙烯吡咯烷酮、2
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氨基
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甲基
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丙醇和吐温的混合液。2.如权利要求1所述的低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其特征在于，所述的聚乙烯吡咯烷酮、2
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氨基
‑2‑
甲基
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丙醇和吐温的终浓度均为5％。3.如权利要求2所述的低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其特征在于，所述聚乙烯吡咯烷酮的分子量为58000D。4.如权利要求2所述的低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其特征在于，所述的吐温为吐温
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80。5.如权利要求1所述的低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其特征在于，银染处理过程中，还加入有二甲苯。6.如权利要求5所述的低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其特征在于，银染处理过程中，所加入二甲苯的终浓度为0.5％。7.如权利要求6所述的低背景银染聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法，其特征在于，其包括如下具体步骤：(1)将经电泳分离蛋白质处理后的聚丙烯酰胺凝胶置于固定液中固定处理30min；(2)将固定处理后的聚丙烯酰胺凝胶置于敏化处理液中敏化处理40min，其中，敏化处理液中还同步加入有聚乙烯吡咯烷酮、2
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氨基
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甲基
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【专利技术属性】
技术研发人员：张其清，江一波，郑琳琳，林璐琳，
申请(专利权)人：深圳市人民医院，
类型：发明
国别省市：