【技术实现步骤摘要】
一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法
本专利技术涉及一种测定实验方法，特别涉及一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法。
技术介绍
食品过敏对人们的生活质量产生了负面影响，有的甚至会危及生命。极少量的杏仁也会导致严重的反应，并且它们被包含在最常引起过敏的一组食物中。有研究表明多酚和富含多酚的果汁能与花生过敏原结合。酚酸类化合物和膳食多酚能有效的减弱花生过敏原与IgE结合和嗜碱性粒细胞脱粒。各种水果，蔬菜和饮料都富含丰富的多酚，并且它们为人们提供多种健康益处。多酚可降低氧化应激，并可预防癌症或心血管疾病。另外，多酚可通过疏水性和氢相互作用与蛋白质形成可溶性或不溶性复合物。Soares等人报道多酚与不同的蛋白质相关联包括牛血清白蛋白和人α-淀粉酶。多酚化合物的大小和结构显著改变其结合的亲和力，随着分子量增加或在没食子酰基团存在下亲和力增加。茶多酚与乳α-和β-酪蛋白形成复合物，并且结构分析显示出疏水性和亲水性相互作用。这个想法进一步延伸到食物过敏原，多酚与食物过敏原相互作用，从而降低过敏食物的过敏性。例如，Chung...
【技术保护点】
1.一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法，其特征在于，包括如下步骤：/n步骤1：准备材料：Folin-Ciocalteu试剂、没食子酸标准品、考马斯亮蓝染液、蛋白预染Marker、β-巯基乙醇、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液、三羟甲基氨基甲烷、十二烷基硫酸钠SDS、甘氨酸、POM汁、BB汁、CG汁；/n步骤2：没食子酸标准曲线绘制/n准确移取没食子酸标准溶液(1000mg/L)2.5、5.0、10.0、15.0、20.0至50.0mL容量瓶中，分别配制成质量浓度为50、100、200、300、400mg/L的溶液，然后加入5.0mL质量浓度为40％的Folin-Cioc...
【技术特征摘要】
1.一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：准备材料：Folin-Ciocalteu试剂、没食子酸标准品、考马斯亮蓝染液、蛋白预染Marker、β-巯基乙醇、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液、三羟甲基氨基甲烷、十二烷基硫酸钠SDS、甘氨酸、POM汁、BB汁、CG汁；
步骤2：没食子酸标准曲线绘制
准确移取没食子酸标准溶液(1000mg/L)2.5、5.0、10.0、15.0、20.0至50.0mL容量瓶中，分别配制成质量浓度为50、100、200、300、400mg/L的溶液，然后加入5.0mL质量浓度为40％的Folin-Ciocalteu试剂，反应8min后分别加入4.0mL7.5％Na2CO3溶液，再用去离子水定容至10ml，分别于30℃下反应1.0h，测定提取液在760nm处的吸光值；
步骤3：总酚的测定
使用Folin-Ciocalteu比色法测定POM汁、BB汁和CG汁的总酚量，并表示为每升毫克没食子酸当量，为制备样品，将稀释的500μLPOM汁、BB汁、CG汁和2.5mL稀释的Folin-Ciocalteu试剂在室温下混合8min，随后加入1.5mL的7.5％Na2CO3，在暗处培育2小时后，使用紫外可见分光光度计测量样品在760nm处的吸光度；
步骤4：SDS-PAGE电泳；
步骤5：纳米粒度和Zeta电位仪分析。
2.如权利要求1所述的多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法，其特征在于，步骤4包括如下步骤：
(1)样品处理：多酚与杏仁提取物的相互作用通过SDS-PAGE电泳进行评估；
(2)上样：一般加样体积为10-15μL，一个孔中加一个样品，同时用已知蛋白分子量的蛋白mark作为对照，一般mark的上样量为3μl；
(3)电泳：连接电泳仪，开启电源，电压调制80V，30min后，等到染料进入分离胶后将电压调制为120V，40-60min，直到染料到达分离胶底部距离下缘1cm左右时，停止电泳；
(4)切胶：取下凝胶板，去除浓缩胶，对照mark的分子量，将分离胶切成合适大小；
(5)考马斯亮蓝染色：将凝胶放入烧杯中，加入超纯水煮沸弃液；配制染...
【专利技术属性】
技术研发人员：张爱琳，杨薇，张华，梁筱研，迟越，苗颖，
申请(专利权)人：天津农学院，
类型：发明
国别省市：天津;12
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。