一种红曲糟抗热肽剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于菌剂抗热保护剂技术领域，更具体地涉及一种红曲糟抗热肽剂、制备方法及应用。取新鲜红曲糟烘干，然后进行超微粉碎，得到红曲糟粉；将所述红曲糟粉配制成的红曲糟悬浊液，用纤维素酶降解，然后在高温反应釜中反应之后用微射流进行均质，得到微细化红曲糟；用淀粉酶降解之后进行沉淀，取沉淀物用蛋白酶复合物进行酶解，得到红曲糟抗热肽剂初品，将所述红曲糟抗热肽剂初品灭酶，离心后收集上清液，旋蒸蒸发浓缩，将浓缩液冷冻干燥，得到红曲糟抗热肽剂。将所述红曲糟抗热肽剂用于提高酵母菌剂的菌体存活率，效果非常显著。

【技术实现步骤摘要】
一种红曲糟抗热肽剂及其制备方法与应用
本专利技术属于酵母菌剂热保护剂
，更具体地涉及一种红曲糟抗热肽剂、微细化红曲糟定向酶解的制备方法及酵母热保护应用。
技术介绍
在菌剂产业化生产实践中，提高干制菌剂菌体的存活率，是长期以来保护剂选择、改良及优化的主要目的。喷雾干燥、流化床等热干燥方式是产业化、规模化批量制备工业微生物菌剂的常用手段。较高的干燥温度可以给发酵工业带来更有利的经济效益，并能大幅降低水电资源消耗、缩短生产周期、降低成本。干燥过程中，菌剂和热空气充分接触，高温和脱水导致菌体死亡，活菌量降低。因此，在热干燥过程中采用保护剂以提高菌体存活率具有重要意义。菌剂在脱水过程中，热会造成菌体DNA、RNA、蛋白质(包括酶类)、细胞膜和核糖体等物质内在损伤，从而导致细胞失活。在热干燥过程中，抗热保护剂可通过不同途径在一定程度上减少菌体细胞的热损害。目前，常用的保护剂主要有以下几类：调节渗透压的添加剂主要为碱金属缓冲盐、糖类、多元醇、氨基酸等；乳化剂主要有司盘类、吐温类；抗氧化剂包括二丁基羟基甲苯(BHT)、丁基丁基羟基茴香醚(BHA)和没食子酸内脂(PC)、维生素C、酚类等；还有一些大分子保护剂如阿拉伯胶、可溶性淀粉、脱脂乳、酪蛋白、乳清蛋白、β-环糊精、微晶纤维素等。在如下文献中还可以发现更多与上述技术方案相关的信息。中国专利技术专利CN104068371B“一种豆瓣辣酱促熟增香发酵菌剂及其制备方法”中以6-10％蔗糖、1-5％明胶与2-5％甘油作为短小芽胞杆菌(Bacilluspumilus)、发酵乳杆菌(L.fermentum)、双发酵乳杆菌(L.bifermentans)、鲁氏酵母(Zygosaccharomycesrouxii)、米曲霉(Aspergillusoryzae)扩繁培养、混合发酵得到的促熟增香发酵菌剂的抗热保护剂。中国专利技术专利申请CN103283975A“一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法”中以脱脂奶粉作为益生菌的抗热保护剂。中国专利技术专利申请CN107889888A“一种喷雾干燥制备抗氧化益生菌羊奶粉的方法”中以脱脂乳粉、蔗糖、葡萄糖、海藻糖、明胶和甘油溶液作为羊奶粉中干酪乳杆菌的抗热保护剂。近年来，生物活性肽因其来源广泛、易吸收利用、具有多种生理功能，成为蛋白领域新兴研究热点。生物活性肽不仅能促进生长，还可提高微生物低温、高渗透压等耐受性。目前，肽类对益生菌及酵母菌的热保护作用尚属研究空白。红曲黄酒是福建特产，黄酒生产的主要副产物是红曲糟，它是发酵酒醪经压榨、分离去酒液后的留下的固形物。红曲黄酒在生产过程中能产生20～30％的酒糟，以此推算，每年可产生2.5万吨以上的红曲糟。红曲糟干基中含有20-40％的蛋白质、20-30％的粗淀粉、10％左右的纤维素及少量的糖分、糊精、灰分等物质，其热能比较低，含有不溶性物质多，难以直接利用，一般酒厂将其作为普通的饲料低价出售或作为垃圾直接丢弃，利用率很低。这不仅污染生态环境，也造成酒糟中大量的可利用资源成为废物。因此，将红曲糟开发成为对益生菌及酵母菌具有热保护作用的抗热肽剂，提供了红曲糟利用的新途径，可极大地提高红曲糟的附加值，具有很好的经济和社会效益。
技术实现思路
鉴于
技术介绍
存在的上述技术问题，需要提供一种红曲糟抗热肽剂、微细化红曲糟定向酶解制备红曲糟抗热肽剂的制备方法及酵母热保护应用，所述红曲糟抗热肽剂具备热保护作用、使干制酵母菌存活率得以提高的功效，所述微细化定向酶解制备红曲糟抗热肽剂的制备方法能大大提高红曲糟中的蛋白利用率和水解度，所述红曲糟抗热肽剂的酵母热保护应用能为干制酵母菌剂提供有效热保护，提高干制酵母菌剂时酵母存活率。为实现上述目的，在本专利技术的第一方面，专利技术人提供了一种红曲糟抗热肽剂的制备方法，包括以下步骤：取新鲜红曲糟烘干，然后进行超微粉碎，得到红曲糟粉；将所述红曲糟粉用去离子水配制成质量百分比分数为6-10％的红曲糟悬浊液，调节所述红曲糟悬浊液pH值为4-5，用质量百分比分数为1-1.5％的纤维素酶降解8h以上，然后在高温反应釜中反应，之后用微射流进行均质，得到微细化红曲糟；将所述微细化红曲糟的pH值调节为5.8-6.5，用淀粉酶降解之后在pH值为4.5时进行沉淀，得到沉淀物；将所述沉淀物用蛋白酶复合物进行酶解，得到红曲糟抗热肽剂初品，所述蛋白酶复合物由碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶以重量份比例(405-495)：(315-385)：(180-220)配制而成；将所述红曲糟抗热肽剂初品灭酶，然后离心收集上清液，将所述上清液旋蒸蒸发浓缩，得到浓缩液，将所述浓缩液冷冻干燥，得到红曲糟抗热肽剂。在本专利技术的第二方面，专利技术人提供了一种红曲糟抗热肽剂，采用本专利技术第一方面所述的制备方法制备得到。在本专利技术的第三方面，专利技术人提供了一种如本专利技术第二方面所述的红曲糟抗热肽剂在提高酵母菌剂的菌体存活率的应用，包含：60℃干制20min制备酵母菌剂条件下，1g酵母菌剂的新鲜菌坭添加1.5-7.5mg所述红曲糟抗热肽剂的步骤。区别于现有技术，上述技术方案至少具有以下有益效果：采用工业化生产红曲黄酒的废弃物红曲糟为原料，利用微细化定向酶解技术制备酵母抗热肽剂，不仅是对现有干制菌剂抗热保护剂种类的丰富，更提供了一种对红曲糟资源的有效回收利用途径。经测试发现，本专利技术提供的所述红曲糟抗热肽剂相比于采用普通酶解方法制备得到的红曲糟抗热保护剂的蛋白利用率提高17％以上，水解度提高13％以上。将所述红曲糟抗热肽剂用于60℃干制20min制备酵母菌剂时，酵母的存活率可达50.65％以上。而在同等条件下，加入相同添加量的其他抗热保护剂时，本专利技术提供的所述红曲糟抗热肽剂对酿酒酵母的热激存活促进作用显著高于其他抗热保护剂。附图说明图1为具体实施方式所述蛋白酶复合物中三种酶的配比优化设计试验的响应面图；图2为具体实施方式所述蛋白酶复合物中三种酶的配比优化设计试验的等高线图；图3为采用本专利技术提供的所述红曲糟抗热肽剂对酿酒酵母热激存活率的影响柱状图；图4为采用本专利技术提供的所述红曲糟抗热肽剂对酿酒酵母热激存活量的影响平板培养图示；图5为采用本专利技术提供的所述红曲糟抗热肽剂与常用抗热保护剂对酿酒酵母热激存活率的热保护作用曲线图。具体实施方式下面详细说明本专利技术第一方面所述的红曲糟抗热肽剂的制备方法、本专利技术第二方面所述的红曲糟抗热肽剂以及本专利技术第三方面所述的红曲糟抗热肽剂在提高酵母菌剂的菌体存活率的应用。首先说明本专利技术第一方面所述的红曲糟抗热肽剂的制备方法。该制备方法可更具体地描述成微细化红曲糟定向酶解制备红曲糟抗热肽剂的制备方法。一种红曲糟抗热肽剂的制备方法，包括以下步骤：取新鲜红曲糟烘干，然后进行超微粉碎，得到红曲糟粉；将所述红曲糟粉用去离子水配制成质量百分比分数为6-10％的红曲糟悬浊液，调节所述红曲糟悬浊液pH值为4-5，用质量百分比分数为1-1.5％的纤维素酶降解8h以上，然后在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种红曲糟抗热肽剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n取新鲜红曲糟烘干，然后进行超微粉碎，得到红曲糟粉；/n将所述红曲糟粉用去离子水配制成质量百分比分数为6-10％的红曲糟悬浊液，调节所述红曲糟悬浊液pH值为4-5，用质量百分比分数为1-1.5％的纤维素酶降解8h以上，然后在高温反应釜中反应，之后用微射流进行均质，得到微细化红曲糟；/n将所述微细化红曲糟的pH值调节为5.8-6.5，用淀粉酶降解之后在pH值为4.5时进行沉淀，得到沉淀物；/n将所述沉淀物用蛋白酶复合物进行酶解，得到红曲糟抗热肽剂初品，所述蛋白酶复合物由碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶以重量份比例(405-495)：(315-385)：(180-220)配制而成；/n将所述红曲糟抗热肽剂初品灭酶，然后离心收集上清液，将所述上清液旋蒸蒸发浓缩，得到浓缩液，将所述浓缩液冷冻干燥，得到红曲糟抗热肽剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种红曲糟抗热肽剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
取新鲜红曲糟烘干，然后进行超微粉碎，得到红曲糟粉；
将所述红曲糟粉用去离子水配制成质量百分比分数为6-10％的红曲糟悬浊液，调节所述红曲糟悬浊液pH值为4-5，用质量百分比分数为1-1.5％的纤维素酶降解8h以上，然后在高温反应釜中反应，之后用微射流进行均质，得到微细化红曲糟；
将所述微细化红曲糟的pH值调节为5.8-6.5，用淀粉酶降解之后在pH值为4.5时进行沉淀，得到沉淀物；
将所述沉淀物用蛋白酶复合物进行酶解，得到红曲糟抗热肽剂初品，所述蛋白酶复合物由碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶以重量份比例(405-495)：(315-385)：(180-220)配制而成；
将所述红曲糟抗热肽剂初品灭酶，然后离心收集上清液，将所述上清液旋蒸蒸发浓缩，得到浓缩液，将所述浓缩液冷冻干燥，得到红曲糟抗热肽剂。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述进行超微粉碎为将烘干后的红曲糟粉碎至D50为40-50μm，90％以上的红曲糟粉粒径小于150μm。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述在高温反应釜中反应的条件为：温度110-130℃，反应时间10-20min。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述用微射流...

【专利技术属性】
技术研发人员：林晓婕，梁璋成，苏昊，陈秉彦，何志刚，李维新，林晓姿，任香芸，
申请(专利权)人：福建省农业科学院农业工程技术研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35